超敏BalbECL发光液优惠

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")超敏BalbECL发光液优惠，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：超敏BalbECL发光液优惠
品牌：百奥莱博
英文名：High sensitive BalbECL luminescence liquid
规格：25ml|100ml|500ml
产地：国产|进口
编号：RFT083
本品是一种超敏ECL发光液，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应，发出荧光，从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。BalbECL具有极高灵敏度和高信噪比，可检测出10-100 fg的微量抗原；发光迅速，荧光可使X感光胶片感光达12小时以上，特别适用于痕量蛋白检测；另外高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量，降低实验成本。

使用方法：
1、BalbECL工作液的配制：等体积混合适量BalbECL A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2、Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用平头镊子将膜取出，用滤纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面)，但不要使膜过度干燥，然后将膜平铺于一洁净保鲜膜上，避免产生气泡。
注：某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光，请选择ECL专用保鲜膜获得更好的实验效果。
3、根据膜的大小，按每平方厘米膜加0.125 ml BalbECL工作液的比例，滴加BalbECL工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上，常温放置1-2分钟。
注：为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量，确保发光液完全覆盖于膜上。
4、将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内。
5、在黑暗中放入X感光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟，显影定影观察冲洗结果。如掌握不好曝光时间，可以在膜上放置3-4张X感光胶片，统一曝光3-5分钟，显影后选择一张曝光最好的胶片。

注意事项：
1、BalbECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
2、各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。
3、为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。
4、由于叠氮*是HRP抑制剂，在缓冲液中应避免使用叠氮*作为防腐剂；如果二抗中含有叠氮*，发光实验前要进行5次TBST或PBST漂洗，每次10分钟。
5、在与膜发生接触过程中，请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材，避免蛋白污染产生高背景。

储存条件：2～8℃，有效期一年。

除超敏BalbECL发光液优惠外，我公司正在打折促销以下产品：

·小分子蛋白电泳试剂盒
编号：RFT078
英文名称：Small molecule protein electrophoresis Kit
规格：10次
本试剂盒含有小分子蛋白电泳(多肽电泳)全*(代"套")试剂，可以用来检测1-20kd的多肽大小。本试剂盒可配制至少10块常规大小的PAGE胶(8×10cm)。

试剂盒特点：
1 适用范围广：2×多肽电泳缓冲液和2×PAA溶液中不含有SDS，适用于多肽的变性和非变性电泳。
2 分辨率高：凝胶缓冲液独特配方，可以有效分离1-5kD多肽。
3 稳定性高：凝胶缓冲液pH为中性，存放时间长。
4 使用方便：配制凝胶时只需1:1混合2×凝胶缓冲液和2×PAA溶液，加上APS和TEMED即可配制凝胶。

试剂盒组成：

 

组份	规格	贮存
2×多肽电泳浓缩胶缓冲液	15 ml	4℃
2×多肽电泳分离胶缓冲液	30 ml	4℃
2×PAA溶液 超低浓缩胶用	15 ml	4℃
2×PAA溶液 超低分离胶用	30 ml	4℃
10% APS(干粉)	5 ml	常温
TEMED	0.5 ml	常温
10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)	500 ml(干粉)	常温
2×Tricine 上样缓冲液(含还原剂)	1 ml	-20℃
QuickLan蛋白染色液	500 ml	常温

使用方法：

一、10% APS配制：

10% APS配制-5 ml：将APS干粉溶于5 ml灭菌水中，彻底溶解后分装，1 ml/支，-20℃备存，每次取一管使用。10% APS应尽量减少室温存放时间，以防失效。10%APS在4℃有效期为一周，-20℃有效期6个月。若发现凝胶聚合时间延长，应考虑更换使用-20度保存的10% APS。

二、制胶：

I 配制分离胶
1、按照表一将不同体积的成分加入到小烧杯或离心管中混合；立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。

