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- 文献和实验
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878
- 英文名:
DNA column recovery kit for PAGE gel
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")PAGE胶DNA柱式回收试剂盒厂家直销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:PAGE胶DNA柱式回收试剂盒厂家直销
产地:国产|进口
英文名:DNA column recovery kit for PAGE gel
品牌:百奥莱博
规格:50次
聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(PAGE)是目前分离小片段DNA的主要方法,但是目前市场上没有专门的产品用于从聚丙*(代"烯")酰胺凝胶中回收DNA片段,本产品就是百奥莱博专门为此用途而开发的、从PAGE凝胶中回收DNA片段的试剂盒。
产品特点:
1.高效,采用高效的溶液使DNA快速从PAGE中扩散出来,使回收效率50-90%(跟片段大小和胶浓度等因素有关)。
2.可回收50bp-500bp的DNA片段(如果片段长度超过5100bp,建议使用琼脂糖分离回收方法)。本产品也能回收单链DNA。
3. 操作简单,整个过程只需要离心机,不需要其他设备。
4. 纯度高,采用能专一结合DNA的硅胶膜是杂质和DNA分离,回收的DNA可直接用于酶切、连接、PCR登等多种分子生物学实验。
5. 储存方便,试剂盒可以在室温放置数月,不影响其质量。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 25ml |
| 溶液B | 25ml |
| 通用溶胶液 | 50ml |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| DNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存(长期)或室温保存(短期),有效期一年。
使用方法:
1. 切取含DNA片段的PAGE凝胶(100mg左右,尽可能多地把多余的胶切除,否则会影响回收效率),放入1.5mL离心管中,用移液枪头尽可能捣碎(最好先在酒精灯上将枪头的口烧密闭再用于捣碎),捣得越细越好。
2. 按重量比为1:2的比例加入溶液A(100mg PAGE凝胶需要加入200μL溶液A)。
3. 将离心管水平放置并室温摇晃1-10个小时以让DNA从PAGE凝胶中扩散出来。如果DNA片段超过500bp,摇晃时间应适当延长。提高温度到45-65℃,DNA扩散速度会增加。
4. 12000~15000g室温离心2分钟,将含DNA的上清液转移到新的离心管中。
5. 再用100μL的溶液A洗涤凝胶一次并与上步得到的上清合并。
6. 加入900μL通用溶胶液和0.3mL溶液B,混合均匀后将离心管中的溶液分两次转移到离心吸附柱中,每次转移后都先静置3分钟,然后再12000~15000g离心1分钟,倒掉收集管中的液体。
7. 加入600-800μL通用洗柱液于离心柱中。
8. 12000~15000g离心1分钟,倒弃收集管中的废液。
9. 12000~15000g离心半分钟以去除离心吸附柱中的残留液体。
10. 将离心吸附柱置于一新的干净的离心管(自备)中,加入25-50μL通用洗脱液,静置3分钟。
11. 12000~15000g离心1分钟,离心管底部所得溶液即为纯化的DNA溶液,可立即用于后续实验或者放冰箱长期保存。
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·磷酸化蛋白纯化试剂盒
编号:BTN130883
英文名称:Phosphorylated proteins purification kit
规格:50次
·X-gal干粉
编号:BTN100885
英文名称:X-Gal Powder
规格:0.5g
X-Gal的学名为5-*-4-*-3-吲哚基-β-D-半乳糖苷,分子式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63。CAS号为7240-90-6。溶于甲醇、DMSO和二甲基甲酰胺,溶解度可达20mg/mL。
储存条件:低温运输、-20℃避光保存、有效期一年。
·T7 DNA聚合酶(未修饰)
编号:BTN130618
英文名称:T7 DNA Polymerase(Unmodified)
规格:300U
T7 DNA聚合酶催化在感染过程中T7噬菌体DNA的复制。该蛋白二聚体具有两种催化活性,DNA聚合酶活性和较强的3´→5´核酸外切酶活性。由于该酶具有高保真性和快速延伸速率,因而特别适于长链DNA模板的复制。T7 DNA聚合酶由两个亚基组成,T7基因5蛋白(80kDa)和E.coli硫氧还蛋白(1kDa)。这两个蛋白分别克隆并在E.coli的T7表达系统过表达。
产品特点:
1.缺口填充(无链置换活性)。
2.定点突变中第二链的合成。
3.具有快速延伸的特性,故无需长时间温育。
4.T7 DNA聚合酶不能用于DNA测序。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| T7 DNA聚合酶(10U/μL) | 30μl |
| 10×T7 DNA聚合酶反应缓冲液 | 1.5ml |
| BSA溶液(10mg/mL) | 0.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:对于不同的实验,各成分用量及反应时间可能不同,请根据具体实验具体调整。1×T7 DNA聚合酶反应缓冲液,加入0.05mg/mL BSA和自备的dNTPs,37℃温育。
热失活:75℃下反应20分钟。
单位定义(粘性末端活性单位):1 单位指在37℃条件下反应30分钟,能使10nmol的dNTP掺入酸不溶性沉淀物中所需的酶量。
贮存液成分:50mM KPO4,1mM DTT,0.1mM EDTA,50%甘油,pH7.0@25℃。
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸电泳和回收产品,欢迎来电咨询选购PAGE胶DNA柱式回收试剂盒厂家直销。
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文献和实验里的DNA条带,并将成功的方法反馈给Qiagen。于是Qiagen公司发布了User-Developed Protocol,虽然Qiagen说并未经最严格的彻底验证和优化,不过既然声誉卓著的厂家肯公开发布,毫无疑问已经证实是可行的了。生物通小编在这里特别推荐给大家,从此,你可以用常规的胶回收试剂盒来对付PAGE胶里的DNA条带,而不需另外购买一个Kit或者苦恼其他复杂的方法啦。 自配溶液:diffusion buffer: 0.5 M ammonium acetate; 10 mM
CRISPR/Cas9 基因敲除实验 -- 293FT 细胞转染验证 and trouble shooting
%;2. 72 h 后收集细胞提取基因组 DNA(按照基因组 DNA 提取试剂盒的说明书操作);3. 使用事先设计好的引物进行 PCR 扩增,这里使用的酶是 NEB 公司的 Q5 high-fidelity Polymerase,一切按照该酶的说明书严格操作;4. 将目的条带切割下来并使用胶回收试剂盒回收 DNA 条带,一切按照胶回收试剂盒说明书进行操作;5. 回收后的 DNA 样本,经 T7 Endonuclease I 酶解验证错配 DNA,部分结果如下:T7 EI验证成功,开始正式实验时间飞逝,上次说
。用于纯化标记反应是不错的选择,方法和PCR产物回收试剂盒是一样的,很方便。除了这种膜吸附的柱子,还有一种凝胶过滤原理的柱子也可以用于分段收集不同大小的产物,那个在建库等实验中用的比较多,也有用于纯化标记反应中的未标记分子或者核苷酸的。很小的DNA 片断常常会用PAGE胶电泳。PAGE胶好像还没有很好的溶解方法,除了我们前面提到的电洗脱,Qiagen还提供一些私人方法,在应急的时候可以尝试。将切割下来的PAGE条带冲洗后加入指管中,加入2倍体积的分散缓冲液(0.5M醋酸胺、10mM的醋酸镁,1mM
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