北京超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)价格

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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)价格
编号：ALH011
规格：20次|50次
品牌：百奥莱博
本试剂盒适用于动植物组织、动植物培养细胞的总RNA提取，采用改进的异硫*酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.结合了异硫*酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3.独特的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。
4.多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。
5.有效的去除了5S在总RNA中含量，提高了纯度。

试剂盒组份：

 

组份	20次	50次
裂解液RL	20ml	50ml
去蛋白液RE	15ml	25ml
漂洗液RW	5ml	10ml
RNase-free H2O	10ml	10ml
吸附柱和收集管	20套	50套

储存条件：室温，有效期一年。(裂解液RL需4℃避光保存)

注意事项：
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2. 本试剂盒抑制RNA酶效果极佳，所有离心步骤如未加说明，均可在常温进行。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题，本试剂盒不含有实验室常用试剂*仿，使用前需要自备*仿。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带，分别为~5Kb（28S），~2Kb（18S），条带亮度比值约为2：1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S，tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4，5条带也属于正常现象，如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时，如需稀释RNA样品应该用TE（PH 8)，如果用水稀释后检测，由于一般水离子强度和PH值低，会使OD280升高，从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后，加*仿前，样品可在–60℃～70℃ 保存一个月以上。
8. 若提取细菌RNA，推荐细菌RNA提取试剂盒（目录号：ALH027和ALH029）。

操作步骤（实验前请先阅读注意事项）
 提示：第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶中加入指定量无水乙醇!
1. 匀浆处理
a. 组织
将组织在液氮中磨碎，每50~100mg组织加1ml的裂解液RL后匀浆。组织样品容积不能超过RL容积的10%。
b. 单层生长的细胞
直接往直径3.5 cm的培养板中加入1ml的RL溶解细胞，并用移液枪轻轻吹打混匀。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RL量（每10cm2加1ml）。一般情况下，普通大小的细胞培养瓶，加入1ml的RL, 迅速轻摇使RL充分和瓶底所有细胞接触裂解细胞并灭活RNA酶，轻轻用移液枪反复吹打混匀。当RL量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。
c. 悬浮生长的细胞
通过离心来沉淀细胞，小心弃上清。每5~10×106的动物细胞或植物细胞加1ml的RL。在RL试剂中用移液枪反复吹打来裂解细胞。在加入RL前应避免洗涤细胞，否则会增加mRNA降解的可能性。
2. 将匀浆样品剧烈震荡混匀，在15～30℃条件下孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 可选步骤：4℃的条件下12,000rpm 离心10分钟，小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要一额外的分离步骤。匀浆化后在2~8℃的条件下以12,000rpm离心10分钟，移除匀浆中不溶解的物质，余下的沉淀中包含有细胞外膜、多糖、以及高分子量DNA，而上层的超浮游物含有RNA。
4. 每1ml RL加0.2ml*仿。盖紧样品管盖，剧烈振荡15秒并将其在室温下孵育3分钟。
5. 于4℃12,000rpm 离心10分钟，样品会分成三层：下层有机相，中间层和上层无色的水相，RNA存在于水相中。水相层的容量大约为所加RL体积的50%，把水相小心转移到新管中（不要触碰中间层），记录水相体积。
6. 加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇，混匀（此时可能会出现沉淀）。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱中（吸附柱套在收集管内，若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱中，请分两次转入吸附柱中。) ，12,000rpm离心45秒，弃废液，将吸附柱重新套回收集管。
7. 加500μl 去蛋白液RE，12000rpm 离心45 秒，弃废液。
8. 加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12000rpm 离心45秒，弃废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将吸附柱放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加50-80μl RNase free water，室温放置2分钟，12000rpm 离心1分钟。如果需要较多RNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，离心1分钟，或者另外再加30μl RNase free water，离心1分钟，合并两次洗脱液。洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要RNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积， 但是最小体积最好不少于30μl，体积过小降低RNA 洗脱效率，减少RNA产量。

