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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Set II)
- 库存:
520
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) 基因结构和功能由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24)等基因结构和功能产品请联系我司咨询订购。
名称:二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) 基因结构和功能
品牌:百奥莱博
规格:24次|96次
编号:WE0240
英文名:NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Set II)
本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer,专为illumina平台建库设计,index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要,制备的文库可用于Illumina GAIIx,HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。
试剂盒组成:
| 组份 | 24次 | 96次 |
| Adaptor for Illumina | 60μl | 240μl |
| Universal Primer for Illumina | 30μl | 120μl |
| Index 13 -27 Primers for Illumina | 12×10 μ l | 12×20 μ l |
自备仪器、试剂和耗材
1、磁力架:建议使用DynaMagTM-2(货号: 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒:建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号: WE0205)。
3、DNA建库试剂盒:建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号: WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管:建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管;枪头:建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、Adaptor为双链结构,请勿将其置于室温温度以上,以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心,使液体收集到管底,以免不同引物间交叉污染。
使用流程

操作步骤:
百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。
Adaptor for Illumina:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina:
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 13–27 Primers for Illumina:
| Index Primers for Illumina | Index | |
| Index 13 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGTTGACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
AGTCAA |
| Index 14 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACGGAACTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
AGTTCC |
| Index 15 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCTGACATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATGTCA |
| Index 16 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGGGACGGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CCGTCC |
| Index 18 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTGCGGACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTCCGC |
| Index 19 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTTTCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTGAAA |
| Index 20 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGGCCACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTGGCC |
| Index 21 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCCGAAACGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GTTTCG |
| Index 22 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACGTACGGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CGTACG |
| Index 23 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATCCACTCGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GAGTGG |
| Index 25 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATATCAGTGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACTGAT |
| Index 27 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAAGGAATGTGACTGGA GTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATTCCT |
储存条件:-20℃
更多有关二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) 基因结构和功能的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销*(代"售")以下产品:
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F040306 小鼠IgG抗原 Mouse IgG
N-癸酰基-N-甲基葡糖胺 Pyridine hydrochloride 85261-20-7
1,3-二甲基脲 Toluidine bule 96-31-3
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二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) 基因结构和功能关键词:二代测序接头引物试剂盒,二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24),NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Se,WE0240
·柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1~20ml)
编号:WE0175
英文名称:Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
规格:50次|200次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、血沉棕黄层、淋巴细胞、无细胞体液等样本中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本品可以处理0.1-1ml的全血,最高得率可达30μg,可纯化获得大小为100 bp到50 kb的DNA,纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染,可直接用于PCR、荧光定量PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | 200次 |
| Buffer RCL | 125ml | 2×260ml |
| Buffer GR | 15ml | 50ml |
| Buffer GL | 15ml | 50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 50ml |
