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文献和实验缓慢滴加 650μl 预热的类器官培养基,确保基质胶被完全覆盖。放于 37℃,5%CO2 的培养箱中培养,每 2-3 天更换培养基(用于换液的类器官培养基内不含 Y27632)。 类器官传代 14、吸出类器官培养液,机械分离 Matrigel,然后加入 500μl 胰蛋白酶,放置于 37℃ 培养箱中孵育 1-2min 后,用移液器多次吹打,从基质胶中释放类器官。 15、用含有 10%FBS 的 DMEM/F12 培养基终止消化,在 4℃ 条件下 300g 离心 5min。 16、用冷 PBS
实验材料: 1. 2—3月龄的家兔胆囊; 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2; 3. 培养用液:以DMEM/F12为基础培养基,添加10%的胎牛血清、2 mmol/L谷氨酰胺、2μg/ml胰岛素、10 ng/ml表皮生长因子以及100 IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素。酶消化液为0.125%Ⅳ型胶原酶溶液。组织清洗液为DMEM培养液,并添加200 IU
我是用1640养PC12的,细胞状态很好.因为分化后的PC12贴壁很好,等培养液颜色发黄,直接倒掉培养液,在加入就好了,但一般那个时候就可以传代了!丁香园alg的观点: 我的也是PC12细胞,培养条件相同 牛,马血清各5%是唯一不同的 丁香园luop99的观点: 我的经验表明,只加FBS会出现PC12的分化,如alq图样,可能是FBS中含微量NGF,加马血清就不会出现分化,当然要10%浓度。也请教过协和老师
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