λ噬菌体DNA提取试剂盒

特别提示：包括λ噬菌体DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：λ噬菌体DNA提取试剂盒
英文名称：Lambda phage genomic DNA Extraction Kit
产品货号：ALH164
产品规格：50次|100次

本试剂盒适用于快速λ噬菌体DNA提取，将λ噬菌体裂解培养物离心后的上清，首先用RNase A /DNase I混合酶消化去除残留的宿主菌DNA/RNA，沉淀收集噬菌体，噬菌体被SDS裂解，残留碎片通过沉淀离心去除掉。裂解物上清中的λ噬菌体DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将λ噬菌体DNA从硅基质膜上洗脱。λ噬菌体载体广泛用于文库筛选，目的克隆培养获得大量的噬菌体颗粒需要提取λ噬菌体DNA来开展测序等后续工作。

试剂盒组份(50次)：
RNase A ————————20mg
DNase I ————————50mg
噬菌体沉淀液——————100ml
裂解缓冲液———————30ml
杂质沉淀液———————5ml
结合液LB————————20ml
漂洗液WB————————15ml
洗脱缓冲液EB——————10ml
吸附柱AC————————50个
收集管(2ml) ——————50个

产品特点：
1.不需要使用有毒的*酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间，简捷，可用于液体培养裂解物和固体培养板的提取，单个样品操作一般可在1.5小时内完成。
3.产量高，典型的产量10ml λ噬菌体裂解培养物上清可以提取约10µg λ噬菌体DNA。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9。可以直接用来酶切和测序。

注意事项：
1. 使用转速可以达到13000rpm的冷冻离心机。
2. 开始实验前将需要的水浴先预热到37℃备用。
3. 需要自备*仿，20％SDS。
4. 结合液LB 含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。

储存条件：室温，有效期12个月。

本制品别名：λ噬菌体DNA提取试剂盒|λ单链DNA提取试剂盒|λ基因组提取试剂盒

除了λ噬菌体DNA提取试剂盒,λ噬菌体DNA提取试剂盒|λ单链DNA提取试剂盒|λ基因组提取试剂盒，我公司还供应以下相关产品：



名称：白细胞裂解液
货号：BTN130989
规格：250mL
本品为即用型白细胞裂解溶液，可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞，用于DNA提取、RNA提取等后续实验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：(以DNA提取为例)
1. 取新鲜抗凝血5mL，在10mL或15mL的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方，用户需要根据所选产品的使用手册进行操作，这里不列出每种的详细步骤)，也可以直接2500rpm离心5分钟后取白细胞层到一新的10mL或15mL的塑料离心管中。
2.在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为2mL。
3. 加1mL的本产品，混匀后55℃ 保温3小时，其间轻轻振摇数次。
4. 加入3mL自备的Tris饱和酚，轻轻震摇5分钟，使得水相和酚相充分分开。
5. 3500rpm离心15分钟，上层水相含DNA，中间白色层为蛋白质，下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含DNA的上清液转移到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。
7. 再用Tris饱和酚重复上面的抽提步骤，直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8.在上清液中加入等体积的自备的*仿，轻轻震摇5分钟，3500rpm离心5分钟，转移上清液到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍体积的自备的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇，轻柔颠倒混匀，将出现絮状的DNA沉淀。
10. 用移液枪头将DNA沉淀挑取出来，转移到1.5mL的塑料离心管中，用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中残留的盐离子。
11.转移DNA沉淀到一个1.5mL的塑料离心管中，空气中放置10分钟左右待乙醇挥发后，加入0.5mL自备的TE缓冲液溶解DNA，4℃放置待用。

名称：柱式植物DNA提取试剂盒
货号：BTN60602
规格：50次
本试剂盒是在植物DNA提取试剂盒基础上开发的柱式植物基因组DNA提取产品，可以用于多种植物基因组DNA(含叶绿体和线粒体DNA)的快速提取。

产品特点：
1. 纯度高，不含污染和抑制剂，可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、mμLtiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting，microsatellite analysis等各种后续分子生物学实验。
2.产率一般在3-30μg/100mg样品。OD260/280一般在1.8以上。DNA片段长度一般在40-50 Kb左右。
3.适用范围广，可以使用于绝大多数植物的各种组织。
4. 不会发生离心柱堵塞现象。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	40ml
溶液B	20ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A和溶液B容易产生沉淀，溶液B比较粘稠，用前均需要放置在65℃预热使沉淀溶解、粘稠度降低，用前充分摇匀。

1. 65℃预热柱式植物DNA提取试剂盒溶液A，待其沉淀溶化后，充分混匀，取0.75mL加入到10mL塑料离心管中并放置于65℃待用。
2. 称取植物组织0.1-0.5 g左右，剪成微小的碎片，加入到有溶液A的10mL塑料离心管中并短暂匀浆。也可以液氮研磨后将粉末加入到管中(建议不要在陶器或玻璃研钵中破碎细胞，因为二氧化硅会非特异地吸附DNA，降低DNA 回收量。但可以在塑料研钵中研磨)。匀浆过程中将产生大量泡沫，属于正常现象。
3. 将匀浆液(包括植物碎片)全部转移到新的1.5mL塑料离心管(此时匀浆液较为粘稠，可将枪头剪去一截后转移上清，不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在匀浆液中加入0.5倍体积预热的溶液B到离心管中，颠倒数次混匀。此时溶液中可能有白色丝状悬浮物产生。(由于溶液B比较粘稠，可以将1mL枪头剪去一截再吸取)。
5. 65℃水浴3～5分钟。如果室温放置，DNA产量会降低10-20%。
6. 加入200μl自备*仿，震荡混匀10-30秒，此时溶液将呈乳白色。
7. 12000rpm室温离心2分钟。此时上清液将变得透明，中间层有白膜。小心转移上清液到一个新的1.5mL塑料离心管中，避免触及中间层的白膜。
8. 加入1.5倍体积的溶液C，颠倒混匀后全部转移到离心吸附柱中，室温放置至少2分钟。
9. 12000rpm室温离心1分钟，DNA 将吸附在离心吸附柱的膜上，倒弃收集管中的穿透液。
10. 将0.5mL通用洗柱液加入离心柱中，12000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
11. 重复上步操作一次。
12. 空甩半分钟去除残留液体,将离心吸附柱转移到新的1.5mL离心管中。
13. 将离心吸附柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加50-100μL DNA 洗脱液2.0，室温放置3～5分钟。
14. 12000rpm室温离心1分钟即得植物DNA溶液。
15. 由于本产品使用的离心吸附柱吸附DNA的能力较强，可以重复上步操作一次，以洗脱得到更多的DNA。
16. 直接取5-10μL电泳检测DNA，其余放冰箱备用。

使用效果：

图注：用本产品提取0.1g牵牛花叶片基因组DNA，60μL洗脱液洗脱，取15μL检测。泳道3和4为本产品提取效果，泳道1和2为某公司同类产品提取效果。本公司提取的牵牛花叶片基因组DNA 条带清晰，产量高。M为本公司Marker，染料为本公司绿如蓝核酸染料(BTN70909)。