超敏BalbECL发光液

特别提示：包括超敏BalbECL发光液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：超敏BalbECL发光液
英文名称：High sensitive BalbECL luminescence liquid
产品货号：RFT083
产品规格：25ml|100ml|500ml

本品是一种超敏ECL发光液，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶(HRP)发生化学反应，发出荧光，从而可以通过用X光片压片或其它适当荧光成像设备检测样品。BalbECL具有极高灵敏度和高信噪比，可检测出10-100 fg的微量抗原；发光迅速，荧光可使X感光胶片感光达12小时以上，特别适用于痕量蛋白检测；另外高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量，降低实验成本。

使用方法：
1、BalbECL工作液的配制：等体积混合适量BalbECL A液和B液，室温放置备用。工作液宜在临检测前配制。
2、Western二抗孵育后，并进行数次洗涤后，用平头镊子将膜取出，用滤纸略吸去过多的液体(切勿接触膜的蛋白面)，但不要使膜过度干燥，然后将膜平铺于一洁净保鲜膜上，避免产生气泡。
注：某些市售保鲜膜包裹印迹膜时会淬灭荧光，请选择ECL专用保鲜膜获得更好的实验效果。
3、根据膜的大小，按每平方厘米膜加0.125 ml BalbECL工作液的比例，滴加BalbECL工作液到膜上，确保使工作液均匀覆盖在膜上，常温放置1-2分钟。
注：为达节约目的可将膜减小但勿降低发光液用量，确保发光液完全覆盖于膜上。
4、将保鲜膜折起来完全包裹杂交膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖杂交膜的保鲜膜固定在暗盒内。
5、在黑暗中放入X感光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟，显影定影观察冲洗结果。如掌握不好曝光时间，可以在膜上放置3-4张X感光胶片，统一曝光3-5分钟，显影后选择一张曝光最好的胶片。

注意事项：
1、BalbECL A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
2、各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。
3、为获得最佳实验结果，请务必优化实验条件，包括检测样品的用量、一抗、二抗稀释度、杂交膜及封闭试剂的选择。
4、由于叠氮钠是HRP抑制剂，在缓冲液中应避免使用叠氮钠作为防腐剂；如果二抗中含有叠氮钠，发光实验前要进行5次TBST或PBST漂洗，每次10分钟。
5、在与膜发生接触过程中，请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材，避免蛋白污染产生高背景。

储存条件：2～8℃，有效期一年。

除了超敏BalbECL发光液,，我公司还供应以下相关产品：



名称：蛋白*酸酶抑制剂混合液Ⅰ
货号：BTN80809
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白*酸酶，以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，导致不同于正常生理状态的差异，影响实验结果。因此，加入外源性蛋白*酸酶抑制剂，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，维持蛋白质的磷酸化状态，是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。

产品特点：
1．即开即用，不需要单独购买每个成分然后再配制。
2．由5种蛋白*酸酶抑制剂(钒酸钠、*化钠、钼酸钠、酒石酸钠、咪唑)组成，各成分的浓度经过精心优化。
3．抑制谱广，能特异性地抑制丝氨酸磷酸酶、苏氨酸磷酸酶、酪氨酸磷酸酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和ATP酶。
4．与各种细胞裂解液兼容。
5．使用简单，在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋白*酸酶决定，一般按1/100的体积比)。
6．适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在临用前溶解本产品，并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μl)。注意：对蛋白*酸酶含量特别丰富的组织，可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续处理按常规方法进行即可。

注意：避免反复冻融本产品，所以第一次溶化后，如果还有剩余，可将其分装成小份冻存，每次用多少取多少。

名称：Cy3标记抗大鼠免疫荧光染色试剂盒
货号：KFS035
规格：300T
适用于细胞或组织切片的免疫荧光染色。在有适当的一抗检测特定的目标蛋白时，就可以使用免疫荧光染色试剂盒检测到红色、绿色或蓝色等荧光。免疫荧光染色试剂盒－抗大鼠Cy3，含有Cy3标记的山羊抗大鼠IgG (H+L)抗体，可以用于检测大鼠来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的红色。

Cy3（Ex/Em：550nm/570nm）是近年新开发的一种红色荧光探针。它比绝大部分其它的红色荧光探针更加明亮，更加不容易淬灭，而且背景更低。

本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。

本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
4. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。
5. 需自行配制用于免疫荧光染色的相关试剂，需自备盖玻片和载玻片。
6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

名称：10×CAPS电转移缓冲液(不含甘氨酸，适合大分子量蛋白转移)
货号：KFS094
规格：500ml
本产品作为蛋白电泳完毕后，将凝胶上蛋白电转移到PVDF 膜或其它膜上的缓冲液，pH11，含CAPS，不含有甘氨酸，本电泳缓冲液适合大分子量蛋白电转移。