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·平末端克隆试剂盒(含多克隆位点)(拓扑连接酶技术)
编号：ALH333
英文名称：Zero Background TOPO-Blunt Cloning Kit (with MCS)
规格：20次|80次
本试剂盒和传统的T4连接酶原理不同，它依据拓扑异构酶可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、高效（接近100%）连接DNA片段的原理采用本公司独特的工艺制成。

试剂盒组份(20次)：
TOPO-Blunt Vector(30ng/μl)————20μl
1000bp Control（40ng/μl）————5μl
10×Enhancer———————————20μl

产品特点：
1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成连接。
2. 无需冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板只需15-20分钟。
3. 无自连、零背景，无需繁琐蓝白斑筛选，见到长出的克隆便是有插入的（接近100%）。
4. 可以连接长达10kb片段（即使连接5kb片段，挑10个菌落，至少8个是有插入的），是目前世界上最简单、最快速、零背景免筛选的TOPO 平末端克隆载体。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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ARB10328 人内吗*(代"啡")肽-2(EM-2)含量测试 Human endomorphin-2,em-2 ELISA KIT
ARB10858 人抗突变型瓜*酸波形蛋白抗体(MCV)Elisa定量检测 Human anti-mutated citrullinated vimentin antibody,mcv ELISA KIT
BL1348 TMB单组分显色液
ARB12150 大鼠白介素15(IL-15)尿液中含量检测 Rat interleukin 15,IL-15 ELISA KIT
ARB12599 大鼠基质细胞衍生因子1A(SDF-1A/CXCL12)Elisa分析 Rat stromal cell derived factor 1a,sdf-1a ELISA KIT
BTN100837 EDTA溶液,0.5M,蛋白级 EDTA Solution
2646-71-1 NADPH-Na4 还原型辅酶Ⅱ四*
植物总RNA提取试剂盒 
HC0253 多道可调移液器整支可消毒系列
ARB10375 人甘露糖(MN)含量测试 Human mannose,mn ELISA KIT
酚酞  Thiamphenicol 77-09-8 
AB-PAS染色液   6×50ml|6×100ml
PY02-434  Swarm琼脂  250克  
BTN130627 核酸外切酶T Exonulease T
F030823 BIOTIN标记兔抗猴IgG抗体 Rabbit Anti-monkey IgG*BIOTIN
三十烷醇 L-Aspartic acid 593-50-0
(不需DNA酶消化)"
ARB13610 兔子组织因子(TF)含量检测 Rabbit tissue factor,tf ELISA KIT
乙酸-β-*酯 BOC-D-Leucine 1523-11-1
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·miRNA对应cDNA第一链合成试剂盒
编号：ALH189
英文名称：First strand synthesis kit of cDNA corresponding to miRNA
规格：25次
本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A 尾Poly(A)，再使用Anchored oligo(dT)通用逆转录引物进行逆转录反应，最终生成miRNA 对应的cDNA 第一链。miRNA cDNA 第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)修饰过程和逆转录过程的所有试剂，该试剂盒具有高效的Poly(A)修饰和逆转录效率， 可从20pg-2μg 的total RNA 中有效制备miRNA对应的cDNA 第一链。一次合成的cDNA可检测多个microRNA，节约了样品和成本。（该试剂盒可与miRNA荧光定量PCR检测试剂盒（ALH190）配套使用。）

试剂盒组分(25次)：
E.coli Poly(A) Polymerase(5U/μl)————————50U
10 × Poly(A) Polymerase Buffer—————————100μl
10 × rATP solution———————————————50μl
25μmol RT primer————————————————50μl
RTase (200U/μl)-————————————————5000U
5×RT Reaction Mix-———————————————200μl
RNase free H2O-—————————————————1ml

注意事项：
用本试剂盒合成得到的cDNA模板用于下游PCR或者荧光定量PCR检测时，可以根据实际情况选择使用量，如果发现有非特异扩增条带，或者融链曲线显示有非特异扩增，往往提示cDNA模板过量， 可以将上述cDNA模板稀释几十到几百倍甚至上千倍再使用。

储存条件：-20℃。

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