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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Swab Genomic DNA Extraction Kit
- 库存:
735
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京现货口腔拭子基因组DNA提取试剂盒哪里卖由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多口腔拭子基因组DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:北京现货口腔拭子基因组DNA提取试剂盒哪里卖
产地:国产|进口
英文名:Swab Genomic DNA Extraction Kit
编号:WE0179
规格:50次|200次
品牌:百奥莱博
本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统,高效专一吸附DNA,每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA,提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer GR | 25ml | 120ml |
| Buffer GL | 25ml | 120ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 75ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 25mg | 90mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱DS及收集管 | 50套 | 200套 |
| 离心管(1.5ml) | 50个 | 200个 |
产品特点:
1、采用硅基质膜原理,简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前若发现Buffer GL有沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
4、全部离心步骤可在室温下进行。
5、取样:使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次,晾干2小时保存,为确保样本不被食物或饮料污染,取样前30分钟内请勿进食和饮水。
操作步骤:
1.将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下,置于2ml的离心管(自备)中,加入400μl Buffer GR。
注意:如需无RNA污染的基因组DNA,可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号:WE0225S),震荡混匀。
2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即涡旋震荡15秒,充分混匀。
注意:加入Buffer GL后立即充分混匀;不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
3.56℃放置10分钟,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4.加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
5.将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中,一次最多不超过700μl 。12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心3分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8.12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9.将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中,向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)若需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
关于北京现货口腔拭子基因组DNA提取试剂盒哪里卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·5×TBE
编号:WE0215
规格:500ml
本品为5×Tris-硼*(代"酸")缓冲液,主要用于DNA的琼脂糖凝胶电泳。
·抗c-Myc标签多克隆抗体
编号:WE0348
英文名称:Anti c-Myc Rabbit Polyclonal Antibody
规格:100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签(EQKLISEEDL),而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的c-Myc-Tag融合蛋白。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:500-10000)
·封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液)
编号:WE0320
英文名称:Normal Goat Serum For Blocking
规格:10ml
正常血清是目前广泛使用的免疫学试验中的封闭及保护试剂。使用正常血清封闭可预先饱和组织切片对蛋白物质的物理吸附位点,从而大大减少组织对检测抗体的非特异性吸附。本封闭液采用优质正常山羊血清为原料,加入稳定剂和蛋白保护剂,可有效的的封闭组织上能与抗体非特异结合的位点,从而减少IHC实验的非特异染色,显著的降低背景。
