RNA洗脱液库存

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")RNA洗脱液库存，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：RNA洗脱液库存
产地：国产|进口
英文名：RNA Elution Buffer
品牌：百奥莱博
规格：10mL
本产品是专门从硅胶膜离心吸附柱上高效洗脱结合的RNA。本产品与各种硅胶膜兼容，洗涤普通离心吸附柱一次需要本产品20-100μl。

储存条件：常温运输及保存、有效期一年。

RNA洗脱液库存极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：

·HRP标记内参抗体(β-actin)
编号：BTN130592
英文名称：HRP Conjugated Loading Control Antibody(β-actin)
规格：20μL
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体，β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594)，该系列抗体无需二抗孵育，可缩短实验周期，节约实验成本，大幅降低背景信息强度。

抗体类型：小鼠IgG1
应 用：Western blotting
建议浓度：1:1000～10000
交叉反应性：人，大鼠，小鼠

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

·石蜡油，PCR级
编号：BTN130841
英文名称：Paraffin，PCR Grade
规格：10mL
本产品是PCR级石蜡油试剂，专门用于PCR扩增、WGA扩增等实验时添加到反应体系中，封闭反应成分，防止溶液的挥发。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

·10%Sarkosyl溶液(DNA级)
编号：BTN100914
英文名称：Paraffin，PCR Grade
规格：250mL
本产品是PCR级石蜡油试剂，专门用于PCR扩增、WGA扩增等实验时添加到反应体系中，封闭反应成分，防止溶液的挥发。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

·大肠杆菌TOP10化学感受态细胞
编号：BTN80806
英文名称：E.coli TOP10 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌TOP10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。该菌株是一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α 互补，可用于蓝白斑筛选。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108。本感受态细胞具有链霉素抗性。

菌株的基因型：F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15ΔlacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(Strr)endA1 nupG。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。


RNA洗脱液库存关键词：RNA洗脱液,BTN71207,RNA Elution Buffer

PY02-423  Columbia-MUG琼脂培养基  100克  
戊二醛固定液(2.5%,电镜专用)   100ml|500ml
BTN110801 核酸浓缩剂 Nucleic Acid Concentration Solution
ARB12804 小鼠β葡糖苷酶(β-glucosIdAse)elisa检测操作说明书 Mouse β-glucosidase ELISA KIT
3,4,5-三甲氧基肉桂酸 SYBR Green 1 90-50-6
柠檬酸—柠檬酸*缓冲液(10mmol/L,pH6.0)   500ml
ARB12118 大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)Elisa定量检测 Rat soluble vascuolar cell adhesion molecule 1,svcam-1 ELISA KIT
ARB10562 人丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)含量测试 Human mitogen activated protein kinase kinase 6,mkk6 ELISA KIT
ARB11364 人前心*肽(Pro-ANP)elisa检测说明书 Human pro atrial natriuretic Peptide,pro-anp ELISA KIT
氧化型谷胱甘肽(GSSG)检测试剂盒(DTNB速率微板法)   100T
侧金盏花醇 Fmoc-Cys(Acm)-OH 488-81-3
ARB12480 大鼠前列腺特异性抗原(PSA)Elisa方法检测 Rat prostate specific antigen,psa ELISA KIT
三*基氧化膦 Polyacrylic resin Ⅳ 791-28-6
F030225 HRP标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*HRP
PBS-Triton去污剂   100ml
芴甲氧羰酰琥珀酰亚胺 Pronase E 82911-69-1
ARB13400 羊住肉孢子虫(SArcocystIs)elisa检测 
羟基乙酸* D-Glucose anhydrous 2836-32-0
F030439 胶体金标记山羊抗人IgG Fab抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG Fab*GOLD
RNA洗脱液库存关键词：RNA洗脱液,BTN71207,RNA Elution Buffer


·一站式TA克隆试剂盒
编号：BTN90801A
英文名称：One-Stop TA Cloning Kit(A)
规格：20次
TA克隆就是利用T载体两个3´端各带有一个T突出，而PCR扩增产物两个3´端各带有一个A突出的特点，在DNA连接酶的作用下，将PCR产物克隆到T载体中的过程，它是克隆PCR扩增产物的主要手段。

产品特点：
1.一站式，用户只需要准备PCR产物即可进行TA克隆。
2. T载体由Xcm I酶切方法制备，两个5´端100%含T突出，自连率几乎为零。
3. 克隆效率高，一次TA克隆实验一般能得到上百个重组子。
4. 阳性率高，一般能到90%以上，大大缩短了筛选工作。
5. 提供供两次实验用的对照插入片段，方便分析实验数据。
6. 插入位点两侧有对称的常见酶切位点(如EcoR I)，便于对克隆的PCR片段进行近一步的分析。
7. 克隆位点两侧分别有T3和T7 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
8.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
9. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α-肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
10.含有丝状噬菌体f1 复制起始子，可以制备单链DNA。

成分	规格
即用型蓝白T载体(50ng/μL)	20μl
对照插入片段(50ng/μL)	5μl
T4快速连接缓冲液，2×	100μl
T4 DNA连接酶(5U/μL)	30μl
超纯水	1ml
高效感受态细胞	100μL×10只(只B型有)
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。感受态细胞需要干冰运输，-70℃保存，有效期6个月。

