一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒现货价格

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百奥莱博专业生产供应一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒现货价格，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒现货价格
产地：国产|进口
英文名：One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是在一步式质粒DNA提取试剂盒2.0(BTN70903)和液相内毒素清除剂(BTN60607)两产品的基础上开发出来的无内毒素质粒DNA提取试剂。用本产品提取的质粒DNA，内毒素的污染浓度低，适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

试剂盒特点：
1.在提取质粒前去除内毒素(存在于细菌表面)，从源头上避免料内毒素和质粒DNA 接触，从根本上防止了内毒素对质粒DNA的污染。
2. 独创的一步法质粒DNA提取技术，操作快捷，只需要5-10分钟。
3.质粒回收率高，一次处理后90%的质粒DNA可以回收回来。
4. 得到的质粒DNA可以直接用于转染等实验。

试剂盒组成：

 

成分	规格
菌体内毒素清除剂	200ml
溶液A	50ml
吸附柱活化液	25ml
离心吸附柱(小提)	50只
离心吸附柱(小提)套管	50只
通用预洗液	50ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液A最好4℃保存)，有效期一年。

使用方法：

一:菌体内毒素的清除
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2.在沉淀中加入1mL菌体内毒素清除剂，温和混匀后10000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3次，得到的菌体沉淀可以直接进入下面的一步法质粒DNA提取操作。

二：一步法质粒DNA提取
4.在菌体沉淀中加入0.6mL溶液A(用前需摇匀)，充分吹打或振荡30秒裂解细菌，直到裂解液变澄清(一般需要半分钟左右)。注:此方法丌同于碱裂解法，故可以充分吹打或振荡。
5.活化离心吸附柱：在离心吸附柱中加入0.5mL 吸附柱活化液，套上收集管后室温放置2分钟，然后12000rpm离心2分钟，倒弃穿透液，再将吸附柱套上收集管后待用。活化后的离心吸附柱必须立即使用。如果丌活化，质粒得率将低20-40%左右。
6. 将第4 步得到的裂解液全部转移到离心吸附柱中，室温静置2分钟使质粒DNA 不膜结合。注意：必须静止2分钟，否则质粒DNA 丌容易吸附上。
7.室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
8.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用预洗液(注意:是通用预洗液，丌是通用洗柱液，丌要用错。通用预洗液非常容易产生沉淀，用前需要加热到60℃左右使之融化，混匀后再用)，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
9.在离心吸附柱中加入0.6mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
10.在离心吸附柱中加入0.4mL的通用洗柱液，室温12000～15000g离心半分钟，弃穿透液。
11.室温12000～15000g离心半分钟，甩干残留液体。
12. 将离心柱置于一个新的1.5mL自备塑料离心管中，加入30-100μL DNA洗脱液2.0，室温放置2分钟。
13. 12000～15000g离心半分钟，离心管底溶液即无内毒素质粒DNA。

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·柱式细菌RNA提取试剂盒
编号：BTN80103
英文名称：Bacterial RNA Column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是细菌RNA提取试剂盒(BTN51102)的柱式升级产品，用于快速从各种常见的革氏阴性细菌中提取总RNA。如需提取革氏阳性细菌的RNA，可以选择柱式真菌RNA提取试剂盒。跟细菌RNA提取试剂盒相比 它具有下列特点:
1. 操作更加简单快速，省去了最费时的离心步骤。
2. 所得 RNA 纯度更高，OD260/OD280一般在 2.0左右.
3.一般不含基因 DNA污染。
4.适用于各种革氏阴性细菌。
5. 性价比高于进口同类产品。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	20ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
下面的操作步骤是针对在 1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的。

1. 新鲜配制裂解液。将溶液A和溶液B 按 1:1的比例混合。注意：溶液A和溶液B 混合后必须立即使用，不要放置，否则会产生沉淀。一次处理1.5mL左右的细菌需要0.6mL新鲜配制的裂解液(即0.3mL溶液A和0.3mL溶液B的混合液)。
2.在 1.5mL塑料离心管中离心收集0.2-1.5mL 新鲜细菌。注意:由于细菌RNA 半衰期十分短，所以，必须使用最新鲜的、处于对数生长期的细菌。
3. 吸尽液体培养基，加入0.6mL 新配制的裂解液，用枪充分吹打细菌沉淀，确保细菌全部裂解，没有块状物。
4. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中，然后加入0.2倍体积的自备*仿(1mL 裂解物需 0.2mL *仿)，振荡器上充分振荡混均 30秒。
5. 12000～15000g室温离心 3～5分钟。
6. 将上清液(约0.6-0.8mL)转移到离心吸附柱中。注意：离心后下层有 机相和中间层含有 DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下 100μL上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状 DNA。
7. 12000～15000g室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。
8. 加 0.7mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心半分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高，可以再用0.3mL通用洗柱液重复此步一次。
9.室温 12000～15000g离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入50-100μL RNA 洗脱液。
11.室温离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern杂交，强烈建议用户使 用甲醛变性胶进行 RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
13. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之 间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
14. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之 间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分 别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象，百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基 互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物，加 RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议 最好使用甲醛变性胶电泳和RNA 专用上样液(如我们的RNAload)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组 DNA？
A：如果怀疑有 DNA污染，可以用 RNase处理 RNA样品，然后再电泳。如 果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组 DNA污染。进一步确认可以使用 PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA 去除剂 DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一 般都有残留 RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。


一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒现货价格关键词：一步法无内毒素质粒DNA提取试剂盒,BTN80201,One-step Endotoxin-free plasmid DNA extraction kit


·人基因组DNA(男性)
编号：BTN131031
英文名称：Human Genomic DNA(Male)
规格：100μg
本产品为人基因组DNA，来源于多位匿名的捐献者，其中BTN131031为男性基因组DNA；BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量，90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。

储存条件：低温运输、4℃保存、有效期一年。

·填入法DNA末端标记试剂盒(地高*(代"辛")标记dUTP)
编号：BTN120653C
英文名称：Fill-in DNA End Labeling Kit
规格：5次
本试剂盒是基于Klenow DNA聚合酶填平DNA片段能力的填入法标记试剂盒，该反应的示意图如下：


产品特点：
1.快速，15分钟即可完成标记反应。
2.可用于标记5´突出的双链DNA。
3.可用同位素底物和非同位素底物(生物素和地高*(代"辛")标记的核苷酸等)。
4. 标记的探针可用于电泳迁移率实验(EMSA)、原位杂交(ISH)、Northern Blot(不推荐用于低丰度RNA检测)、小RNA Northern、Southern Blot(不推荐用于单拷贝基因检测)、菌落杂交、斑点印迹杂交分析等。

试剂盒组成：

组份	BTN120653A	BTN120653B	BTN120653C
填入法标记缓冲液，5×	50μl	50μl	50μl
Klenow DN聚合酶(1U/μL)	5μl	5μl	5μl
dNTP(2mM)	25μl	-	-
含Biotin-dUTP的dNTP	-	25μl	-
含DIG-dUTP的dNTP	-	-	25μl
超纯水	1ml	1ml	1ml
说明书	一份	一份	一份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

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