【乐倍实验用品超市】Biocos 带盖白色 PCR 8连管

PCR专题

粗心人。这样的错误会给将来的克隆造成麻烦。b)如果打算PCR后直接酶切，不要忘了在酶切位点的外侧再加上保护碱基，不同的酶对于保护碱基的要求是不同的。如果不设计保护碱基，则多半要用TA克隆的方式连接到质粒上，这时要注意Taq 酶的选择。若想在目的序列上附加上并不存在的序列，如限制位点和启动子序列，可以加入到引物5'端而不影响特异性。当计算引物Tm值时并不包括这些序列，但是应该对其进行互补性和内部二级结构的检测。十、有时候，对于引物设计仅了解有限的序列信息。比如，如果仅知道氨基酸序列，可以设计兼并

目的基因片段的PCR扩增与克隆

  10 min        保温 step8      End 扩增产物于0.8%的琼脂糖凝胶80伏电泳2 h，溴乙锭染色，凝胶成像仪观察分析扩增结果。若扩增谱带明显，并具有特异性，则挖带进行进一步扩增；若扩增谱带不明显，或特异性较差，则改变PCR条件，直到扩增出特异谱带。 凝胶加样缓冲液：0.25%溴酚兰；0.25%二甲苯青FF；40%（w/v）蔗糖水溶液；1×TAE 在琼脂糖凝胶中溴酚兰相当于35bp，二甲苯青相当于130bp。 目的DNA片段的进一步扩增 1 在长波紫外

Real-time PCR实验攻略

效果不好，而临床用于检测的PCR扩增片段通常为300 bp左右，因此UNG的预防作用日益受到重视和肯定。   a、提取mRNA时所用的EP管、玻璃等器皿全部都要用0.1%DEPC水浸泡。然后烘干，高压灭菌，再烘干。   b、用DEPC水洗过后当然不能用双蒸水洗了。那你用DEPC处理还有什么意义呢？还要用双蒸水洗吗？   c、玻璃器皿干烤：180度，8小时或更长时间；小器皿也可以用少许氯仿处理一下。另外，铁制品、研砵等也可倒