0.2mlPCR薄壁管（12联排，带盖）PCR-0212-F

RT-PCR反应液调制及反应设置

ml 或0.5ml 灭菌的PCR 薄壁管中； 3. 如果不用PCR 仪的加热盖，在反应混合液的上层加30 ~ 50µl 的矿物油防止样品在 PCR的过程中蒸发； 二、按以下条件进行反应 Step Temperature,° C Time,min Number of cycles Note 逆转录 50

PCR实验中DNA聚合酶的选择及实验方法

①反应总体积根据实际情况进行调控，可以做 20~50µ l以节约试剂； ②将上表各成分加入到 0.2ml或 0.5ml灭菌的 PCR薄壁管中； 如果不用 PCR仪的加热盖，在反应混合液的上层加 30 ~ 50µ l的矿物油 防止样品在 PCR的过程中蒸发； 三、按以下程序进行PCR 扩增 PCR 反应条件视模板、引物等的结构条件不同而各异，在实际操作中需根据具体的情况以及 PCR结果而进行优化。 Step

目的基因片段的PCR扩增与克隆

  10 min        保温 step8      End 扩增产物于0.8%的琼脂糖凝胶80伏电泳2 h，溴乙锭染色，凝胶成像仪观察分析扩增结果。若扩增谱带明显，并具有特异性，则挖带进行进一步扩增；若扩增谱带不明显，或特异性较差，则改变PCR条件，直到扩增出特异谱带。 凝胶加样缓冲液：0.25%溴酚兰；0.25%二甲苯青FF；40%（w/v）蔗糖水溶液；1×TAE 在琼脂糖凝胶中溴酚兰相当于35bp，二甲苯青相当于130bp。 目的DNA片段的进一步扩增 1 在长波紫外