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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输和保存,RNase A 需要-2
- 保质期:
长期
- 英文名:
Plasmid DNA column extraction kit
- 库存:
985
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的北京柱式质粒DNA提取试剂盒促销用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多柱式质粒DNA提取试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:北京柱式质粒DNA提取试剂盒促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
英文名:Plasmid DNA column extraction kit
编号:BTN60205
本试剂盒是用于质粒DNA小量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理,再通过离心吸附柱,专一结合DNA,最后洗去杂质,高效快速提取质粒DNA,全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从1-5mL过夜培养的菌液纯化得到高达20μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0),可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。
试剂盒特点:
1.快速、步骤少,整个操作在半个小时之内完成。
2. 不需要预平衡离心吸附柱。
3. 洗柱液即开即用,不需要额外加乙醇。
4. 纯度高,采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
5.产量高,每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
6. 用途广,适用于低拷贝和高拷贝质粒。
7. 价格低,比多数国内同类产品的价格更便宜。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 13ml |
| 溶液B | 13ml |
| 溶液C | 18ml |
| RNase A溶液(10mg/mL) | 0.15ml |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| DNA洗脱液2.0 | 10ml |
| 离心吸附柱,6层 | 50只 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,RNase A 需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中,摇匀后再取用,未用完的溶液A最好在4℃保存。
2.从筛选平板上挑取单菌落至含抗生素的培养基中,37℃震荡培养12-16小时(摇床转速200-300)。注意:建议使用LB培养基,营养更丰富的培养基会使菌体浓度过高,超过纯化系统处理能力而降低DNA 质量。另外,延长培养时间有利于提高质粒DNA浓度,但是菌液培养过长时间会因细胞死亡、裂解而造成质粒DNA浓度降低。
3. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液,室温12000rpm离心1分钟,弃上清,再短暂离心,吸弃残留液体。
4. 加入250μL溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬(此步在冰上操作效果更佳)。
注意:细胞未充分悬浮会影响后续操作,可以使用漩涡振荡器帮助混匀或使用Tip 吸头吹打沉淀至完全混匀。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可,然后冰上放置不超过4-5分钟。注意:此步处理不能超过5分钟,否则DNA的碱损伤比较严重。同时千万不要剧烈振荡,否则基因组DNA 断裂产生的片段非常容易污染质粒DNA。溶液B用后需要将盖拧紧存放,否则空气中的二氧化碳会进入溶液,形成碳酸,中和溶液B中的NaOH,降低其效率)。
6. 加入350μL 冰上预冷的溶液C,反复颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上放置至少5分钟。
7. 最高转速(12000rpm以上)4℃离心5分钟,小心将上清液转移到离心吸附柱中。由于此时的溶液比重较大,有时候出现沉淀漂浮是正常现象,取上清时避开漂浮的沉淀即可。如果此步的离心在室温进行,更容易出现沉淀物漂浮的现象。
8. 静置2分钟以让质粒DNA与吸附柱充分结合,此步十分重要。
9.室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。
10. 加入500μL的通用洗柱液,室温12000rpm离心1分钟,弃收集管中废液。
注意:通用洗柱液中含乙醇,用后需要将盖拧紧存放,否则乙醇会挥发。
11. 重复上步1次。
12.室温12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响DNA的后续使用(如DNA上样时不能沉淀到加样孔中)。
13. 将离心吸附柱置于一个新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入30-100μL65-80℃预热的DNA 洗脱液2.0,室温放置2分钟。常温的DNA 洗脱液2.0也可以用于洗脱,但产量稍微有所降低。
14.室温12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
15. 由于百奥莱博的吸附柱结合DNA 能力较强,如果再加适量DNA 洗脱液2.0 到离心吸附柱中,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%),但注意不要使用上步得到的DNA洗脱液2.0来洗脱。
关于北京柱式质粒DNA提取试剂盒促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·Southern专用DNA Marker(生物素标记)
编号:BTN120654A
英文名称:Southern DNA Marker(Labeled by Biotin)
规格:20次
本产品是用生物素标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker,可以用做Southern杂交的Marker,便于准确确定杂交片段的大小。
产品特点:
1. 即开即用,非常方便。
2. 每个DNA片段显色强度均匀。
3. 如果探针用生物素标记,则必须用生物素标记的DNA Marker。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。
2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。
3. 按常规方法电泳。
4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。
5.转膜。
6. 按常规的方法杂交和检测生物素的方法检测。
·Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH6.5)(不含RNase)
编号:BTN60704
英文名称:RNase-Free Tris-HCl Solution
规格:250mL
本产品是用生物素标记的lambda/Hind Ⅲ DNA Marker,可以用做Southern杂交的Marker,便于准确确定杂交片段的大小。
产品特点:
1. 即开即用,非常方便。
2. 每个DNA片段显色强度均匀。
3. 如果探针用生物素标记,则必须用生物素标记的DNA Marker。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 按常规方法制备琼脂糖胶和酶切基因组DNA。
2.上样。在胶的两侧的加样孔中各加入10μL本产品。
3. 按常规方法电泳。
4. EB或其他染料染色后UV 观察结果。
5.转膜。
6. 按常规的方法杂交和检测生物素的方法检测。
北京柱式质粒DNA提取试剂盒促销关键词:Plasmid DNA column extraction kit,BTN60205,柱式质粒DNA提取试剂盒
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北京柱式质粒DNA提取试剂盒促销关键词:Plasmid DNA column extraction kit,BTN60205,柱式质粒DNA提取试剂盒
·丽春红S染膜液
编号:BTN100924
英文名称:Ponceau S BlotStain
规格:250mL
本产品是基于丽春红S的蛋白印迹膜染液,用于对PVDF膜和NC膜上的蛋白质进行超快染色的试剂。
产品特点:
1.超快,整个过程只需要5分钟。
2.染色可逆,脱色后印迹膜可用于后续试验如免疫检测、ECL、Dot-ELISA。
3.灵敏度为50-150ng。
储存条件:常温运输和避光保存,有效期一年。
使用方法:
1.将印迹转移膜放在一干净的塑料盒中,用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
2.用本产品染膜30-60秒。
3.用去离子水脱色数次,每次30-60秒,当背景呈现非常浅的粉色时,停止脱色。转移到印迹膜上的蛋白质在淡红色背景上呈现红色的条带。
4.将印迹膜在空气中稍微放干,然后将印迹膜扫描或照相以永久保存染色的结果。也可用塑料包装膜或塑料袋覆盖在湿的印迹膜上,用铅笔或钢笔勾画出条带,以此直接在印迹膜上标记目的条带的位置。以适当的压力下压,使膜上形成永久性的压痕。
5.丽春红染色的印迹膜可以直接用于Western检测。
6.如果需要去除蛋白质条带中的丽春红S染料,可用自备的0.2mM的NaOH浸泡印迹膜1分钟。
7.用去离子水洗膜3次,每次5分钟,然后空气干燥。
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