注意事项:
1、如所用的一抗为山羊来源的(Goat anti-),请避免使用该封闭液,否则可能造成更多非特异着色。
2、以每张切片加入1滴(约50μl)计算,10ml可做200张切片。
3、为了获得实验最佳效果,请根据实验调整最佳使用量。
4、本产品仅用于诊断和科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
2、滴加适量内源性过氧化物酶封闭液,室温孵育10分钟,PBS充分淋洗。
3、滴加适量封闭用正常山羊血清工作液(免疫组化封闭液),室温孵育10分钟,甩干。
4、进行后续的一抗孵育等IHC染色步骤。
储存条件:2~8℃
北京现货口腔拭子基因组DNA提取试剂盒哪里卖关键词:口腔拭子基因组DNA提取试剂盒,Swab Genomic DNA Extraction Kit,WE0179
BTN71201 柱式动物RNAOUT Column Animal RNAOUT
ARB12923 小鼠主要组织相容性复合体I类(MHCI/H-2I)血清中含量检测 Mouse major Histocomp*(代"a")tibility complexi,mhci/h-2i ELISA KIT
ARB13057 小鼠肾上腺素(EPI)酶免分析 Mouse epinephrine/adrenaline,epi ELISA KIT
ARB14118 猪CD4分子(CD4)代做ELISA实验
ARB12480 大鼠前列腺特异性抗原(PSA)ELISA检测服务 Rat prostate specific antigen,psa ELISA KIT
二水还原茚三酮 L-Citrulline 5950-69-6
ARB11064 人转甲状腺素蛋白(TTR)elisa检测 Human transthyretin,ttr ELISA KIT
ARB11534 人高尔基蛋白73(GP-73)检测服务 Human golgi protein 73,gp-73 ELISA KIT
3,3,5,5-四甲基联*(代"*")*(代"胺") High range protein MW marker 54827-17-7
HC0038 黑色酶标板(不可拆)25块/包
ARB12368 大鼠转铁蛋白(TRF)定量分析
D-脯*酰胺 m-Cresol purple 62937-45-5
ARB13963 猪透明质酸(HA)尿液中含量检测 Porcine hyaluronic acid,ha ELISA KIT
苏丹黑B染色液(细胞专用) 3×20ml|3×50ml
ARB14102 羊激素敏感脂肪酶(HSL)ELISA代测服务
ARB10450 人四型胶原(Ⅳ-C)含量测试 Human collagen Ⅳ (Ⅳ-C) ELISA KIT
BTN100928 湿法电转液(干粉) Wet Transfer Buffer Powder
ARB12506 大鼠结肠组织黏蛋白-2(MUC-2)ELISA代测服务
D-缬*酰-L-白*酰-L-赖*酸对硝基*(代"*")胺2盐*(代"酸")盐 Magnesium gluconate 62354-43-2
ARB10216 人β防御素2(HBD-2)酶免分析 Human β defensin 2, hbd2 ELISA KIT
ARB12832 小鼠弓形虫循环抗原(TCA)酶标法分析
北京现货口腔拭子基因组DNA提取试剂盒哪里卖关键词:口腔拭子基因组DNA提取试剂盒,Swab Genomic DNA Extraction Kit,WE0179
·TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体,连接酶)
编号:WE0247
英文名称:pUC-T Simple TA Cloning Kit
规格:20次
pUC-T Simple载体是一种高效克隆PCR产物的专用载体,它是由pUC18载体在EcoR V酶切位点处切开,在两侧的3'端添加T而成。由于大部分耐热聚合酶反应时都会在PCR产物的3'端添加一个A,可以与pUC-T 3'端的T互补连接,同时它消除了pUC18载体上的多克隆酶切位点,克隆后的PCR产物将无法使用载体上的限制酶切下,需要在PCR扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR扩增引物导入的酶切位点进行DNA酶切时,酶切反应将不会受到T载体上其它多克隆酶切位点上的限制酶影响,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。
试剂盒中配备高效率的T4 DNA Ligase和为快速高效DNA连接优化的2×Quick Ligation Reaction Buffer。连接效率相当于用T4 DNA Ligase 进行常规连接1小时。带有插入片段的重组子可根据α互补原理,进行蓝白斑筛选,判断载体中有无外源基因的插入。克隆后可以用BcaBEST Sequencing Primers和 M13通用引物对PCR产物进行测序。
试剂盒组成:
| 组份 | 20次 |
| pUC-T Simple(50 n g/μl) | 20μl |
| Control Insert(50ng/μl) | 10μl |
| Quick T4 DNA Ligase | 20μl |
| 2×Quick Ligation Reaction Buffer | 120μl |
注意事项:
1、Insert DNA 要求
1)连接使用的PCR片段3’末端应带有“A”尾。有些高保真DNA聚合酶,如我公司的Pfu扩增的PCR产物是平滑末端,可使用加A试剂盒加上A尾后,再进行T载体克隆。
2)PCR产物建议进行切胶回收纯化后再进行T载体克隆,以免PCR产物中的非特异片段或残存引物等杂质影响。推荐使用WE0168快速琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒。
2、连接反应要求
1)本试剂盒能使大多数连接反应在25℃条件下5分钟甚至更短时间内达到反应终点,增加反应时间反应效率不会增强。如用快速连接反应1小时后,转化效率会明显降低;如25℃快速连接反应过夜,则转化效率会下降到75%。