使用时按10×电转移缓冲液：*醇：蒸馏水=1：1：8 的比例配制成1×的工作液，就可以用于电转移实验。

储存：RT，有效期一年。

名称：考马斯亮蓝R250
货号：SY0346
规格：10g
考马斯亮蓝（Coomassie brilliant blue）是两种相似三苯*烷染料的总称，有G250和R250两种，结构上前者比后者多了2个甲基，命名上 “G”为Green 的缩写，因G250的蓝色染料泛浅绿色；命名上“R”为Red的缩写，因R250的蓝色染料呈微红色调；“250”表示考马斯亮蓝的纯度。生化实验中常将考马斯亮蓝用于蛋白定量和蛋白电泳中蛋白染色。工作原理是：通过与蛋白质内的氨基和羧基基团间的静电结合作用以及范德华力，考马斯亮蓝与蛋白质形成强但非共价键连接的复合物。蛋白-染料复合物的形成稳定染料携带的负电荷阴离子（如磺酸基），从而产生在膜上或者胶上肉眼可见的蓝色。

考马斯亮蓝R250（Coomassie brilliant blue R250）更多用于电泳蛋白的染色，染色灵敏度比氨基黑高5倍，可达0.1µg蛋白。R250染色后需要褪色，才能进行蛋白条带的观察。

考马斯亮蓝G250的检测灵敏度虽然较低，但也可替代R250，使用一种快速而简单的方法进行蛋白染色。因其具有以下特性，即在低于pH 2.0时，溶液无色；pH 7.0时溶液呈深蓝黑色；若发生酸化，溶液呈现透明的棕褐色。当G250与蛋白结合，溶液又回到蓝色，主要因为蛋白分子周围具有更偏中性的pH环境。合适条件下，当把胶放在酸化的G250溶液中染色，显示出蓝色的蛋白条带，背景呈浅琥珀色。此种方法条带快速显色，且背景颜色也很浅使得条带看起来很清楚，则不需要做褪色处理。大部分蛋白用G250检测的下限是0.5µg。虽然灵敏度降低，取而代之的是操作快速以及方便，比R250染色节省高达11 h。

中文别名：考马斯亮兰R250；酸性蓝83；酸性艳蓝6B；亮蓝R；
英文别名：Brilliant Blue R; Brilliant Indocyanine 6B; C.I. number 42660; Acid Blue 83;
CAS：6104-59-2
分子式：C45H44N3NaO7S2
分子量：825.97
外观：暗红色至深暗红或暗色粉末
溶解性：溶于热水（1 mg/ml），乙醇和*醇
储存条件：室温
结构式


使用方法

1. 标准染色步骤（考马斯亮蓝R250）
1） 蛋白电泳凝胶置于50%*醇，10%醋酸，40%水溶液中固定，水平摇床上低速摇动30min~过夜；
2） 去除固定液，更换0.25%考马斯亮蓝R250染色液（0.25% R250 溶于50%*醇，10%醋酸，40%水溶液）完全覆盖住胶，染色2-4h。直至胶染成均匀的蓝色。注意：当胶在染色液内肉眼不可见时，说明染色完成，否则与深色的染色液对比，凝胶区域看起来颜色偏浅。
3） 将胶重新放置在5%*醇，7.5%醋酸，87.5%水溶液中脱色4-24h。约1-2h后蛋白条带即可看到，直至背景变透明后脱色才结束。中间可更换2-4次脱色液；
注意：此方法可检测到的蛋白量最低达到0.1µg蛋白/条带。
4） 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。

2. 快速染色步骤（考马斯亮蓝R250）
1） 蛋白电泳凝胶在25%IPA，10%醋酸的水溶液中固定30-60min；
2） 将胶放置在10%醋酸的水溶液中进行染色，含有60 µg/ml的考马斯亮蓝R250。约30min后条带显示，让胶继续染色直至达到理想的蛋白条带。在此染色方法中胶的背景染色比较浅，由于使用胶的浓度很低。
3） 将胶重新放在10 %醋酸*液中脱色2h或更长。期间可更换2-4次脱色液；
4） 将胶存放在7%醋酸中。也可以放在水中或者干燥保存。

注意事项
1）0.25%考马斯亮蓝R250染色液配置的过程中，需要先用*醇溶解R250粉末后，再加入醋酸和水，一般情况下不需要滤纸除杂。溶液可在4度存放6个月，若长时间保存出现沉淀，可用滤纸过滤得到澄清液体。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。