甘油明胶封片剂

免疫荧光（Immunofluorescence, IF）实验方法

光抗体，因此必须谨记避光操作，此外抗体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是，标记好荧光的细胞片应尽早观察，或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存，以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。 由于操作步骤比较多，同时在分析结果时无法像WB那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别，所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果，除了需要高质量的抗体，以及对实验条件进行反复优化外，还必须设立严谨的实验对照。总之，免疫荧光实验从细胞样品处理、固定、封闭、抗体孵育到最后的封片及观察拍照，每步都非常关键

脂类染色

、苏丹黑B显示脂类物质 （I）、操作方法： 1、福尔马林固定的组织恒冷箱冰冻切片，附贴于载片上或收集于装有蒸馏水的小烧杯中，厚5-10um。 2、50-70%酒精稍洗切片， 3、苏丹黑B染液中染色5-15min， 4、50-70%酒精洗去多余染液， 5、蒸馏水洗， 6、0.1%核固红染细胞核10min， 7、自来水洗10min， 8、擦去切片上多余的水分， 9、甘油明胶或水性封片剂封固。 结果：脂类物质：黑色，细胞核：红色。 （2）试剂的配制： 苏丹黑B（sudan

免疫荧光双标技术中操作要点和注意事项

一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化，不同点如下： 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理，封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育，孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油：0.01M PBS （1：1）。条件许可，建议购买抗淬灭的封片液，使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多，需要分别设定阳性和阴性