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凝胶法内毒素半定量试剂盒(国产,进口)

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  • ¥170 - 1710
  • 百奥莱博
  • 北京
  • BTN130504-GQU
  • 2025年07月14日
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    • 保存条件

      常温运输

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)

    • 库存

      640

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    百奥莱博专业生产销*(代"售")凝胶法内毒素半定量试剂盒(国产,进口),我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:凝胶法内毒素半定量试剂盒(国产,进口)
    品牌:百奥莱博
    规格:10×0.1mL
    编号:BTN130504
    产地:国产|进口
    英文名:Endotoxin semi-quantitative kit(Gel Method)
    本试剂盒又称鲎试剂,为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下(温度,pH值及无干扰物质),细菌内毒素激活C因子,引起一系列酶促反应,使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。

    试剂盒组成:

     
    成分 规格
    鲎试剂,灵敏度0.06 EU/mL 0.1ml×10支
    说明书 1份


    储存条件:常温运输,阴凉处避光保存,有效期两年。

    使用方法:

    一、样品溶液的制备
    样品的pH值应在6.0–8.0 之间,若超出此范围,需用无热原缓冲液或0.1N*氧化*、0.1N 盐*(代"酸")调节。若样品中可能存在鲎实验的干扰物质,见本说明书4.2“样品的干扰实验”。若样品中可能含有导致鲎试剂中G 因子旁路反应的(1,3)β-D-葡聚糖,需选用不会对(1,3)β-D-葡聚糖起反应的特异性鲎试剂。

    二:细菌内毒素标准溶液及对照液的准备
    2.1细菌内毒素标准溶液(本试剂盒不提供)
     取细菌内毒素工作标准品1支,按《细菌内毒素工作标准品使用说明书》配制2λ ,1λ ,0.5λ,及0.25λ的一系列内毒素标准溶液(λ为鲎试剂灵敏度标示值)。备用。
     注:鲎试剂灵敏度复核实验见本手册其他常用实验方案。
    2.2 阴性对照液:即无内毒素水。
    2.3 阳性对照液:即浓度为2λ的内毒素标准溶液。
    2.4样品阳性对照液:即添加浓度为2λ内毒素标准的样品溶液。

    三:内毒素检测
    3.1 鲎试剂的溶解:按标示量(本试剂盒为0.1mL/支)加无内毒素水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解。注意不要引起气泡,溶解后的试剂应在10 min内使用(即配即用)。
    3.2样品溶液的制备
     样品最大有效稀释倍数(MVD)的计算:
     MVD= C•L/λ
     λ:测试用鲎试剂灵敏度标示值(EU/mL);L:样品细菌内毒素限值;C:样品浓度或样品复溶后所得样品浓度。当L 单位为EU/mL(溶液)时,C的单位为1mL/mL;当L单位为EU/mg或者EU/U时,C的单位为mg/mL或者U/mL。按照计算所得体积,加无内毒素水制备样品溶液。
    3.3 各反应管中分别加入0.1mL 阴性对照液,阳性对照液,样品,或样品阳性对照液。
     封闭管口,轻轻摇匀,垂直放入37℃的恒温器中温育60分钟±2分钟,温育期间避免振动。
    3.4 结果判断
    3.4.1 将试管从恒温器中轻轻取出,缓慢倒转180°。若管内的内容物呈坚实凝胶,不变形,不从管壁滑脱为阳性,记录为(+);不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱为阴性,记录为(-)。
    3.4.2 只有当阴性对照管结果均为阴性,阳性对照管、样品阳性对照管结果均为阳性,实验方有效,否则无效。若阴性对照管为阳性,提示鲎试剂、无内毒素水或实验器具可能受到污染。若阳性对照管为阴性,提示鲎试剂活性减失、内毒素标准溶液效价降低,鲎试剂的灵敏度或内毒素的效价标示不准确,或内毒素标准溶液的稀释不正确。若样品阳性对照管为阴性,提示反应体系内有干扰因素存在。