表一：(一块1 mm mini胶用量)*

	分离胶	浓缩胶
	18％T /5 ml	5％T /2 ml
2×多肽电泳浓缩胶缓冲液	/	1 ml
2×多肽电泳分离胶缓冲液	2.5 ml	/
2×PAA溶液 超低浓缩胶用	/	1 ml
2×PAA溶液 超低分离胶用	2.5 ml	/
10％APS	45-60μl**	20-30μl
TEMED	5μl	2μl

注：
* 如非必须，不要使用厚度1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75m和1mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。
** 凝胶的聚合时间与环境温度有关。夏天温度较高时，聚合较快；冬天气温低时，聚合时间会延长。可以根据表二的标准条件调节催化剂的加入量。

表二：超低凝胶制备凝固时间表

环境温度	20℃
	分离胶配制	浓缩胶配制
分离胶配制量	5 ml	-
浓缩胶配制量	-	2 ml
10%APS	50μl	20μl
TEMED	5μl	2μl
凝固时间	5-10 分钟	20-30 分钟

2、在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3 cm的无水乙醇层，使凝胶表面保持平整。
3、静置5-10分钟，待分离胶和乙醇层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。

II 配制浓缩胶
去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。
1、按照表一将不同成分加入到小烧杯或离心管中混合；立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。
2、将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
3、静置20-30分钟待凝胶聚合

三. 电泳：

10×Tricine-Tris-SDS缓冲液配制：
将10×Tricine-Tris-SDS缓冲液(10×TTS)粉末(Cat No：CB010P)置于一干净的一升烧杯中，加入500ml超纯水，彻底搅拌混匀，不要调节pH，即配成500ml的10×TTS缓冲液。

表三：1×TTS缓冲液配制

	1×TTS配制量 500 ml	1×TTS配制量 1000 ml
10×TTS	50ml	100ml
超纯水	450 ml	900 ml

注：伯乐Mini III电泳槽一次电泳使用500ml 1×TTS缓冲液。

将电泳槽的内槽加满1×TTS缓冲液，轻柔拔出梳子，用1ml移液器将梳孔吹洗干净，将Marker或蛋白样品(已经过2×Tricine上样缓冲液[Cat No：TP050]处理)加入点样孔，稳压电泳(表四)，至蓝色指示前沿至分离胶下沿位置时即可停止电泳。整个电泳过程大约需要2.5-3个小时。

表四 多肽电泳条件

恒电压	150V
起始电流	60-75mA/板胶
结束电流	15-25mA/板胶
电泳时间	2.5-3小时

四、染色(使用组分9-QuickLan蛋白染色液)：

用前必读：
1、使用前如发现瓶中有少许沉淀，请混匀后使用。
2、以下“使用方法”是针对0.75mm和1.0 mm厚度，10×10cm凝胶染色程序。

使用方法：
1、将电泳后的PAGE胶取下放入塑料容器中，加入适量染色液(以刚刚覆盖过胶面为适)，条带1-2分钟即可见。
2、摇床上常温摇动10-15分钟。
3、观察结果。

注意事项：
1、使用方法中的各种参数仅针对面积8×10cm或10×10cm，厚度0.75mm和1mm的凝胶，如果使用更大面积或更厚的凝胶，请加入更多的染色液并延长染色的时间。
2、常规染色所需的漂洗，固定，脱色步骤都无必要。
3、本染色液可以重复利用1-2次，敏感性会有轻微下降，请延长染色时间。
4、本染色液有轻微腐蚀性，请带手套操作。使用后，请盖好瓶盖，常温密封保存。

储存条件：4℃，有效期一年。


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·pUC18载体
编号：RFT117
英文名称：pUC18 vector
规格：2μg
pUC18载体适用于双脱氧法对DNA 片段进行测序，它克隆的DNA 片段比使用 M13 phage作载体时克隆的片段长。 由于在 lacZ 领域中含有多克隆位点， 因此可以在含有 IPTG、 X-Gal的平板培养基上通过蓝白筛选判断载体中有无 DNA 片段的插入。同时还可以通过载体上的lac promoter表达外源基因， 使用M13系列的通用引物对插入载体中的DNA片段进行测序。