2)2×Quick Ligation Reaction Buffer含有ATP,使用前置于冰上使其融化后充分混匀,建议初次使用分装成小管冻存,避免其反复冻融影响DNA连接效率。
3)由于T4 DNA Ligase中含有甘油,比较粘稠容易挂壁,建议使用之前短暂离心将液体收集到管底,取样时枪头尽量不要深入液面太深,以免粘在枪头上造成损失。
4)如快速连接产物用于电转,因快速连接反应体系中的PEG会影响电转效率,建议使用离心柱将连接产物进行DNA纯化(如WE0170快速DNA产物纯化试剂盒)后再进行电转。
3、感受态细胞要求
建议使用高效的热击转化感受态细胞,这样才可能得到比较理想的阳性克隆,如需进行蓝白筛选,宿主细胞必须具有正确的基因型(F´编码的【lacZ ΔM15】)产生ω片段,才能与载体DNA产生的LacZ α 多肽结合,表现出β-半乳糖苷酶活性(α互补)。pUC-T Simple载体以pUC18载体为基础构建而成,因此,适合pUC18载体的感受态细胞都可以使用。推荐使用本公司WE0251 TOP10感受态细胞、WE0252 DH5α感受态细胞。
4、阳性克隆筛选
阳性DNA片段成功插入至pUC-T Simple Vector中后,一般情况下β-半乳糖苷酶的表达将受到破坏,重组克隆体在含有X-Gal、IPTG、Amp的LB固体培养基上培养时将显示白色菌落。但有时比较短的DNA片段插入载体时,基因的读码框有可能正好与LacZ的读码框相吻合,克隆体也会显示蓝色菌落。
5、阳性对照
为了确认实验操作的正确性,以及实验试剂的有效性,我们建议使用本试剂盒中配备的Control Insert(750 bp)进行阳性对照实验。
使用方法:
1、按以下体系配制反应液:
| 成分 | 反应体系 | 对照体系 |
| pUC-T Simple(50ng/μl) | 1μl | 1μl |
| DNA 插入片段 * | 0.1 -0.3 pmol | -- |
| Control Insert DNA | -- | 1μl |
| 2×Quick Ligation Reaction Buffer | 5μl | 5μl |
| Quick T4 DNA Ligase | 1μl | 1μl |
| RNase-Free Water | 补足至10μl | 补足至10μl |
Insert DNA的使用量:在进行克隆时,Vector DNA和 Insert DNA的摩尔比一般为:1:2-1:10,可根据实验情况选择适当的Vector DNA和 Insert DNA的摩尔数比。Insert DNA的使用量=nmol数×660×Insert DNA bp数。本载体1μl(50ng)的摩尔数约为0.03 pmol。
2、轻轻混合,短暂离心。25℃反应5分钟。
注意:反应时间不要超过15分钟,否则会降低连接效率。
3、反应结束后,将DNA连接产物存放于0-4℃,而后进行转化实验;也可将DNA连接产物置于-20℃保存。
注意:勿进行加热失活反应。
4、将连接产物加入50μl感受态细胞中(将感受态细胞置于冰上融化),冰浴30分钟。
注意:用化学法转化时,连接产物的加入量不要超过感受态细胞体积的10%。
5、42℃热击45秒钟,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
6、加入450μl无菌SOC或LB培养基,混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养45分钟,使菌体复苏。
7、根据实验要求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有X-Gal、IPTG和Amp的LB固体培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃,直至液体被吸收后,倒置培养,37℃培养12-16小时。
8、计算白、蓝色菌落,挑选白色菌落,使用PCR法或酶切法鉴定插入片段是否正确。
储存条件:-20℃。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP322 口腔拭子基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 口拭子2. 移液器及配套无菌枪头(200 μl ,1ml),2 ml离心管3. 无水乙醇4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,台式离心机注意:为了保证样本不被食物或者饮料污染,取样前 30 min内请勿进食和饮水。实验准备-试剂盒准备:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶
一种基于手动芯片点样仪的快捷高效的转基因植物PCR-dot-blot鉴定法
no.DQ434847)转入烟草(Nicotiana tabacum L.cv.W38),所得T0代植株在16h光照(25℃)/8h黑暗条件下培养。1.2 方法1.2.1 转基因植物的PCR鉴定 随机挑取六株T0代转基因烟草,采用植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根生化科技有限公司)提取基因组DNA模板,另外分别以未转化的野生型烟草基因组DNA以及含有OSsec27p的重组质粒作为阴性和阳性对照模板,使用OSsec27p基因特异性引物进行PCR扩增。 取部分扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,检测
简单。 2. 它可以提取大片段DNA,最大可到150kb,适合于文库构建需要大片段DNA的情况。 3. 价格相对来说,比进口产品价格低。低价格可以让一些经费有限的实验室也可以抛弃传统苯酚,氯仿方法而使用到简捷方便的试剂盒来提取。以下是部分客户 名单:解放军总医院、协和医院、北医三院、北大医院、人民医院、同仁医院、北京基因组研究中心、湖南湘雅医院、西安交通大学、湖南师范大学生命科学院…… 电泳图片: 图片说明:泳道1、2来源于同一个病人
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