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- 技术资料
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311
- 英文名:
Blood-Direct Taq Polymerase
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应BTN130606型全血直接扩增Taq DNA聚合酶折扣价,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:BTN130606型全血直接扩增Taq DNA聚合酶折扣价
产地:国产|进口
规格:100次
编号:BTN130606
英文名:Blood-Direct Taq Polymerase
品牌:百奥莱博
本产品是截短后的Taq DNA聚合酶,它缺失了N端的280个*基酸。本产品还有其它突变,这些突变使它能够耐受全血中存在的抑制剂。此酶能够扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先提纯。本产品在25μl的反应体系中能够耐受高达10%的全血(50μl反应体系中耐受20%)。
产品特点:
1.无需对DNA提纯;
2.聚合能力强;
3.适合诊断用PCR;
4.在大多数抗凝剂存在下依然表现良好,包括肝素,柠檬酸和EDTA;
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
欲了解更多BTN130606型全血直接扩增Taq DNA聚合酶折扣价的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:
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BTN130606型全血直接扩增Taq DNA聚合酶折扣价关键词:Blood-Direct Taq Polymerase,全血直接扩增Taq DNA聚合酶,BTN130606
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BTN130606型全血直接扩增Taq DNA聚合酶折扣价关键词:Blood-Direct Taq Polymerase,全血直接扩增Taq DNA聚合酶,BTN130606
·动物RNA提取试剂盒(柱式提取)(无需*仿)
编号:BTN160905
英文名称:Animal RNA column extraction kit(chloroform-free)
规格:50次
本试剂盒是在本公司柱式动物总RNA快速提取试剂盒基础上升级的免*仿产品,可用于从各种动物组织(包括白细胞)快速提取总RNA。
试剂盒特点:
1. 免去*仿抽提步骤,操作更加简单快速,整个过程只需要不到十分钟(对一个样品而言)。
2. 不使用有毒的*仿,健康环保。
3. RNA纯度很高,OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 所得RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。
7. 性价比高于进口的柱式RNA
试剂盒组成:
| 组分 | 编号 | 规格 |
| 溶液A | BTN71201A | 50mL |
| 溶液B | BTN71201B | 25mL |
| 离心吸附柱 | BTN90303 | 50套 |
| 通用洗柱液 | BTN60408 | 50mL |
| RNA洗脱液 | BTN71207 | 10mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,但溶液A需要4℃保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤是针对在1.5mL塑料离心管中进行的微量提取的,如果处理样品量大,请按比例增加各成份的用量并使用大的离心管和离心机。
1. 根据组织细胞类型的不同分为下面及种情况使用:
a)对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。
b)对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入1mL溶液A,用枪轻柔吹打数次,确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c)对新鲜组织:先将剪切成小块新鲜组织或液氮保存的组织放入10mL或15mL塑料离心管中,每50-100mg组织加1mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50mg/ mL溶液A,否则十分容易产生DNA污染。
d)对RNAhold保存组织:先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜组织的处理。
2. 将裂解物转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中,12000rpm室温离心3~5分钟。
3. 将上清液(残留沉淀为每裂解的细胞和组织)转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
4. 加入等体积的溶液B,充分颠倒混匀。
5. 将一半的溶液转移到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
6. 将剩下的一半溶液转移到同一离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
7. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加0.3mL通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。此步可以省略。
9.室温12000 rmp离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free收集管中,加入50-100μL RNA洗脱液。
11.室温12000 rmp离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. RNA的电泳检测:本试剂盒提取的RNA最好用甲醛变性胶电泳,如果在非变性的普通琼脂糖胶(in TAE或TBE buffer)上电泳,一定要使用RNA专用上样液RNAload(操作详见RNAload使用手册),千万不要使用常用的DNA上样液,因为DNA上样液没有经过去RNase处理,也不能将RNA变性,得到的带型将十分杂乱。
13. RNA完整性的电泳检测:如果需要做Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
疑难解答:
Q:上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗?
A:不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物,加RNase处理后,这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如百奥莱博的RNAload)。
Q:如何确认和去处除污染的基因组DNA?
A:如果怀疑有DNA污染,可以用RNase处理RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用百奥莱博的非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
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