贮存液：10 mM Tris-HCl(pH8.0) ，1 mM EDTA。
链长：2686 bp。
制备：使用 CsCl-EtBr 密度梯度超离心法纯化。
纯度：
1、含 70%以上的双链 Covalently closed circular DNA(RFI) 。
2、用双脱氧测序法确认多克隆位点。
3、确认 EcoR I，Sac I，Kpn I，Sma I，BamH I，Xba I，Sal I，Pst I，Sph I 和 Hind III只有一个酶切位点。
用途：
1、外源基因的克隆以及使用 lac 启动子进行表达。
2、使用 M13 系列引物进行 DNA测序。

储存条件：-20℃。

·蛋白酶抑制剂混合物(植物蛋白提取用)
编号：RFT198
英文名称：Protease inhibitor cocktail for plant cell and tissue extracts
规格：1ml|5×1ml
本品是一种用于植物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物(200mM AEBSF，10mM Bestatin，3mM E-64，2mM Leupeptin，2mM Pepstatin A，500mM Phenanthroline in DMSO)。一个包装的本产品通常足够用于100ml裂解液的配制。

植物细胞或组织提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。

本产品为经优化和测试的用于植物细胞或组织蛋白提取的蛋白酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝*酸、半胱*酸和酸性蛋白酶抑制剂、以及*基肽酶抑制剂。

本产品使用便捷，通常以1:100的比例把蛋白酶抑制剂混合物(通用型, 100×)加入裂解液中，即可用于常规的组织蛋白的提取，并有效抑制蛋白降解。

本产品可以有效抑制常规细胞或组织提取物中的各种蛋白酶活性，如丝*酸蛋白酶、*基肽酶、半胱*酸蛋白酶、苏*酸和天冬*酸蛋白酶、金属蛋白酶等。其中AEBSF是一种水溶性的丝*酸蛋白酶不可逆抑制剂，其抑制常数与PMSF和DFP的抑制常数相似，可以有效抑制胰蛋白酶(trypsin)、糜蛋白酶(chymotrypsin)、纤溶酶(plasmin)、激肽释放酶(kallikrein)和凝血酶(thrombin)等蛋白酶，作为PMSF和DFP的替代物，AEBSF的毒性更低、水溶性和水溶液稳定性更好。Aprotinin是丝*酸蛋白酶的竞争性可逆抑制剂；Bestatin是*基肽酶可逆抑制剂；E64是半胱*酸蛋白酶不可逆抑制剂；Leupeptin是丝*酸和半胱*酸蛋白酶可逆抑制剂；Phenanthroline是金属蛋白酶的可逆抑制剂。

使用方法：

1、本蛋白酶抑制剂混合物为100×的储存液，使用时按照1:100的比例加入到裂解液中(例如，1ml裂解液中加入10μl蛋白酶抑制剂混合物)，混匀后即可使用。含有蛋白酶抑制剂混合物的裂解液宜现用现配，不宜配制后冻存待后续使用。
2、待所需的抑制剂添加完毕混匀后，就可以开始进行常规植物组织的裂解和蛋白提取。

储存条件：-20℃，有效期12个月。


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·DNA Marker III(300～5000bp)
编号：RFT020
规格：100T(2×250μl)
本产品是由7条带状双链DNA条带组成的DNA Marker，适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。含有1×loading buffer，可根据实验需要，直接取2-5μl电泳，使用方便，电泳图像清晰。7条带的大小分别为300bp，500bp，800bp，1500bp，2000bp，3000bp，5000bp。其中1500bp条带含量为100ng/5μl，显示加亮带，其余条带含量为50ng/5μl。该Marker适用于DNA片段大小的确定和对DNA含量的精确定量。



使用方法：
1. 取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中就行电泳。
注：根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl；宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子，可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件：凝胶浓度为1.0％，凝胶长度5-7cm，电泳电压4-10v/cm，电泳时间25-30分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注：如果使用SYBR类染料染色，由于灵敏度比EB高，请酌情降低Marker的上样量。

注意事项：
1. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响，电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
2. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳，以保证Marker良好的分离效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。

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