一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)特

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北京百奥莱博专业生产供应一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)特价促销，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)特价促销
编号：WE0147
品牌：百奥莱博
规格：100次
产地：国产|进口
  本试剂盒是采用探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时，逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高，荧光信号强，信噪比高，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效，提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围，对目的基因定量更准确，重复性好，可信度高。

试剂盒组成：

 

组份	100次
2×Super TaqMan OneStep Buffer	1.4ml
Super OneStep Enzyme	100μl
RNase-Free Wat er	1ml

注意事项：
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验，在操作过程中应避免RNase污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物，引物的选择可根据具体实验来选择，引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果，设计引物时需考虑GC含量，引物长度，引物位置，PCR产物的二级结构等因素，建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针，建议采用专业的设计软件进行设计。

使用方法：
以下举例为常规的反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)

1、将RNA模板、引物、2×Super TaqMan OneStep Buffer、Super OneStep Enzyme和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系：
 

试剂	25μl反应体系	终浓度
2×Super TaqMan OneStep Buffer	12.5μl	1×
Forward Primer，10μM	0.5μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	0.5μl	0.2μM
Probe，10μM	0.5μl	0.2μM
Super OneStep Enzyme	1.0μl
RNA Template	Xμl	10 pg～100ng
RNase-Free Water	up to 25μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg-100ng为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。

3、混匀，短暂离心，将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件：

步骤	温度	时间	循环数
逆转录	45℃	20 min
PCR预变性	95℃	2-5 min
变性	95℃	15 s	30-40个循环
退火/延伸	60℃	30-45 s

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、2-5 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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PY02-017  三糖铁琼脂(TSI)  250克  
F030506 FITC标记兔抗牛酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein*FITC
碘化* Phthalide 7681-11-0
NH水溶液  1mol/L|10% 100ml|500ml
ARB11562 人流感病毒抗体IgG(FLU)Elisa定量检测 Human influenza viruses igg,flu ELISA KIT
ARB12713 大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)含量检测 Rat phospho-inhibitory subunit of nf-κbα,pikbα ELISA KIT
硬脂酸* Potassium titanyl oxalate dihydrate 822-16-2
N-乙酰-L-酪*酸 HCTU 537-55-3
甲胺盐*(代"酸")盐 L-Aspartic acid calcium salt 593-51-1
血液基因组DNA提取系统(0.1-20 ml) 
66-84-2 D-Glucosamine  D-*基葡萄糖
ARB12696 大鼠凝溶胶蛋白(GelsolIn)Elisa方法检测 Rat gelsolin ELISA KIT
苏丹红7B Methyl α-D-mannopyranoside 6368-72-5
红藻*酸 Januˊs green B 58002-62-3
内源性链亲和素封闭液   100ml
*化乙酰胆碱 L-Histidine methyl ester dihydrochloride 60-31-1
ARB11660 人蛋白激酶C(PKC)酶免分析 Human protein kinase c,pkc ELISA KIT
ECL化学发光法检测试剂盒"
PY01-019A  猪胆酸  25克  
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·FITC标记驴抗兔IgG(H+L)
编号：WE0365
英文名称：Donkey Anti-Rabbit IgG,FITC Conjugated
规格：100μl
本产品为FITC标记的经亲和纯化的驴抗体，特异识别兔IgG，检测灵敏度高，本底低，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。FITC即硫*酸荧光素，为一种常用的荧光染料，常用于免疫荧光和流式细胞检测等多标记检测。

免疫原：兔IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：FITC，Amax=492; Emax=520
应用范围：对于大多数实验(1：50-200)

·SDS-PAGE上样缓冲液(还原，5×)
编号：WE0288
英文名称：SDS-PAGE Loading Buffer(Reducing, 5×)
规格：5×2ml
  SDS-PAGE上样缓冲液(还原，5×)是以*酚蓝为染料，5倍浓缩的SDS-PAGE凝胶电泳上样缓冲液，应用于还原型SDS-PAGE的蛋白样品制备和上样。该缓冲液中含有DTT，可使蛋白质分子的链内二硫键和链间二硫键断裂，通过二硫键连接的各蛋白亚单位彼此分离，经考马斯亮蓝染色以后在电泳凝胶上显现清晰蛋白条带。

注意事项：
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀，以确保溶液混合均匀。
2、本试剂含有DTT，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
3、本产品仅用于科研，不能用于人体实验或人体治疗。

操作步骤：
1、将SDS-PAGE上样缓冲液(还原，5×)与蛋白样品按照1：4的比例混匀。
2、将蛋白样品置于沸水浴中加热3-5分钟。
3、待蛋白样品充分变性后冷却至室温，以小于3000 rpm的条件离心30秒。
4、离心后，以取适量上清，直接加入SDS-PAGE凝胶加样孔内, 进行常规电泳。

储存条件：-20℃


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磷酸烯醇丙*(代"酮")酸三环已胺盐 DPPH 35556-70-8
BL0911 FITC标记Avidin 抗体
ARB13682 兔血管生成素2(ANG-2)免费代测 Rabbit angiopoietin 2,ang-2 ELISA KIT
BTN3660 非冻型组织DNA保存液 Tissue DNALOCKER
血红蛋白检测试剂盒(比色法)   50T
BTN130609 一步式RT-PCR Mix One-Step RT-PCR Mix
DL-天冬酰胺一水物 DL-Glutamic acid monohydrate 3130-87-8
尿含铁血黄素定性检测试剂盒(Rous法)   50T
ARB13465 鸡抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)Elisa定量检测 Chicken anti-thrombin Ⅲ,at-Ⅲ ELISA KIT
SJ0841 胎牛血清(北美血源)
BTN130662 Tth RecA蛋白 Tth RecA
木质素磺酸* Potassium hydrogen tartrate 8061-51-6

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