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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存,避免反复冻融,有
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
- 库存:
234
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞销*(代"售"),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京现货大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞销*(代"售")
品牌:百奥莱博
规格:0.1mL*10
编号:BTN140576
英文名:E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组Bacmid。使用pUC19质粒检测,本产品转化效率可达107CFU/μg。
DH10Bac细胞包含亲本Bacmid bMON14272和辅助质粒 pMON7124。亲本Bacmid 包含一个mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和lac Zα-互补因子。
辅助质粒包含tns ABCD 区域,该区域提供了mini-Tn7从供体质粒插入亲本Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual等)含有Tn7R和Tn7L 同源重组臂,Tn7R和Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和SV40 病毒的PolyA 加尾信号。当含有靶基因pFastBac的重组质粒转化到DH10Bac细胞后,发生重组后就可产生重组Bacmid,提取纯化重组Bacmid转染昆虫细胞Sf9或Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac细胞中的The φ80dlacZDM15基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组bacmid的蓝白斑筛选。
菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ-rpsL nupG/pMON14272/pMON7124。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,避免反复冻融,有效期半年。
自备试剂:重组质粒、SOC或LB培养基等。
使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10μg/mL tetracycline,100μg/mL X-gal,40μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
4. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
5. 每个离心管中加入900μl 无菌的SOC(不含抗生素),混匀后置于37℃ 摇床,200rpm 振荡培养4小时。
6. 用 SOC培养基进行10倍梯度稀释,如分成3个稀释梯度10-1,10-2,10-3。
7. 取 100μl的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板,37℃培养24-48小时。
8. 保留剩余的菌液保存于4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
注意事项:
1. 涂布用量可根据具体实验调整。
2. 新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
欲咨询购买北京现货大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞销*(代"售"),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·20%PVP K30溶液(不含RNase)
编号:BTN60605
英文名称:RNase-free PVP K30
规格:250mL
·核糖核酸酶RNase If
编号:BTN130672
英文名称:RNase If
规格:10000U
核糖核酸酶If是一种单链特异性RNA外切酶,能够切割所有RNA二核苷酸键,产生5´羟基和2",3´环状单核苷酸。重组RNase If是大肠杆菌RNase I与麦芽糖结合蛋白的融合蛋白,与野生型RNase I具有相同活性。
产品特点:
➤从DNA和蛋白质准备过程中去除RNA
➤ 降解单链RNA生成单、二、或三核苷酸)
➤ 用于核糖核酸酶保护试验
➤ RNase I不能降解DNA。降解单链RNA的能力比双链RNA的能力强。
➤ 无核酸内、外切酶污染。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| RNase If(50000U/mL) | 200μL |
| 10×Buffer | 1ml |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指10μl反应体系中,37℃条件下,15分钟完全降解1pmol合成ssRNA 33-mer 所需的酶量。反应在 1×Buffer 3下进行,20%丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳
(40:1 Bis),染色后观察结果。
热失活:70℃加热20分钟。
·无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)
编号:BTN130658
英文名称:Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
规格:10U
无机焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷*(代"酸")盐,转录过程中可提高RNA的产量,其反应原理如下:
产品组成:
| 组份 | 规格 |
| 无机焦磷酸酶(100U/mL) | 100μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指标准反应条件下,[0.5ml反应体系中,100mM Tricine(pH7.2),2mM MgCl2和2mM PPi,于25℃反应10分钟]每分钟催化从无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐的酶量。
北京现货大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞销*(代"售")关键词:大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞,BTN140576,E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
·BAL 31核酸酶
编号:BTN120409
英文名称:BAL 31 Nuclease
规格:50U
BAL 31核酸酶纯化自埃氏交替单胞菌BAL-31培养物。BAL-31核酸外切酶降解双链DNA的3´和5´末端,不切割分子内部。该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶,在切刻、缺口、双链DNA单链区和双链RNA的单链区进行切割。其工作原理图如下:
产品特点:
1.从两端逐步对双链DNA进行切割,缺失的长度适合于100~1000个碱基左右。
2.加入EGTA可失活。
3.限制性酶切图谱的构建。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系,1X核酸酶BAL-31反应缓冲液,30℃条件下,10分钟从线性双链φX174 DNA(40μg/ml)的两端各切下200个碱基对所需要的酶量。
使用方法:
1.在离心管中加入下列溶液:
| 成分 | 用量 |
| pBR322 -Ava I fragment | 3μg(2.0pmol) |
| 2×反应 Buffer | 37.5μl |
| BAL 31 Nuclease | 3~6U |
| H2O | up to 75μl |
2.30℃保温。分别于1、2、3 min时各取样25μl。
3.加入20mM EGTA,65℃加热10分钟灭活酶。
4.用1% Agarose电泳确认DNA片段。
注意事项:
1.该核酸外切酶的双链产物是平齐末端和粘性末端的混合物。尽管要达到最佳连接效率需要用合适的聚合酶修复粘性末端,但该混合物仍可以直接进行克隆。
2.如果需要,可以在使用前用反应缓冲液稀释该酶。
3.只有在20mM EGTA存在条件下,酶的热失活才有效。
北京现货大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞销*(代"售")关键词:大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞,BTN140576,E.coli DH10Bac Chemical Competent Cell
ARB10041 人I型胶原吡*(代"啶")交联终肽(ICTP)Elisa定量检测 Human ictp ELISA KIT
ARB11598 人唾液酸(SA)ELISA检测服务 Human sialic acid,sa ELISA KIT
9001-51-8 己糖激酶 Hexokinase
BTN81217 微量蛋白沉淀试剂盒 Mini Protein Precipitation Kit
DL-高*丙*酸 2′-dI 1012-05-1
钼酸铵负染色液 3% 100ml
司他夫定 DL100 3056-17-5
间*基*甲*(代"酸") Trifluralin 99-05-8
BTN130819 Bouin固定液 Bouin Solution
PY08-043 营养肉汤 10ml 10支/盒,用于一般营养不苛求细菌的培养
BTN130526 细菌专用蛋白酶抑制剂 Protease Inhibitor for Bacteria
木瓜蛋白酶抑制剂 Papain inhibitor 1ml
4-*基马尿酸* Thymoquinone 94-16-6
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