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- 详细信息
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645
- 英文名:
Prestained Protein Marker(43-200kD)
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
预染蛋白Marker(43~200kD) 是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多预染蛋白Marker(43~200kD)等蛋白质研究产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:预染蛋白Marker(43~200kD) 蛋白质研究
编号:BTN70704B
英文名:Prestained Protein Marker(43-200kD)
规格:10次
品牌:百奥莱博
本产品为蛋白质电泳标准系列,是预染成蓝色的数个标准蛋白质的混合物,在SDS-PAGE时和转膜后可以作为分子量标准,粗略估计其他蛋白质的分子量大小。
产品特点:
1.提供干粉型或溶液型,即开即用,非常方便。
2.预染色,在电泳过程中可以观察蛋白质的泳动,也可以监测转膜效果。
3.可用于SDS-PAGE和Western Blot等实验。
4.本系列两种产品涵盖从14.4kD-200kD的分子量范围,单次上样,每个条带的浓度约为0.2μg/μL。
产品组成:
| 成分 | A型 | B型 |
| 预染蛋白标准(低分子量) | 20T | - |
| 预染蛋白标准(高分子量) | - | 10T |
| 1×SDS-PAGE上样液 | 0.5ml | 0.5ml |
| 说明书 | 1份 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、干粉型的使用
1.开封后将1×SDS-PAGE上样液加入到样品管中溶解蛋白质粉末,各分子量标准所需的1×SDS-PAGE上样液的体积如下:
低分子量标准(BTN70704A)需要200μL。
中分子量标准(BTN70704B)需要100μL。
2.低分子量标准(BTN70704A)沸水浴中加热5分钟,短暂离心后将溶液按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
中分子量标准(BTN70704B)待完全溶解后,直接按每管10μL的体积分装到多个塑料离心管中,置-20℃长期保存。
3.使用时每次取一管,低分子量标准(BTN70704A)室温放置直到液体融化后即可上样进行SDS-PAGE电泳。中分子量标准(BTN70704B)需要在使用前65℃保温5分钟,然后上样进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
4.电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后出现的带型见上表。
二、溶液型的使用
1.将溶液按每管一次电泳的用量分装到塑料离心管中冻存,每次只用一管,这样避免反复冻融。
2.使用时取一管室温放置直到液体融化。
3.沸水浴中加热3~5分钟后趁热上样并进行SDS-PAGE电泳。BTN70704A型推荐使用12%的分离胶、BTN70704B推荐使用8%的分离胶。
电泳后进行考马斯亮蓝G-250染色,染色后SDS-PAGE胶上将可见6条蛋白带(对BTN70704A)或6条蛋白带(对BTN70704B),但由于共价结合了染料分子,各预染蛋白的分子量均稍大于染色前的蛋白,所以如果不需要精确估算未知蛋白的分子量,一般以染色前的各蛋白质的分子量作为参考。如果需要精确估算未知蛋白的分子量,则必须使用非预染蛋白电泳标准系列产品(BTN70102),以避免误差。
本系列产品所含成分及分子量分布
| 分子量范围 | 低分子量 | 高分子量 | |
| 肌球蛋白重链 | 200kD | 有 | |
| *调素结合蛋白 | 130kD | 有 | |
| 兔磷酸化酶B | 97.4kD | 有 | 有 |
| 牛血清白蛋白 | 66.2kD | 有 | 有 |
| 兔肌动蛋白 | 43kD | 有 | 有 |
| 牛碳酸酐酶 | 31kD | 有 | |
| 人生长激素 | 22kD | 有 | |
| 大豆胰蛋白酶抑制剂A | 20.1kD | ||
| 鸡蛋清溶菌酶 | 14.4kD | 有 | |
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文献和实验蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
或重组的纯化蛋白混合物组成。在凝胶或膜上显示其位置需要染色步骤。预染标准允许在电泳过程中监测蛋白分离,也可以在随后的印迹步骤中指示转移效率。然而,它们比较昂贵且加入染料会影响蛋白迁移率。预染标准在确定分子量时可能 不够精确,并且蛋白质上附加的染料在转移时会影响它们吸附到膜上的能力。 聚丙烯酰胺浓度 凝胶中聚丙烯酰胺浓度可以是均一浓度或是梯度浓度。最常见的聚丙烯酰胺浓度为10%,最适合分离10-150KD范围内的蛋白质。若要分析未知蛋白或许要更宽的分离范围,推荐使用梯度
-dry 转膜时间:about 2h is ok if the protein is small and the voltage can keep 100 V, if not increase to 3-4 h。 转膜设备: Bio-Rad 蛋白来源:肺脏、肝脏等。 蛋白名称(可保密):actin 蛋白分子量:43 kD WB用膜类型、孔径:NC膜PALL 0.22 um 转膜方式(恒压、恒流):湿转 恒流 200 mA 转膜
国产 10次 300 蛋白质研究 中分子量蛋白标准(14-97KD) 国产 200ug 60 预染低范围蛋白质分子量标准 自产 20次 280 低分子量蛋白标准(6.5-66KD ) Sigma M3913 20 280 高分子量蛋白标准(36-205KD) Sigma M3788 20 280 宽范围分子量蛋白标准(6.5-205KD) Sigma M4038 20 280 ECL超敏发光液(western blot)
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