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-20℃
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长期
- 英文名:
UltraPure dNTP Mix(10 mM each)
- 库存:
527
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价
品牌:百奥莱博
英文名:UltraPure dNTP Mix(10 mM each)
规格:1ml|5ml
本产品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔数混合物(各10mM),可与所有的耐热聚合酶配套使用。UltraPure dNTP纯度均达到99%以上。
使用方法:
UltraPure dNTP(10 mM each)可直接使用,或用调节至中性(PH7.5 左右)的无菌超纯水稀释至适当浓度使用。可用于要求较高的PCR反应(如Real-time PCR)、DNA序列测定、分子标记、cDNA合成等。
储存条件:-20℃。
欲咨询购买超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)
编号:WE0285
英文名称:0.5 M Tris-HCl(pH6.8)
规格:500ml
·全血Taq DNA聚合酶
编号:WE0127
英文名称:BloodTaq DNA Polymerase
规格:2500U
本品是通过缺失Taq DNA Polymerase N端一段*基酸和突变改造得到的新型DNA聚合酶。通过改造后使本产品能够全血中存在的抑制剂产生耐受作用,能够直接扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先对基因组进行提取和纯化。PCR产物3’端为A,可直接用于T/A克隆。
产品组成:
| 组份 | 2500U |
| BloodTaq DNA Polymerase,5 U/μl | 5×100μl |
| BloodTaq PCR Buffer, 10× | 5×1.8ml |
注意: BloodTaq PCR Buffer含有30 mM MgCl2
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一周,无明显活性改变。
使用方法:
1、使用前请将BloodTaq DNA Polymerase反复颠倒至完全混匀。
2、将PCR薄壁管置于冰上,加入除全血外的以下试剂。
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| BloodTaq DNA Polymerase | 1μl | |
| BloodTaq PCR Buffer, 10× | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,2.5 mM each | 4μl | 200μM each |
| Forward Primer(10μM) | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer(10μM) | 2μl | 0.4μM |
| 全血 | ≤10% | |
| RNase-Free water | xμl | |
| Total | 50μl |
注意:
a.加入全血前反复上下吸打完全混匀各种试剂、
b.DNA模板:可以使用肝素*、Na-EDTA、K-EDTA或柠檬酸*处理全血。通常建议全血含量为5-10%。不推荐使用高浓度血液。对于高GC含量的模板,加入10%DMSO。
c.引物:寡核苷酸引物长度通常含20-30个核苷酸,并且最好GC含量在40-60%并均匀分布于引物中。在常规的PCR反应中,引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
3、最后将全血加入管底。
4、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min | |
| 变性 | 95℃ | 30 s | 35-40 个循环 |
| 退火 | 50-68℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 250-500 bp/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 10 min |
注意:
a.PCR仪于94-95℃预热,将样品放置于PCR仪上开始循环。
b.BloodTaq提高了冷敏感性,具备了一些热启动特性。通常可以通过在冰上配制反应成分、最后加入聚合酶以及将热循环仪预热至变性温度(95℃)后立即进行反应来避免非特异性产物的产生。
c.变性温度与时间:在PCR循环前为了充分裂解血液细胞和释放/变性DNA,要求初始变性为95℃ 5分钟。
d.退火温度与时间:退火时间通常为30秒-1分钟。退火温度可以低于理论退火温度(Tm)5℃开始,通过梯度PCR进行优化。
e.延伸时间:延伸反应通常在72℃下进行。一般每250-500 bp延伸时间为1分钟。推荐72℃ 10分钟进行最终延伸。
f.通常35-40个循环可以达到最优扩增。
5、结果检测:反应结束后取5μl反应产物并加上电泳缓冲液一起电泳检测结果。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价关键词:超纯dNTP混合液,WE0160,10 mM,超纯dNTP混合液(10 mM),UltraPure dNTP Mix(10 mM each)
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