超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价

超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价

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  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0160-UDW
  • 2025年07月12日
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      UltraPure dNTP Mix(10 mM each)

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      527

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价
    品牌:百奥莱博
    英文名:UltraPure dNTP Mix(10 mM each)
    规格:1ml|5ml
      本产品是dATP、dGTP、dCTP、dTTP的等摩尔数混合物(各10mM),可与所有的耐热聚合酶配套使用。UltraPure dNTP纯度均达到99%以上。

    使用方法
    UltraPure dNTP(10 mM each)可直接使用,或用调节至中性(PH7.5 左右)的无菌超纯水稀释至适当浓度使用。可用于要求较高的PCR反应(如Real-time PCR)、DNA序列测定、分子标记、cDNA合成等。

    储存条件:-20℃。

    欲咨询购买超纯dNTP混合液(10 mM)折扣价,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:

    ·0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH6.8)
    编号:WE0285
    英文名称:0.5 M Tris-HCl(pH6.8)
    规格:500ml

    ·全血Taq DNA聚合酶
    编号:WE0127
    英文名称:BloodTaq DNA Polymerase
    规格:2500U
      本品是通过缺失Taq DNA Polymerase N端一段*基酸和突变改造得到的新型DNA聚合酶。通过改造后使本产品能够全血中存在的抑制剂产生耐受作用,能够直接扩增人和小鼠全血样品中的DNA而无需事先对基因组进行提取和纯化。PCR产物3’端为A,可直接用于T/A克隆。

    产品组成

     
    组份 2500U
    BloodTaq DNA Polymerase,5 U/μl 5×100μl
    BloodTaq PCR Buffer, 10× 5×1.8ml

    注意: BloodTaq PCR Buffer含有30 mM MgCl2

    质量控制
    1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
    2、经检测无外源核酸酶活性;
    3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
    5、室温存放一周,无明显活性改变。

    使用方法
    1、使用前请将BloodTaq DNA Polymerase反复颠倒至完全混匀。
    2、将PCR薄壁管置于冰上,加入除全血外的以下试剂。
     
    试剂 50μl反应体系 终浓度
    BloodTaq DNA Polymerase 1μl  
    BloodTaq PCR Buffer, 10× 5μl
    dNTP Mix,2.5 mM each 4μl 200μM each
    Forward Primer(10μM) 2μl 0.4μM
    Reverse Primer(10μM) 2μl 0.4μM
    全血 ≤10%  
    RNase-Free water xμl  
    Total 50μl  

    注意:
    a.加入全血前反复上下吸打完全混匀各种试剂、
    b.DNA模板:可以使用肝素*、Na-EDTA、K-EDTA或柠檬酸*处理全血。通常建议全血含量为5-10%。不推荐使用高浓度血液。对于高GC含量的模板,加入10%DMSO。
    c.引物:寡核苷酸引物长度通常含20-30个核苷酸,并且最好GC含量在40-60%并均匀分布于引物中。在常规的PCR反应中,引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。

    3、最后将全血加入管底。
    4、PCR反应条件
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 95℃ 5 min  
    变性 95℃ 30 s 35-40 个循环
    退火 50-68℃ 30 s
    延伸 72℃ 250-500 bp/min
    终延伸 72℃ 10 min  

    注意:
    a.PCR仪于94-95℃预热,将样品放置于PCR仪上开始循环。
    b.BloodTaq提高了冷敏感性,具备了一些热启动特性。通常可以通过在冰上配制反应成分、最后加入聚合酶以及将热循环仪预热至变性温度(95℃)后立即进行反应来避免非特异性产物的产生。
    c.变性温度与时间:在PCR循环前为了充分裂解血液细胞和释放/变性DNA,要求初始变性为95℃ 5分钟。
    d.退火温度与时间:退火时间通常为30秒-1分钟。退火温度可以低于理论退火温度(Tm)5℃开始,通过梯度PCR进行优化。
    e.延伸时间:延伸反应通常在72℃下进行。一般每250-500 bp延伸时间为1分钟。推荐72℃ 10分钟进行最终延伸。
    f.通常35-40个循环可以达到最优扩增。

    5、结果检测:反应结束后取5μl反应产物并加上电泳缓冲液一起电泳检测结果。

    储存条件:-20℃,避免反复冻融。


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