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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
242
- 英文名:
Cell Counting Kit-8
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输和4 ℃干燥避光保存
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖
产地:国产|进口
英文名:Cell Counting Kit-8
品牌:百奥莱博
编号:BTN121205
本CCK-8试剂盒是基于WTS-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品,主要成分为水溶性四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐,WST-8为一种MTT类似物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜(formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。
产品特点:
1.溶液稳定,对细胞无毒性,可直接同步加入到细胞样品中长时间孵育,可以多次测定选取最佳测定时间。
2.灵敏度高,实验的灵敏度比其它如MTT,XTT或MTS高,操作简便、快捷,实验结果重复性好。
3.水溶性,免去后续的溶解步骤。
4.不需要换液,尤其适合于悬浮细胞。
5.安全无毒,不会对操作人员身体造成危害。
6.可以广泛应用于生物活性因子的活性检测、药物的筛选、细胞增殖检测、细胞毒性。
储存条件:常温运输和4 ℃干燥避光保存,有效期一年。
使用方法:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时测定细胞具体数量时)
1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2.按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3.接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加 CCK 试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间)。
二、细胞活性检测
1.在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板在培养箱中预培养24小时(37℃,5% CO2)。
2.每孔加入10μL的CCK溶液。
3.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者 1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增殖-毒性检测
1.在96孔板中配置 100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。
2.向培养板中加入10μL不同浓度的待测物质。
3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
4.向每孔加入10μL CCK溶液。
5.将培养板在培养箱内孵育 1-4小时。
6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
7.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
注意事项:
1.如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。如果药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
2.用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
3.建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
4.有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰OD 值读数。
5.白细胞可能需要培养较长时间。
6.当使用标准 96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
7.如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。
8.培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
结果分析:
细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
*细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
除CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:
·长效期SDS-PAGE配胶液
编号:BTN100909
英文名称:Stable SDS-PAGE Gel Buffer
规格:200mL
本产品专门用于配制长效SDS-PAGE胶,本配胶液pH值偏酸性,使PAGE胶比常规SDS-PAGE更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
·ONPG干粉
编号:BTN131108
英文名称:o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside
规格:1g
ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物,在420nm 有最大吸收,且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下:

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·T7 DNA聚合酶(未修饰)
编号:BTN130618
英文名称:T7 DNA Polymerase(Unmodified)
规格:300U
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性,DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成,T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。
产品特点:
1.缺口填充(无链置换活性)。
2.定点突变中第二链的合成。
3.具有快速延伸的特性,故无需长时间温育。
4.T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 DNA聚合酶(10U/μL) | 30μl |
| 10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液 | 1.5ml |
| BSA溶液(10mg/mL) | 0.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:对于不同的实验,各成分用量及反应时间可能不同,请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液,加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs,37℃温育。
热失活:75℃下反应20分钟。
单位定义(粘性末端活性单位):1 单位指在37℃条件下反应30分钟,能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。
贮存液成分:50mM KPO4,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%甘油,pH7.0@25℃。
CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖关键词:BTN121205,CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒,Cell Counting Kit-8
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