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二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index P

rimer1-12) 基因结构和功能
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  • ¥190 - 2020
  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0241-VOW
  • 2025年07月14日
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    • 保质期

      长期

    • 英文名

      NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)

    • 库存

      964

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) 基因结构和功能在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。


    名称:二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) 基因结构和功能
    品牌:百奥莱博
    规格:24次|96次
    英文名:NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
    编号:WE0241
    产地:国产|进口
      本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer,专为illumina平台建库设计,index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要,制备的文库可用于Illumina GAIIx,HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。

    试剂盒组成

     
    组份 24次 96次
    Adaptor for Illumina 60μl 240μl
    Universal Primer for Illumina 30μl 120μl
    Index 1– 12 Primers for Illumina 12×10 μ l 12×20 μ l


    自备仪器、试剂和耗材
    1、磁力架:建议使用DynaMagTM-2(货号: 12321D)。
    2、DNA纯化回收试剂盒:建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号: WE0205)。
    3、DNA建库试剂盒:建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号: WE0229)。
    4、无水乙醇。
    5、反应管:建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管;枪头:建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、Adaptor为双链结构,请勿将其置于室温温度以上,以免发生解链、影响使用。
    2、Index primer开盖前请短暂离心,使液体收集到管底,以免不同引物间交叉污染。

    使用流程
    产品细节图片1

    操作步骤

    百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。

    Adaptor for Illumina:
    5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
    5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
    Universal Primer for Illumina:
    5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
    Index 1–12 Primers for Illumina:
      Index Primers for Illumina Index
    Index 1 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    ATCACG
    Index 2 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    CGATGT
    Index 3 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    TTAGGC
    Index 4 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    TGACCA
    Index 5 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    ACAGTG
    Index 6 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    GCCAAT
    Index 7 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGATCTGGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    CAGATC
    Index 8 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCAAGTGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    ACTTGA
    Index 9 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCTGATCGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    GATCAG
    Index 10 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGCTAGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    TAGCTT
    Index 11 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTAGCCGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    GGCTAC
    Index 12 Primerfor Illumina 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACAAGGTGA
    CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´
    CTTGTA


    储存条件:-20℃

    欲了解更多二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) 基因结构和功能的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·一步法Western专用封闭液
    编号:WE0296
    英文名称:One Step Western Blocking Buffer
    规格:100ml
      Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。本产品以奶粉为基础,采用独特配方,专用于百奥莱博一步法WB检测中的封闭步骤,可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭,操作方便快捷。另外,本产品特别添加了蛋白稳定剂,可保证每次实验封闭效果稳定可靠。

    注意事项
    1、每次使用时,必须保证封闭液将印迹膜完全浸没,以免影响封闭效果。
    2、本产品含有防腐剂,操作时请佩戴手套进行防护。
    3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。

    操作步骤

    1、本产品无需稀释,开盖即用。
    2、目的蛋白转移完毕后,将印迹膜放入容器中,加入适量One Step Western Blocking Buffer。
    3、室温孵育5分钟。
    4、封闭结束后弃去封闭液,进行一步法Western Blot后续操作。

    储存条件:2~8℃


    二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) 基因结构和功能关键词:二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12),NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Se,WE0241


    ·FITC标记山羊抗大鼠IgG(H+L)
    编号:WE0373
    英文名称:Goat Anti-Rat IgG(H+L), FITC Conjugated
    规格:100μl
    本产品为FITC(硫*酸荧光素)标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别大鼠IgG重链和轻链,其检测灵敏度高,本底低。荧光素标记抗体广泛应用于免疫学、细胞化学、流式细胞分析等研究,在临床检验上也用于细菌、病毒和寄生虫的检验及自身免疫病的诊断等。

    免疫原:大鼠IgG
    缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
    稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
    防腐剂:0.05%叠氮*
    荧光团:FITC,Amax=492; Emax=520
    应用范围:对于大多数实验(1:25-100)


    ·PCR Mix(含染料)(滴瓶装)
    编号:WE0100
    英文名称:PCR Mix(With Dye)
    规格:5ml
      本产品以滴瓶包装,集成了PCR反应所需各要素及稳定剂、增强剂,对PCR反应中各成份的浓度有较高的宽容度,无需加样工具,将本产品直接滴入加有模板、引物的PCR管即可完成反应准备。本产品热稳定性高,启封后置2~8℃保存,六个月内可随时取用。本产品使用高度封闭的热启动DNA聚合酶,可有效减少非特异PCR产物扩增,配制PCR反应体系可在室温进行,但须注意热循环程序的第一步必须包括至少10分钟的95℃热启动。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测。扩增得到的大部分PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。

