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如何保证生化检测结果的准确:
1. 室内质控:
开展常规项目的室内质量控制,绘制质控图和观察室内环境;
2.谨慎使用检测方法学:
在使用某一方法时,先虑标本量是否太少或血清凝固,需重新处理标本进行测定;如果是采用速率法,要考虑是否是酶活力过高;动态反应曲线是否正常,注意有无提示数据报警;
3.仪器因素:
仪器方面,如果发现某一时间的结果全部偏低,就要考虑是否引入了系统误差,是否发生仪器的样品针堵塞,搅拌棒搅拌不均等情况,或样品针注射器漏气,或试剂的交叉污染,或光源灯老化等问题。
4.标本状态:
避免标本的溶血或脂血现象。
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
得到:1 A280 =1.62 mg/ml。 4. 酶活力测定 1) 氨基酸活化反应的条件如下:35ul反应液中含有100 mM HEPES (pH 7.8),10mM KF,10 mM MgCl2 ,4 mM ATP,2 mM [32 P] PPi和1 mM亮氨酸,在37o C保温,用约4 nmol/L LeuRS起始反应,于不同时间,取出15ul反应液,加入200ul淬灭液中(3.5%高氯酸,2%活性炭和0.05 M焦磷酸钠)停止反应,在淬灭液中再加入5毫升10 mM焦
铁丝筐)。【试剂】1. 3%茚三酮试剂 称3g茚三酮用95%乙醇溶解定容到100ml容量瓶里,贮于棕色瓶中。此试剂应放在冷凉处,不宜久放,使用期约10天。2. 氰酸盐缓冲液(按以下方法配制):(1)NaCN贮备液0.01mol/L(490mg/L)。(2)醋酸缓冲液:称360g醋酸钠(含三分子结晶水)溶于约300ml无氨蒸馏水中,加66.67ml冰醋酸再用无氨蒸馏水稀释至1L。取溶液(1)20ml,用溶液(2)定容到1L。3. 标准氨基酸 精确称取在80℃下烘干的亮氨酸13.1mg(或α-丙氨
溶液,称取30g甲酸钠,溶解于约60ml蒸馏水中,加入10ml8%的甲酸,最后加水到100ml;2.茚三酮试剂,称取1g茚三酮和1g氯化镉(CdCl2.H2O),加入25ml上述缓冲溶液和75ml乙二醇,室温下放置一天,第二天使用。若出现沉淀,则过滤后使用。该溶液一定要头一天配制,第二天使用,不宜放置过久,也不能现用现配;3.4%和2%无水碳酸钠溶液各50ml;4.标准亮氨酸溶液,准确称取25mg亮氨酸,加数滴稀盐酸,待溶解后定容至50ml,该溶液亮氨浓度为500μg/ml。准确吸取上述母液
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