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Oligo dT12-18 Primer
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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低温运输和-20℃保存
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北京现货Oligo dT12-18引物(0.5μg/μL)销*(代"售")由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Oligo dT12-18引物(0.5μg/μL)等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:北京现货Oligo dT12-18引物(0.5μg/μL)销*(代"售")
规格:5μg
英文名:Oligo dT12-18 Primer
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
编号:BTN100814
Oligo(dT)12-18为长度在12到18之间的Oligo(dT)混合物,可以用于以带polyA尾巴的RNA为模板的第一链cDNA合成。建议每20μL反应体系使用0.5μg oligo(dT)。
储存条件:低温运输和-20℃保存,有效期一年。
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文献和实验。1.4.2 荧光标记差异显示PCR 选取与逆转录引物序列相同的带荧光物 质标记的锚定引物[TMR-T7(dT12)AP],随机引物(5'ACAATTTCACACAGGAACGCTAGTTG 3'),以逆转录产物为模板,进行PCR反应。反应体系包括:20 mmol/L Tris-HCl(pH8.4),50 mmol/L KCl,3.75 mmol/L MgCl2,逆转录产物3.0 μl,50 μ mol/L dNTP mi x(1∶1∶1),0.35 μmol/L 5'-随机引物,0.35 μmol/L
聚合酶等 操作方法 1. 以标准方法从细胞株中分离总RNA;以适当的转录系统合成AW108cRNA,cRNA产物经oligo(dT)柱纯化,测其260nmOD值,并计算含量; 2. 用10μl逆转录反应系统,加入1μg细胞总RNA,1.77×102 ~1.77×107 个分子的AW108 RNA,1×PCR缓冲液,1mmol/L DTT,0.5mmol/L 4种dNTP,10U RNA酶抑制剂,0.1μg 0ligo(dT)引物,1μl MMLV逆转录酶。于37℃保温60
,cDNA的数量和复杂度要少得多。因为其较高的特异性,oligo(dT)一般不需要对RNA和引物的比例及poly(A)+选择进行优化。建议每20μl反应体系使用0.5μg oligo(dT)。oligo(dT)12-18适用于多数RT-PCR。 基因特异性引物(GSP)对于逆转录步骤是特异性最好的引物。GSP是反义寡聚核苷,可以特异性地同RNA目的序列杂交,而不象随机引物或oligo(dT)那样同所有RNA退火。用于设计PCR引物的规则同样适用于逆转录反应GSP的设计。GSP
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