动物细胞核蛋白微量制备试剂盒价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")动物细胞核蛋白微量制备试剂盒价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：动物细胞核蛋白微量制备试剂盒价格
英文名：Animal Nuclear Protein Miniprep Kit
规格：25次
产地：国产|进口
DNA只存在于细胞核内，因此参与转录调节和DNA复制的蛋白质主要存在于细胞核中，要研究蛋白质与DNA的相互作用，首先需要制备能够与DNA作用的天然细胞核蛋白质。目前、细胞核蛋白质制备方法一般都比较繁琐，一次处理大量样品时尤其不便，为此本公司开发了本产品，用于从哺乳动物组织和培养细胞核蛋白的微量提取。

产品特点：
1. 提取制备过程简便，只需要一小时。
2. 实验重复性好，尤其适合同时处理多个样品。
3.可用于培养的动物细胞，也可以用于新鲜组织细胞。
4. 制备的核蛋白能保持天然活性，可以直接用于转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、DNA 足迹图实验和甲基化干扰实验酶活性测定等研究。

成分	规格
溶液A	10ml
溶液B	2.5ml
说明书	1份

储存条件：低温运输、4℃保存，有效期一年。

使用方法：
实验前准备：取适当量的溶液A和溶液B置于冰上，在使用前数分钟内分别向溶液A和溶液B中加入自备的PMSF和DTT，使PMSF的最终浓度为0.2mM，DTT的最终浓度为1mM。实验中所用试剂均需先预冷。

一、对培养细胞和悬浮细胞：
1. 对培养细胞：将覆盖率为55-65%的培养细胞用自备的胰酶溶液(BTN90306)按标准的胰酶法处理，然后刮到1.5mL塑料离心管中，4℃ 800g离心30秒，小心弃上清。
2. 对悬浮细胞：直接将5×105-7个的悬浮细胞转移到1.5mL塑料离心管中，4℃800g离心30秒，小心弃上清。
3. 用1.5mL自备的预冷的PBS缓冲液洗涤细胞沉淀一次，然后4℃离心后弃上清。
4.在细胞沉淀中加入400μL预加了PMSF和DTT的溶液A，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来。
5. 冰浴10分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。
6. 4℃ 2500g离心10秒，小心弃上清。
7.在沉淀中加入100μL预加了PMSF和DTT的溶液B，轻轻混匀使沉淀悬浮起来。
8. 冰浴 20分钟。
9. 4℃ 12000-16000g离心10分钟，小心收集上清液(细胞核提取物)，可立即用于后续的凝胶滞后实验、BCA法蛋白浓度测定或活性检测等实验，也可以分装后放-70℃长期保存。
 说明：本方法可以从1×10⁶的细胞中得到50-70ug的核蛋白质。

二、对新鲜组织：
10. 将100-150mg 新鲜组织置于培养皿中，用手术剪将组织尽可能切成非常细小的碎片，尽量去除脂肪组织和结缔组织等非目的组织，用自备的预冷的PBS洗涤2次，离心后去上清。在组织沉淀中加入400μl预加了PMSF和DTT的溶液A，冰浴或4ºC下在Dounce或Potter 玻璃匀浆器(BTN101103 ，可向本公司订购)内充分匀浆，一般上下手动匀浆30-50次(匀浆后应镜检，细胞破碎率不小于90%，同时没有明显的组织小块)。
11. 匀浆后把匀浆液转移到塑料离心管内，用手指弹管壁使沉淀悬浮起来，冰浴放置10-20分钟，涡旋激烈震荡10秒混匀。
12. 接下来按照步骤6-9操作，即得到新鲜组织细胞核蛋白提取物。

注意事项：
1. 所有接触样品的用具和试剂均需预冷，以免蛋白质的降解及失活。
2. PMSF一定要在抽提试剂加入到样品中前2-3分钟内加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
3. 本试剂盒只适用于新鲜的组织样品，对冻存过的组织抽提效果不是很理想。

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·Southern DNA Marker Oligo(生物素标记)
编号：BTN120654E
英文名称：Southern DNA Marker Oligo(Labeled by Biotin)
规格：20次

·细胞松弛素B溶液
编号：BTN120686
英文名称：Cytochalasin B Solution
规格：0.1mL
本产品为浓度为20mg/ml细胞松弛素B乙醇溶液。细胞松弛素(松胞菌素B；松孢素B；细胞分裂抑素B；Phomin)，分子式：C29H37NO5，分子量：479.61，CAS号：14930-96-2 。溶于乙醇，可溶于DMSO细胞松弛素B是从真菌类中分离得到的代谢产物。是以希腊语的cytos(细胞)和chalasis(松弛)组合而命名的。

结构式：


储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

·PreScissiom蛋白酶
编号：BTN130876
英文名称：PreScissiom Protease
规格：100U
PreScission蛋白酶是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶和谷胱甘肽S-转移酶(GST)组成的融合蛋白。这种蛋白酶特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割，底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还依赖于融合蛋白的二级和三级结构。它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：在5℃条件下反应16小时，能够切割100μg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。

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