| Buffer GE | 15ml | 60ml |
| 蛋白酶K | 12.5 mg | 50 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 1.25ml | 5ml |
| 吸附柱 DM及收集管 | 50套 | 200套 |
产品特点
1、纯度高:提取的基因组DNA可直接用于下游PCR、荧光定量PCR、酶切等各种实验。
2、提取量大:可从0.1-1.0ml的全血中提取基因组DNA。
3、兼容性强:适用于处理各种抗凝血液和细胞样本。
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、本试剂盒最多可以提取0.1-1ml全血样品或1×107个白细胞。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
5、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴孵育重新溶解。
6、试剂盒中的Buffer RCL浑浊后不能继续使用。
操作步骤:
1、样品处理:
1.1、提取200 ul血液样品时,向离心管(自备)中加入样本后,可直接进行下一步实验。
1.2、当血液样本量小于200μl时,加入Buffer GR补足至200μl,再进行下一步实验。
1.3、当血液样本量超过200μl时,加入1~2.5倍体积的Buffer RCL,轻轻涡旋或颠倒混匀,12000rpm(~~13400×g)离心1分钟,小心吸弃上清液,如果沉淀中还有红色,可以重复以上步骤一次。然后向沉淀中加入200μl Buffer GR,震荡至彻底混匀,再进行下一步实验。
1.4、如果处理血液样本为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血,其红细胞为有核细胞,血液样本量为5-20μl,可加入Buffer GR,补足至200μl后进行后续实验。
注意:如果下游试验对RNA敏感,可加入4μl RNase A(100mg/ml)溶液,震荡15秒,室温放置5分钟。RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225S。
2、向以上溶液中加入20μl 蛋白酶K ,混匀。
3、加入200μl Buffer GL,震荡至彻底混匀。
注意:不要将蛋白酶K 和Buffer GL进行预混。
4、56℃孵育10分钟,其间颠倒混匀数次。
注意:孵育10分钟DNA的产量已经达到最大,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、加入200μl无水乙醇,颠倒混匀数次。短暂离心,使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱DM中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如果提取样品是小鼠或猴子等血红素难以除去的种属的血液基因组,建议重复步骤7。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤8。
9、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)如果要提高DNA的终浓度,可以将所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1 分钟。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) 基因结构和功能关键词:二代测序接头引物试剂盒,二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24),NGS Multiplex Oligos For Illumina(Index Primers Se,WE0240
·高效无内毒素质粒大量提取试剂盒
编号:WE0167
英文名称:NoEndo Plasmid Maxi Kit
规格:2次|10次
本试剂盒提供一种简单快捷高效提取无内毒素质粒的新方法,在碱裂解法裂解细胞的基础上,采用独特的硅基质膜吸附技术,高效专一结合质粒DNA;同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤器,有效去除内毒素、基因组DNA、RNA、蛋白等杂质。本试剂盒所得质粒纯度高、提取量大,特别适用于细胞转染,同时也可用于DNA测序,PCR,体外转录,内切酶消化等实验。
为什么使用本试剂盒?:内毒素是质粒提取中常见的污染物,由于真核细胞对内毒素非常敏感,因此,如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。
试剂盒组成:
| 组份 | 2次 | 10次 |
| Buffer P1 | 30ml | 125ml |
| Buffer P2 | 30ml | 125ml |
| Buffer E3 | 30ml | 125ml |
| Buffer PS | 15ml | 30ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml | 50ml |
| Endo-Free Buffer EB | 10ml | 30ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 600μl | 2ml |
| 推柄 | 2个 | 10个 |
| 内毒素过滤器FQ | 2个 | 10个 |
| 吸附柱DQ及收集管 | 2套 | 10套 |
| 离心管(50ml) | 2个 | 10个 |
自备试剂:无水乙醇、异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,将吸附柱置于2~8℃可保存更长时间,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、Buffer P1 在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A 全部加入),混匀,置于2–8℃保存。使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、注意Buffer P2和Buffer E3含有刺激性物质,请戴手套操作,使用后应立即盖紧盖子。
6、使用Buffer PS处理过的吸附柱最好立即使用,避免放置时间过长影响使用效果。
7、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
操作步骤:
1、取150ml过夜培养的菌液,加入离心管(自备)中,12000×g离心2-3分钟收集细菌,尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入12ml Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮细菌沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入12ml Buffer P2,温和地上下颠倒混匀8-10次,使菌体充分裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮,提示可能菌量过大,裂解不彻底,应减少菌体量。
4、向离心管中加入12ml Buffer E3,立即上下颠倒混匀8-10次,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。12000×g离心10分钟,将上清全部倒入除内毒素过滤器中,慢慢推动推柄(Plungers)过滤,滤液收集在干净的50ml离心管(自备)中。
注意:Buffer E3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
5、向滤液中加入0.3倍滤液体积的异丙醇,上下颠倒混匀。
注意:加入异丙醇过多容易导致RNA污染。
6、柱平衡:向已装入收集管中的吸附柱中加入2ml Buffer PS,12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、6000-12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱的最大容积为15ml,所以第7步中所得溶液分多次过柱。如果离心机转子倾角较大时,建议加入吸附柱的溶液体积不超过10ml,以防发生漏液现象。
9、向吸附柱中加入10ml Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),6000-12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液。
10、重复步骤9。
11、将吸附柱重新放回收集管中,12000×g离心5分钟,倒掉废液,将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附膜的中间部位加入1-3ml Endo-Free BufferEB,室温放置2-5分钟,12000×g离心5分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2-5分钟,12000×g离心5分钟,将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热,可以增加提取效率。
储存条件:室温(15~30℃)
北京百莱博科技有限公司专业生产基因结构和功能产品,欢迎来电咨询选购二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) 基因结构和功能。
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