CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖

CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖

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  • ¥200 - 2120
  • 百奥莱博
  • BTN121205-KWT
  • 北京
  • 2025年07月15日
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      242

    • 英文名

      Cell Counting Kit-8

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      常温运输和4 ℃干燥避光保存

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产供应CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。


    名称:CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖
    产地:国产|进口
    英文名:Cell Counting Kit-8
    品牌:百奥莱博
    编号:BTN121205
    本CCK-8试剂盒是基于WTS-8的第二代细胞增殖及毒性检测产品,主要成分为水溶性四唑盐WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐,WST-8为一种MTT类似物,在电子耦合试剂1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成橙黄色水溶性的甲臜(formazan)。生成的甲臜量与活细胞数量成线性相关。

    产品特点:
    1.溶液稳定,对细胞无毒性,可直接同步加入到细胞样品中长时间孵育,可以多次测定选取最佳测定时间。
    2.灵敏度高,实验的灵敏度比其它如MTT,XTT或MTS高,操作简便、快捷,实验结果重复性好。
    3.水溶性,免去后续的溶解步骤。
    4.不需要换液,尤其适合于悬浮细胞。
    5.安全无毒,不会对操作人员身体造成危害。
    6.可以广泛应用于生物活性因子的活性检测、药物的筛选、细胞增殖检测、细胞毒性。

    储存条件:常温运输和4 ℃干燥避光保存,有效期一年。

    使用方法:

    一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时测定细胞具体数量时)
    1.先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
    2.按比例(例如:1/2比例)依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
    3.接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加 CCK 试剂培养一定时间后测定OD值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X轴),OD值为纵坐标(Y轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(使用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK后的培养时间)。

    二、细胞活性检测
    1.在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板在培养箱中预培养24小时(37℃,5% CO2)。
    2.每孔加入10μL的CCK溶液。
    3.将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
    4.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
    5.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者 1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

    三、细胞增殖-毒性检测
    1.在96孔板中配置 100μL的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(37℃,5%CO2)。
    2.向培养板中加入10μL不同浓度的待测物质。
    3.将培养板在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
    4.向每孔加入10μL CCK溶液。
    5.将培养板在培养箱内孵育 1-4小时。
    6.用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
    7.如果暂时不测定OD值,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl溶液或者1%w/v SDS溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

    注意事项:
    1.如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。如果药物影响比较小的情况下,可以不更换培养基,直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。
    2.用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡,否则会干扰测定。
    3.建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK试剂后的培养时间。
    4.有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加入CCK试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰OD 值读数。
    5.白细胞可能需要培养较长时间。
    6.当使用标准 96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK溶液。
    7.如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片,但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。
    8.培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。

    结果分析:
    细胞活力*(%)=[A(加药)-A(空白)]/[A(0加药)-A(空白)]×100
    A(加药):具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度
    A(空白):具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度
    A(0加药):具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
    *细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力

    CCK-8细胞增殖及毒性检测试剂盒哪里卖外,我公司正在打折促销以下产品:

    ·长效期SDS-PAGE配胶液
    编号:BTN100909
    英文名称:Stable SDS-PAGE Gel Buffer
    规格:200mL
    本产品专门用于配制长效SDS-PAGE胶,本配胶液pH值偏酸性,使PAGE胶比常规SDS-PAGE更加稳定,便于配预制胶,增加实验的可重复性。

    储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。

    ·ONPG干粉
    编号:BTN131108
    英文名称:o-nitrophenyl-β-Dgalactopyranoside
    规格:1g
    ONPG是在包含β-半乳糖苷酶(β-Gal)报告酶的ELISA 应用中最经常使用的化学显色底物。该酶-底物反应生成黄色产物,在420nm 有最大吸收,且405nm处强度也很高(与常用的酶标仪滤镜设置匹配)。其反应原理如下:
    β-半乳糖苷酶,ONPG反应原理图

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·T7 DNA聚合酶(未修饰)
    编号:BTN130618
    英文名称:T7 DNA Polymerase(Unmodified)
    规格:300U
    T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性,DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成,T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。

    产品特点:
    1.缺口填充(无链置换活性)。
    2.定点突变中第二链的合成。
    3.具有快速延伸的特性,故无需长时间温育。
    4.T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。

    产品组成:

     
    成分 规格
    T7 DNA聚合酶(10U/μL) 30μl
    10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液 1.5ml
    BSA溶液(10mg/mL) 0.25ml
    说明书 1份


    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:对于不同的实验,各成分用量及反应时间可能不同,请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液,加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs,37℃温育。

    热失活:75℃下反应20分钟。

    单位定义(粘性末端活性单位):1 单位指在37℃条件下反应30分钟,能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。

    贮存液成分:50mM KPO4,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%甘油,pH7.0@25℃。


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