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459
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 英文名:
Lysogeny Broth Medium,Powder
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
LB培养基(国产,进口)由老牌试剂供应北京百奥莱博供货并提供技术支持,本产品用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多LB培养基等干粉培养基产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:LB培养基(国产,进口)
规格:250g
英文名:Lysogeny Broth Medium,Powder
产地:国产|进口
编号:BTN100602
品牌:百奥莱博
LB培养基是由美国科学家Giuseppe Bertani在1951年独立开发。但现在常用的LB配方是由Miller修改而成,主要是去掉Glucose并把NaCl浓度从0.5 g/L增加到10 g/L。本产品就是根据Miller配方制备的干粉型培养基。
储存条件:常温运输及保存,有效期两年。
使用方法:称取本产品25.0 g于1 L蒸馏水或去离子水中,加热溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,备用。
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BL0164 CollagenaseⅣ 胶原酶Ⅳ
瑞氏染色液 Wright stain 2×100ml|2×500ml
5-*代水杨酸 Safranine T 89-55-4
NF-230 羊抗狗IgG血清
F030834 BIOTIN标记山羊抗人IgG抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG*BIOTIN
ARB12265 大鼠肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA检测服务 Rat creatine kinase mb isoenzyme,ck-mb ELISA KIT
BTN131201 Protein A+G琼脂糖 Protein A+G Agarose
51811-82-6 Giemsa stain 姬姆色素染料
HC0127 硝酸纤维素膜(NC)
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58-96-8 Uridine 尿苷
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乙酰水杨酸 G-1-P-Na2 50-78-2
LB培养基(国产,进口)关键词:LB培养基,Lysogeny Broth Medium,Powder,BTN100602
·弱RIPA裂解液
编号:BTN131008
英文名称:RIPA Lysis Buffer(Weak)
规格:250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强,对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果,本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表:
| 产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
| 有效裂解成分 | 1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5% deoxycholate,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25% deoxycholate |
| 裂解强度 | 强 | 中 | 温和 |
| 对膜蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 一般 |
| 对胞浆蛋白的提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 对核蛋白的提取 | 很好 | 较好 | 较好 |
| 胞浆磷酸化蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 细胞核转录因子提取 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 含蛋白酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
| 含磷酸酯酶抑制剂 | 是 | 是 | 是 |
| 主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP,co-IP |
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意:通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000~14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意:RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物,属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下,可以直接离心取上清用于后续实验;如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白,则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物,随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子,例如NF-kappaB、p53等时,通常不必进行超声处理,就可以检测到这些转录因子。
备注:
1.为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒,不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
LB培养基(国产,进口)关键词:LB培养基,Lysogeny Broth Medium,Powder,BTN100602
·长效期SDS-PAGE电泳液(2-30 KD)(干粉)
编号:BTN100912B
英文名称:Stable SDS-PAGE Running Buffer
规格:20L
本产品是专门用于长效SDS-PAGE电泳的缓冲液,加水定容后即可使用,简便快捷。
本产品分A、B两种型号。A型电泳液适合30 KD以上蛋白,B型电泳液适合2-30KD蛋白。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·白细胞裂解液
编号:BTN130989
英文名称:White Cell Lysis Solution
规格:250mL
本品为即用型白细胞裂解溶液,可以用于裂解分离纯化好的血液白细胞,用于DNA提取、RNA提取等后续实验。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:(以DNA提取为例)
1. 取新鲜抗凝血5mL,在10mL或15mL的塑料离心管中用红细胞裂解液裂解红细胞(红细胞裂解液有几种配方,用户需要根据所选产品的使用手册进行操作,这里不列出每种的详细步骤),也可以直接2500rpm离心5分钟后取白细胞层到一新的10mL或15mL的塑料离心管中。
2.在所得的白细胞沉淀中或所得白细胞层溶液中加自备的生理盐水使得白细胞的终体积为2mL。
3. 加1mL的本产品,混匀后55℃ 保温3小时,其间轻轻振摇数次。
4. 加入3mL自备的Tris饱和酚,轻轻震摇5分钟,使得水相和酚相充分分开。
5. 3500rpm离心15分钟,上层水相含DNA,中间白色层为蛋白质,下层为酚相。
6. 将非常粘稠的含DNA的上清液转移到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。
7. 再用Tris饱和酚重复上面的抽提步骤,直到离心后中间层没有白色的蛋白出现为止。
8.在上清液中加入等体积的自备的*仿,轻轻震摇5分钟,3500rpm离心5分钟,转移上清液到一干净的10mL或15mL的塑料离心管中。此步可以除去残留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍体积的自备的3 M 乙酸*溶液(pH5.2)和2倍体积的无水乙醇,轻柔颠倒混匀,将出现絮状的DNA沉淀。
10. 用移液枪头将DNA沉淀挑取出来,转移到1.5mL的塑料离心管中,用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中残留的盐离子。
11.转移DNA沉淀到一个1.5mL的塑料离心管中,空气中放置10分钟左右待乙醇挥发后,加入0.5mL自备的TE缓冲液溶解DNA,4℃放置待用。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购LB培养基(国产,进口)。
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