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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博生产销*(代"售")的北京现货Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒品牌,是高品质的病毒PCR检测试剂盒产品,欢迎的您垂询订购。
名称:北京现货Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒品牌
品牌:百奥莱博
等级:科研试剂
编号:SYA237
规格:48次/盒
产地:国产|进口
北京现货Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒品牌极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
甘油-亚甲蓝染色液 100ml
ARB11294 人*腔蛋白(CALU)含量检测 Human calumenin,calu ELISA KIT
BL0833 HRP标记亲和素
ARB12734 小鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)elisa测定使用说明书 Mouse 8-hydroxy-desoxyguanosine,8-ohdg ELISA KIT
PY08-044A 营养肉汤 225ml 20瓶/箱,用于一般营养不苛求细菌的培养
BTN131059 亚*二乙酸介质 IDA(Iminodiacetic Acid)Resin
ARB13131 小鼠胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)elisa检测说明书
β-N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)检测试剂盒(PNP比色法) 50T
ARB10446 人甲胺喋呤(MTX)含量分析 Human methotrexate,mtx ELISA KIT
E0501 抗凝驴血(无菌 pet瓶装) 100ml/200ml/500ml
JYBL-Ⅰ脱*液 500ml|5L
8-羟基喹*(代"啉")硫*(代"酸")盐 Ammonium tartrate 134-31-6
BL1434 1M Tris-HCl(PH=7.0)
BL1420 5%BSA封闭液
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碘化* Phthalide 7681-11-0
PY02-265 多粘菌素B培养基 250克
NF-205 羊抗人PA血清
北京现货Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒品牌关键词:Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒,SYA237,百奥莱博
MES buffer(0.05mol/L,pH5.5) 100ml
儿茶素 COA 225937-10-0或154-23-4
HC0178 杂交袋
BTN80205 DMSO,PCR级 DMSO,PCR Grade
蛋白脱盐柱 个
BL0964 正常人血清
BTN130638 核酸内切酶IV Endonuclease IV
50-81-7 抗坏血酸 Aseorbie acid(Vitamin C)
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PY01-107 三(羟甲基)*基甲*(代"烷")(Tris) 100克
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北京现货Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒品牌关键词:Nipah病毒荧光PCR检测试剂盒,SYA237,百奥莱博
·嗜水气单胞菌单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA077
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪流感病毒N2亚型(SIV-N2)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA457
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·冠状病毒(229E)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA183
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪流感病毒H1亚型(SIV-H1)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA449
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
·小双节RNA病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA208
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·单纯疱疹/巨细胞病毒双重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA145
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
·猪圆环病毒II型抗体ELISA检测试剂盒
编号:SYA638
等级:科研实验专用
规格:192次/盒
·猪圆环病毒2型(PCV-2)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA415
等级:科研实验专用
规格:48次/盒|96次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对猪圆环病毒2型特异性引物,结合特异性荧光探针,用荧光PCR技术对猪圆环病毒2型DNA进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。本试剂盒中猪圆环病毒2型的探针报告基团为FAM。
二、用途:
本试剂盒适用于猪病料、鼻咽拭子、血液等样本中猪圆环病毒2型(PCV-2)的特异检测。适用于猪圆环病毒2型(PCV-2)感染的辅助诊断、监测及流行病学调查,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
猪圆环2型PCR反应液(PCV-2-qPCR MIX) 1管 720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
阳性对照(JEV-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列,Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
按照相关标准采集。标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-80℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰壶。
6.1.1 血清:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入无菌的干燥玻璃管,室温(22-25℃)放置30-60min,血标本可自发完成凝集析出血清,或直接使用水平离心机,3000rpm离心5min,吸取上层血清,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.2 血浆:用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL,注入含EDTA2Na(乙二*(代"胺")四乙酸二*)或柠檬酸*抗凝剂的玻璃管,立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次,使抗凝剂与静脉血充分混匀,5-10min后即可分离出血浆,转移至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.1.3 拭子、分泌物等样品:在装有拭子或分泌物的离心管中加入500μL PBS或生理盐水,剧烈振荡30s。
棉拭子尽量挤出液体转移到无DNA酶污染的离心管中备用。
6.1.4 病灶组织样品:称取组织约0.1g于研磨器或组织匀浆器中研磨(最好置于冰上或加入液氮),再加1mL生理盐水研磨至无块状物,然后将样品转至1.5mL灭菌离心管中备用。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1 纯培养物:取培养物50μL与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心
3min,取上清5μL 进行PCR 反应。
6.2.2 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL 生理盐水,振荡混匀,取50μL样品,加入50μL DNA 抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min 取上清5μL 进行PCR 反应。
6.2.3 组织研磨液、拭子、血清、血浆及其他液体标本:取处理好的标本50μL,加入50μl DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm 离心3min 取上清5μL进行PCR 反应。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR 反应液(PCV-2-qPCR MIX),室温融化并振荡混匀后,10000rpm 离心10s。
设所需要的PCR 反应管管数为N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm 离心10s,向设定的N 个PCR反应管中分别加入15μL,向管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(PCV-2-PTC)5μL,10000rpm 瞬时离心10 秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1)阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2)阳性对照(PCV-2-PTC):均产生扩增曲线。
(3)以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1)在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明PCV-2核酸阳性。
(2)Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明PCV-2核酸阴性。
(3)如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4)对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行PCV-2 qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明PCV-2核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1)初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2)所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA 酶。
(3)PCR 操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR 扩增区等),防止实验室污染。
(4)样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5)试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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