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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
贮存温度:2~8℃
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Cell Viability Detected Stain Kit
- 库存:
大量供应
- 供应商:
上海雅吉生物科技有限公司
- 规格:
50T/482T
1、快速简便:全程约50分钟,可测100例左右样本。
2、取样量微:本法取样本量100ul。
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =103.3%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
7、测试面广:可测动物组织、红细胞以及各种培养细胞、各种水产等,效果均佳。
细胞活性鉴别染液所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为636nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、酶促反应:按说明操作加入样本100l和混合试剂,37℃准确反应10分钟
2、加R7,3500转/分,离心10分钟,取上清
3、定磷:取上清液加入定磷剂,室温静置2分钟加终止剂
4、636nm波长,1cm光径,比色
技术参数:
本试剂盒保存期:6个月。贮存温度:2~8℃,特别提醒R4需放在-20℃以下冷冻保存。
参考文献:
1. Kok Poh Loh, Jia Qi, Benny Kwong Huat Tan, et al. Leonurine Protects Middle Cerebral Artery Occluded Rats Through Antioxidant Effect and Regulation of Mitochondrial Function. Stroke, 2010, 41:2661-2668.
2. Lei Liu, Yan Liu, Jie Cui, et al. Oxidative stress induces gastric submucosal arteriolar dysfunction in the elderly. World J Gastroenterol, 2013,19(48): 9439-9446.
3. Qifeng Zhao, Lan Shao, Xingti Hu, et al. Lipoxin A4 Preconditioning and Postconditioning Protect Myocardial Ischemia/Reperfusion Injury in Rats. Mediators of Inflammation, Volume 2013, Article ID 23135, http://dx.doi.org/10.1155/2013/231351.
4. Gen-Xiang Mao, Ling-Di Zheng, Yong-Bao Cao, et al. Antiaging Effect of Pine Pollen in Human Diploid Fibroblasts and in a Mouse Model Induced by D-Galactose. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, Volume 2012, Article ID 750963. doi:10.1155/2012/750963.
5. Shao-Hua Liu, Ke Ma, Xin-Rong Xu, et al. A single dose of carbon monoxide intraperitoneal administration protects rat intestine from injury induced by lipopolysaccharide. Cell Stress and Chaperones, 2010,15:717-727.
6. Chunpeng Zhu, Wei Hu, Hao Wu, et al. No evident dose-response relationship between cellular ROS level and its cytotoxicity ― a paradoxical issue in ROS-based cancer therapy. Sci Rep. 2014, 4:5029. doi: 10.1038/srep05029.
7. Hong-Xia Li, Yu Xiao, Ling-Ling Cao, et al. Cerebroside C Increases Tolerance to Chilling Injury and Alters Lipid Composition in Wheat Roots. PLoS ONE, 2013, 8(9): e73380. doi:10.1371/journal.pone.0073380.
8. Yan Deng, Wei Wang, Pingfeng Yu, et al. Comparison of taurine, GABA, Glu, and Asp as scavengers of malondialdehyde in vitro and in vivo. Nanoscale Research Letters, 2013, 8:190.
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文献和实验实验目的 掌握细胞计数的方法。 了解区分细胞存活状态的方法。 实验用品 0.4%台盼蓝溶液、无水乙醇或95%乙醇溶液、脱脂棉 普通显微镜、试管、吸管、毛细吸管、细胞计数板、绸布。 实验原理 在细胞培养工作中,常需要了解细胞生活状态和鉴别细胞死活,确定细胞接种浓度和数量以及了解细胞存活率和增殖度,如用酶消化制备的细胞悬液中细胞活力的鉴别,冻存细胞复苏后的活力检测等。细胞悬液制备后,常用活体染料台盼蓝对细胞进行染色,进行细胞计数。台盼蓝不能透过活细胞正常完整的细胞
106 个单个核细胞; (8) 用台盼蓝染液检查所分离的细胞活性:取2滴细胞悬液加1滴2%台盼蓝染液,5~10min后取样作湿片高倍镜检。活细胞不着色,死细胞染成蓝色。计数200个细胞,计算活细胞百分率,一般活性应在95%以上。 【注意事项】 (1) 与血液样品接触时应注意生物安全防护,避免血源性传染病。 (2) 操作应轻柔,细胞悬液应充分混匀,避免损伤细胞活性及细胞丢失。 (3) 细胞分层液的密度是影响分离效果的关键之一,最适密度在室温下应为
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