- ¥200
- 江蓝纯
- YA0763
- 2025年07月05日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
99
- 供应商：
江蓝纯
- 规格：
20片
免疫组化用
湿盒具有两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后，加一抗，一般是37°C一小时，或者室温2小时，或者4°C过夜。无论怎样，时间都比较长，抗体容易干掉，干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以，加入一抗之后，放入一个可以密封的盒子里，再放一些湿的滤纸或者海绵，可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光，否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的，盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。
使用方法
步，信号源（膜）的放置：将用发光液孵育过的膜放置在暗盒的中间位置，将一层透明薄膜覆盖在膜上；
第二步，调试适当的红外光强度，将暗室中其它的灯光关闭，使暗室中只存在红外光，在红外光的条件下取出胶片，裁剪合适大小，做标示，正压在膜上，然后盖上暗盒，计时；
第三步，取出暗盒中的胶片进行显影等操作。
注意事项
1，保持暗盒表面和内部的干净整洁，因为污物有可能会有荧光信号，对结果造成不利影响。
2，暗盒的使用时注意白光和红外光的分段，在压胶片收集信号时，暗盒的放置位置尽可能的避免白光照射。
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文献和实验。 抗体孵育 吸水纸吸掉封闭液，不洗，每张玻片滴加足够量的稀释好的一抗并放入湿盒，4 ℃ 孵育过夜。 加荧光二抗： PBST 浸洗爬片 3 次，每次 3 min，吸水纸吸干爬片上多余液体后滴加稀释好的荧光二抗，湿盒中 37℃ 孵育 1 h，PBST 浸洗爬片 3 次，每次 3 min。 注意：从加荧光二抗起，后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行。 固定拍照 复染核：滴加 DAPI 避光孵育 5 min，对标本进行染核，PBST 5 min×4 次洗去多余的 DAPI。 用吸水
用以定量检测未知标本的抗原浓度（mg/ml或U/ml）。应用这一实验方法可检测正常人群或患者血清中IgG、IgA 及IgM的水平。二、实验材料 2%离子琼脂或生理盐水琼脂（采用0.9%的生理盐水，内含0.1% NaN3）。 标准马抗人IgG血清（抗体）（北京生物制品研究所生产） 工作标准参考蛋白（北京生物制品研究所生产） PBS （pH7.2，0.01M）. 打孔器（孔径3mm）及打孔模板 微量加样器 湿盒（容器内加湿纱布或泡沫塑料） 已制备好的含有1%马抗
免疫血清） （2）待检血清（抗原）：人血清 （3）参考血清：全国统一人血清免疫球蛋白参考血清（批号不同，免疫球蛋白含量不同）。 （4）其它：生理盐水、琼脂粉、微量进样器、打孔器、玻璃板、湿盒等。 2. 方法 （1）将适当稀释（事先滴定）的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。 （2）在免疫琼脂板上按一定距离（1.2~1.5 cm）打孔，见图1。 （3）向孔内滴加1：2，1：4，1：8，1：16，1：32稀释的参考血清
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