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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货幽门螺旋杆菌荧光PCR检测试剂盒(HP)打折促销由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科研试验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多幽门螺旋杆菌荧光PCR检测试剂盒(HP)等细菌PCR检测试剂盒产品请联系我司咨询订购。
名称:北京现货幽门螺旋杆菌荧光PCR检测试剂盒(HP)打折促销
品牌:百奥莱博
等级:科研试剂
产地:国产|进口
一、简介
本试剂盒用一对幽门螺旋杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对幽门螺旋杆菌核酸进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途
该试剂盒适用于检测水样粪便、疑似污染的水、食物等样本中的幽门螺旋杆菌,用于幽门螺旋杆菌(HP)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成(48T)
组份 数量 规格
HP反应液(HP-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
HP阳性对照(HP-PTC) 1管 50μL/管
四、荧光PCR仪器适用范围
ABI系列、MJ系列、Roche系列,博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
五、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
六、样品采集、前处理与DNA提取
6.1 样品采集
水样便取0.5-1mL;疑似污染的食物取1g。
6.2 样本前处理:
水样便1300rpm离心2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.05g于研磨器中研磨,加入1.5mL生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液100μL于1.5mL灭菌离心管中;疑似污染的水直接取100μL。
6.3 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液,按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.3.1液体培养物:取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中,8000rpm离心3min,尽量吸弃上清,加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.3.2固体培养物:挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min,取上清5μL进行PCR反应。
6.3.3 粪便样品:挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中,加入0.5mL生理盐水,振荡混匀,13000rpm离心3分钟,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.3.4 其他液体标本:取标本2-3mL,13000rpm离心3min,弃上清,沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀,100℃恒温10min,13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
注:建议采用相关标准方法进行前增菌,并按照6.3.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(HP-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HP-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(HP-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明幽门螺旋杆菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明幽门螺旋杆菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行幽门螺旋杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明幽门螺旋杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管应高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
更多有关北京现货幽门螺旋杆菌荧光PCR检测试剂盒(HP)打折促销的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
·鼠疫耶尔森菌(鼠疫杆菌)单重荧光PCR检测试剂盒
编号:SYA114
等级:科研实验专用
规格:48次/盒
一、简介:
本试剂盒用一对鼠疫杆菌特异性引物,结合一条特异性探针,用荧光PCR技术对鼠疫杆菌进行体外扩增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。
二、用途:
本试剂盒适用于检测全血等样品中的鼠疫杆菌(YP),用于鼠疫杆菌(YP)的辅助诊断,其检测结果仅供临床参考。
三、试剂盒组成:(48T)
组份 数量 规格
YP反应液(YP-qPCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5ml/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
YP阳性对照(YP-PTC) 1管 50μL/管
四、储存条件及有效期:
本试剂盒于-20℃以下保存,有效期为6个月。
五、荧光PCR仪器适用范围:
ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪等。
六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
取抗凝血下层血细胞50μL,加入100μL双蒸水吹匀。
6.2 RNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽液体,按以下说明进行DNA核酸的提取。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品,并按照相应试剂盒说明进行操作。
对上述处理好的样本加入50μL核酸提取液,100℃恒温处理10min,13000rpm离心5min,取上清液转移至新的1.5ml EP管,-20℃保存。
注:阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取),直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高,建议最后在样品制备区域加入阳性对照。
七、检测步骤:
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(YP-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1µL N×1µL
总量 15 µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(YP-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qRT-PCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM,淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
八、结果分析:
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整,以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
(1) 阴性对照(NTC):不应产生任何的扩增曲线。
(2) 阳性对照(YP-PTC):均产生扩增曲线。
(3) 以上条件应同时满足,否则,此次试验视为无效。
8.3 结果判定
(1) 在试验成立的条件下,Ct值≤35的样本为阳性,表明鼠疫杆菌核酸阳性。
(2) Ct值显示为无的样本为阴性样本,表明鼠疫杆菌核酸阴性。
(3) 如果35<Ct值≤40,判为可疑样品。对于可疑样品,先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线,则为可疑阳性,否则判为阴性。
(4) 对于可疑阳性样品,重新抽提核酸,再次进行鼠疫杆菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线,判为样本阳性,表明鼠疫杆菌核酸阳性;否则判为样本阴性。
九、注意事项:
(1) 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
(2) 所有使用的离心管最好高压灭菌,而且必须不含DNA酶。
(3) PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等),防止实验室污染。
(4) 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行,以免污染。
(5) 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。
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4-*基-1-甲基-3-正丙基-1H-吡唑-5-甲酰胺 ATEE 139756-02-8
木质素磺酸* Potassium hydrogen tartrate 8061-51-6
巴比*(代"妥")*溶液(2%) 100ml
*甲基磺酰*(代"*") D-Mannose 329-98-6
ARB14036 植物维生素D3(VD3)Elisa分析 Plant vitamin d3,vd3 ELISA KIT
BL1071 牛肉粉
E0618 抗凝裂解绵羊血 100ml/500ml
PY08-063 GN增菌液 225ml 20瓶/箱,用于志贺氏菌的增菌培养亦可用于沙门氏菌增菌培养
聚肌苷酸 DL-Arginine HC1 30918-54-8
ARB12935 小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPAR-α)含量检测 Mouse peroxisome prolifeRators activator receptors alpha,ppar-α ELISA KIT
乳酸脱*酶(LDH)检测试剂盒(二硝基*(代"*")肼比色法) 50T|100T
ARB10456 人生长调节致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)elisa测定使用说明书 Human growth-regulated oncogeneβ/melanoma growth stimulating activity,groβ/mgsa ELISA KIT
PY02-130 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) 250克
α-乙酸*酚酯酶染色液(α-NAE法) 2×10ml|2×20ml
BTN120697 青霉素G*盐溶液 Penicillin G Potassium Solution
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ARB12618 大鼠蛋白激酶C(PKC)定量分析 Rat protein kinase c,pkc ELISA KIT
BL1329 通用引物 Random
F030425 胶体金标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*GOLD
ARB10948 人谷胱甘肽S转移酶(GSTs)酶联免疫定量检测 Human glutathione s-transferases,gsts ELISA KIT
Tris-EDTA缓冲液(1×TE,pH7.6) 500ml
68-94-0 次黄嘌呤 Hypoxanthine
BL1090 新生牛血清
DH5α化学感受态细胞 20×100ul
Caspase 10 活性检测试剂盒 20T|50T|100T
ARB10807 人抗甲型肝炎病毒IgG抗体(Anti-HAV)含量测试 Human anti-hepatitis a virus igG antibody,anti-hav ELISA KIT
Heinz小体染色液(结晶紫法) 100ml
ARB11618 人羟脯*酸(Hyp)含量检测 Human hydroxyproline,hyp ELISA KIT
10035-04-8 *化* Calcium Chloride
HC0230 大龙大容量电动移液器
DP333 大量血液基因组DNA提取试剂盒
PY08-046 肠道菌计数琼脂 9CM 10皿/盒,用于肠道菌计数和鉴别
BTN130417 蓝胶琼脂糖 Cibacron Blue Agarose
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