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EDTA Buffer(50×)
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北京百奥莱博科技有限公司
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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")WE0319型EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×)优惠,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:WE0319型EDTA缓冲液(IHC抗原修复液,50×)优惠
产地:国产|进口
编号:WE0319
品牌:百奥莱博
英文名:EDTA Buffer(50×)
福尔马林固定时,组织中的许多*基酸残基形成醛键、羧甲键而封闭了部分抗原决定簇,同时蛋白之间发生交联也使抗原决定簇隐蔽。因此,对于石蜡切片,要求在进行IHC染色前,先进行抗原修复,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,恢复抗原的原有空间形态。EDTA缓冲液是除柠檬酸缓冲液外另一种常用的IHC 抗原修复液。有部分抗原用EDTA缓冲液修复效果好于柠檬酸缓冲液。
注意事项:
1、请使用足量的修复液,修复过程中保证组织切片完全浸没在修复液中。
2、使用沸水浴或高压修复时,操作请务必谨慎,尤其高压修复时,保证锅内有足量的修复液,以防止干烧。
3、推荐的修复时间为达到理想修复效果所需时间,如组织粘片不牢,容易掉片,请酌情减少修复时间。
操作步骤:
1、高压热修复:根据需要量,取适量本品,稀释50倍后即可使用。将稀释好的修复液加入高压锅内,将待修复切片浸于其中,保证修复液没过组织(最好将切片浸入盛修复液的塑料容器内,再置于锅内修复液浴中),盖上压力锅盖,加热至均匀喷汽,从喷汽开始计时,1~2 分钟后压力锅离开热源,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度最大,是最常用的热修复法。
2、微波热修复:根据需要量,取适量本品,稀释50倍后即可使用。将切片放入盛有修复液的容器中,置微波炉内加热至沸腾,停止加热,使容器内液体温度下降保持在95℃~98℃之间并持续 10~15分钟(注意:请根据具体机型酌情设置条件,务必满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,自然冷却至室温,取出切片,蒸馏水冲洗后,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。此方法修复强度大于沸水浴,但小于高压修复。
3、沸水浴热修复:根据需要量,取适量本品,稀释50倍后即可使用。将待修复切片完全浸入盛有修复液的容器中,并将此容器置于盛去离子水的大器皿水浴中,电炉上加热煮沸,从修复液的温度到达95℃起开始计时15~20分钟。让切片在修复液中自然冷却至室温,蒸馏水冲洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2 次,每次 3分钟。下接免疫组化染色步骤。该方法效果较微波和高压修复差。
储存条件:2~8℃
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·2×BAmp MasterMix(含染料)
编号:WE0106
英文名称:2×BAmp MasterMix(With Dye)
规格:5ml
BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面,其优势更加明显,所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力,保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定,重复性好。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。
产品组成:
组份 | 1ml | 5ml |
2×BAmp MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
ddH2O | 1ml | 5×1ml |
试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
2×BAmp MasterMix(With Dye) | 25μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
ddH2O | up to 50μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 94℃ | 2 min | |
变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
退火 | 55-65℃ | 30 s | |
延伸 | 72℃ | 30 s | |
终延伸 | 72℃ | 5 min |
组份 | 0.1ml×10支 |
BL21(DE3)Competen t Cell | 10×100μl |
Control DNA pUC19,0.1ng/μl | 10μl |
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