自备试剂：插入片段。

使用方法：

一：PCR产物的纯化和定量注意事项
1. 由于PCR体系中有大量会抑制DNA连接反应的dATP、还有一些可能在电泳胶上不一定会显示出来的非特异性扩增产物和引物二聚体，所以PCR产物必须用胶回收方法制备才能用于本试剂盒的连接。可以分别使用本公司柱式DNArc(BTN60202)和PAGE DNArc(包括柱式PAGE DNArc)从琼脂糖胶和PAGE胶上纯化回收PCR片段。具体操作见相关产品使用手册。
2. 琼脂糖胶回收的电泳缓冲液最好不要使用TBE缓冲液，因为它会影响DNA的胶回收效率。
3. 为避免UV对DNA的伤害，切胶最好在日光下进行(使用百奥莱博的绿如蓝染料的话，可以直接在黑色背景下看见DNA条带，不需要紫外光)。如果使用EB或其他染料，必须在紫外下切胶时，最好选择长波(360nm)紫外灯并以最快速度切胶，文献报道短波UV(300nm和240nm)会使DNA连接效率降低400多倍。使用短波UV时，可以使用百奥莱博的DNA防护剂UV Scavenger(BTN60601)减少伤害。
4. PCR片段的体积越小越便于后续操作。洗脱PCR片段时，用最少量的洗脱液洗脱。
 本试剂盒要求PCR回收片段的浓度最好为50ng/μL。如果浓度不够，最好用醇沉淀法沉淀后直接在管内设置连接反应，也可以使用本公司的核酸浓缩剂(BTN110801)直接浓缩。
5. 为准确定量回收的PCR产物同时又节约样品，最好使用微量分光光度计(只需用1μL样品测量)。如果分光光度计需要大量样品，建议使用电泳法定量：将回收的PCR片段与浓度已知的DNA Marker在含EB或绿如蓝染料的琼脂糖凝胶中电泳，通过比较DNA条带的相对荧光强度而估测PCR产物的浓度。

二：连接反应
1. 短暂离心装有蓝白T载体、连接缓冲液和T4连接酶的离心管。
2.在三个离心管中加入下列成分(注意，对照可以不做，在出现问题时再做)：

成份	样品管	阳性对照管	自连对照管
T4快速连接缓冲液，2×	5μl	5μl	5μl
蓝白T载体(50 ng/μL)(=0.03 pmol/μL)	1μl	1μl	1μl
自备PCR 纯化产物(0.03-0.1 pmol/μL)	Xμl(见注)	不加	不加
对照插入片段(50ng/μL)(=0.06 pmol/μL)	不加	1.5μl	不加
T4 DNA连接酶(5U/μL)	1-1.5μL	1-1.5μL	1-1.5μL
超纯水	补到10μL	补到10μL	补到10μL

注: 如何根据T载体的用量计算PCR纯化片段的最佳用量？
第一：确定插入片段与载体的最佳摩尔比，在本产品的T载体的长度固定(3Kb)时，最佳摩尔比跟插入片段的长度关系如下：

插入片段长度	与载体的摩尔比
1Kb以下	2:1或3:1
跟T载体接近(±1Kb)	1:1
比T载体长1Kb或更多	1:2或1:3

第二：根据选定的最佳摩尔比按下面方程式计算用量：

本产品提供的T载体长度为3 Kb，推荐用量为50ng，如果PCR片段长度为0.5 Kb，最佳摩尔比设定为3:1，则其用量为:

3. 用移液器吹打连接反应液使之混匀，然后放置在16℃孵育30分钟-过夜。
4. 65℃5分钟灭活连接酶后直接用于转化或-20℃保存。

三：细菌转化及筛选(仅供参考，本产品不提供相关试剂)
1. 将100μl转化效率在1×108 cfu/μg以上的感受态细胞于冰上解冻。
2. 取5-10μl连接产物加入到感受态细胞中，轻轻旋转几次以混匀内容物。
3.在冰上放置30分钟。
4. 将离心管放42℃热休克90秒，然后快速将其转移到冰浴中放置1～2分钟。
5. 每管中加900μl LB培养基，37℃振荡培养1小时复苏细胞。
6. 将100μL复苏涂布到含Amp的LB琼脂平板上(也可加上X-gal和IPTG)。
7.室温4,000rpm离心剩余的900μl复苏细胞5分钟，弃去800μl上清，用剩余100μL培养基重悬细胞并涂布到含Amp的LB琼脂平板上(可加X-gal、IPTG)。
8. 将平板置于室温直至液体被吸收。此步非常重要，否则培养板将在37℃排除水分，细菌将随水在培养基上到处游动，不能形成单个菌落。
9. 倒置平皿，于37℃培养，12～16小时后可出现菌落。一般情况下阳性对照组总共会有上千个菌落(100μl转化液产生的菌落数×10)，自联对照只有少数几个菌落，样品组的菌落数取决于PCR回收片段的质量。
10. 按常规方法筛选重组子。

MCS位点：

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