湿盒（小）

免疫组化用

湿盒具有两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后，加一抗，一般是37°C一小时，或者室温2小时，或者4°C过夜。无论怎样，时间都比较长，抗体容易干掉，干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以，加入一抗之后，放入一个可以密封的盒子里，再放一些湿的滤纸或者海绵，可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光，否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的，盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。

湿盒使用方法

步，信号源（膜）的放置：将用发光液孵育过的膜放置在暗盒的中间位置，将一层透明薄膜覆盖在膜上；

第二步，调试适当的红外光强度，将暗室中其它的灯光关闭，使暗室中只存在红外光，在红外光的条件下取出胶片，裁剪合适大小，做标示，正压在膜上，然后盖上暗盒，计时。

第三步，取出暗盒中的胶片进行显影等操作。

注意事项

1，保持暗盒表面和内部的干净整洁，因为污物有可能会有荧光信号，对结果造成不利影响。

2，暗盒的使用时注意白光和红外光的分段，在压胶片收集信号时，暗盒的放置位置尽可能的避免白光照射。