    质量控制
    1、经检验无外源核酸酶活性;
    2、PCR方法检测无宿主残余DNA;
    3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因;2~8℃存放六个月,活性无明显改变。

    使用方法
      本产品以滴瓶包装,使用时,取掉旋盖后将滴瓶倒置,滴塞口对准已加入适量模板和引物的PCR管口上方,以食指和拇指轻轻挤压滴瓶,滴入一滴反应液,即可完成PCR反应准备。正常挤压时,液滴平均体积约为25μl,可能会因挤压滴瓶用力不一,造成挤出液滴体积存在差异,但对多数PCR反应,均可获得良好扩增。

    1、PCR反应体系:

     
    试剂 反应体积
    PCR Mix 1 滴
    Forward Primer,10μM 1μl
    Reverse Primer,10μM 1μl
    Template DNA ≤4μl


    注意:
    1)引物浓度以10μM作为参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
    2)PCR模板的使用量应视DNA性质加以调整。一般而言,在每滴PCR反应中,当模板为质粒DNA时,以1 pg至10ng为宜;当模板为细菌基因组DNA时,以1ng至100ng为宜;当模板为真核生物基因组DNA时,以10ng至300ng为宜。需注意,PCR模板绝非越多越好。过多的模板会对PCR反应产生抑制作用,且容易增高其它抑制物水平,影响扩增效果。

    2、PCR反应条件:

     
    步骤 温度 时间 循环数
    预变性 95℃ 10 min  
    变性 94℃ 30 s 30-40个循环
    退火 55-65℃ 30 s
    延伸 72℃ 60 s
    终延伸 72℃ 5 min  


    注意:
    1)产品含有高度封闭热启动DNA聚合酶,须在预变性95℃,10 min条件下实现酶的活化。
    2)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
    3)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品的扩增效率为1 kb/min。
    4)可根据扩增产物下游应用设定循环数。如循环次数太少,扩增量不足;如循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

    储存条件:-20℃,有效期2年


    二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) 基因结构和功能关键词:二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12),NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Se,WE0241


    ·DNase I(不含RNase)
    编号:WE0213
    英文名称:DNase I(RNase Free)
    规格:1000U
      DNase I是一种需二价阳离子的脱氧核糖核酸内切酶,可用于降解单链或双链DNA。其原理为DNase Ⅰ水解磷酸二酯键产生带有5"-磷酸基团和3"-OH的单核苷酸或寡核苷酸。Mg2+或Mn2+都可以激活DNase I的活性,而Ca2+浓度直接影响酶的活性。Mg2+存在时可在双链DNA的每条单链上随机地产生切口;而在 Mn2+存在下可使双链DNA断裂,使DNA片段化。用于无DNA污染的RNA的制备,逆转录及体外转录等实验。

    产品组成
    组份 1000U
    DNaseⅠ(RNase Free),1 U/μl 1ml
    Reaction Buffer(with MgCl2),10× 1ml
    200 mM EDTA 1ml


    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、因为DNase I 经常用于需要保持RNA完整性的DNA消化实验,所以在酶制备过程中最大限度的避免了RNase污染,可以安全地用于RNA的提取,但由于该酶中不含RNase 抑制剂,提醒使用时注意防止外源RNase的污染。
    2、DNase I受剪切力的影响比较大,使用前可以将离心管上下颠倒混匀,避免涡旋震荡。
    3、每处理1μg RNA,DNase I用量不要超过1U。

    使用说明:
    1、以制备用于RT-PCR的RNA样品为例,配置10μl反应体系,如下表:
    组分 体积 终浓度
    RNA Xμl 1μg
    Reation Buffer(with MgCl2),10× 1μl
    DNaseⅠ(RNase Free) 1μl 1 U
    RNase Free Water Yμl 补足至10μl

    2、37℃孵育30分钟。
    3、加入1μl 200 mM EDTA,65℃孵育10分钟,使DNase Ⅰ失活,终止反应。
    4、处理后的RNA可用于RT-PCR。

    储存条件:室温(15~30℃)



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