    四:其他常用实验方案
    4.1 鲎试剂灵敏度复核实验
     当使用新批号的鲎试剂或实验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时,应按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“鲎试剂灵敏度复核实验”进行实验。按照下式复核灵敏度:λ=lg-1(ΣX/4),当0. 5λ≤λ ≤2.0λ时,鲎试剂灵敏度复核合格,检测时仍以标示灵敏度λ为准。
    4.2样品的干扰实验
     当鲎试剂、样品的来源、配方、生产工艺或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时,须按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“干扰实验”进行干扰实验。以样品代替无内毒素水为溶剂,配制2λ,λ,0.5λ,及0.25λ的内毒素系列标准溶液进行灵敏度复核。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之间(包含0.5 λ及2 λ),则认为在此实验条件下样品无干扰。若灵敏度复核值在0.5λ 到2λ之外,则认为在此实验条件下样品有干扰,需对样品进行稀释(稀释倍数不得超过最大有效稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰。
    4.3凝胶限度实验
     凝胶限度实验用于判断样品的内毒素含量是否超过药典所规定的细菌内毒素限值。按《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶限度实验”进行实验。在实验有效的情况下,如果样品管的两个平行管均为阴性,判定样品的内毒素含量小于药典规定限值。如果样品管的两个平行管均为阳性,判定样品的内毒素含量不符合药典规定。如果样品管的两个平行管一管为阳性,另一管为阴性,需进行复试。复试时,样品需做4个平行管,若所有平行管均为阴性,判定样品符合规定,否则判定样品不符合规定。
    4.4凝胶半定量实验
     本方法系通过确定反应终点浓度来量化样品中内毒素含量。详见《中华人民共和国药典》2010 版中《细菌内毒素检查法》的“凝胶半定量实验”。

    想要了解更多关于凝胶法内毒素半定量试剂盒(国产,进口)的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:

    ·亲和素
    编号:BTN131085
    英文名称:Avidin
    规格:10mg
    本产品为母鸡卵清糖蛋白冻干粉末,亲和纯化,脱盐处理。它结合能力为11-15μg生物素/mg亲和素,等电点10~10.5,在很宽的pH和温度范围稳定。

    产品应用:
    ➤作为与生物素化的酶结合或用于标记酶的免疫分析试剂。
    ➤作为富含生物素组织切片的封闭蛋白(使用0.1%来抑制内源生物素)。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·ONPG溶液(10mg/mL)
    编号:BTN131185
    英文名称:O-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside Solution
    规格:10mL
    本产品为即用型ONPG溶液,可直接用作β-半乳糖苷酶检测试剂盒的底物使用。ONPG即邻硝基*(代"*")β-D-半乳吡喃糖苷,分子量301.25,CAS是369-07-3,它是β-半乳糖苷酶的底物,其可被β-半乳糖苷酶水解为半乳糖和黄色的邻-硝基*(代"*")酚(ONP),因此可以通过培养液颜色的变化测知β-半乳糖苷酶的活性。

    储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。

    ·1M Tris-HCl(pH6.5)(DNA级)
    编号:BTN101203
    英文名称:O-Nitrophenyl-β-D-Galactopyranoside Solution
    规格:250mL
    本产品为即用型ONPG溶液,可直接用作β-半乳糖苷酶检测试剂盒的底物使用。ONPG即邻硝基*(代"*")β-D-半乳吡喃糖苷,分子量301.25,CAS是369-07-3,它是β-半乳糖苷酶的底物,其可被β-半乳糖苷酶水解为半乳糖和黄色的邻-硝基*(代"*")酚(ONP),因此可以通过培养液颜色的变化测知β-半乳糖苷酶的活性。

    储存条件:低温运输,-20℃干燥避光保存,有效期一年。

    ·β-巯基乙醇(蛋白级)
    编号:BTN131052
    英文名称:β-Mercaptoethanol,Protein Grade
    规格:10mL
    本产品用于将蛋白质的二硫键剪切成巯醇的温和的还原剂。也称为β- 巯基乙醇或BME。经常加入到酶溶液中来防止由于半胱*酸巯基氧化/ 二硫键形成造成的催化位点失活;经常作为添加的保护剂使用,终浓度为5 及20mM,含不含EDTA 均可。

    储存条件:常温运输和保存,有效期一年。


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    ·Poly(U)聚合酶
    编号:BTN130620
    英文名称:Poly (U) Polymerase
    规格:60U
    Poly(U)聚合酶催化UTP或ATP转化的UMP或AMP添加到RNA 3´端,该反应不依赖模板的存在。

    产品特点:
    1.用UTP标记RNA
    2.为RNA添加 poly(U)尾,用于克隆
    3.研究 poly(U)加尾对转染至真核细胞的RNA在稳定性和翻译上的影响
    4.2" O-甲基的3´修饰末端添加poly(A)尾
    5.无DNase、RNase和磷酸酶污染。

    储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

    ·三合一RNA上样液(B型,6X)
    编号:BTN3130B
    英文名称:RNA Loading Buffer
    规格:1.5mL
    本品是集RNA变性RNA、上样、RNA染色三种功能于一体的即用型溶液。

    产品特点:
    1.能提高RNA上样速度,免去繁琐的准备步骤,减少污染。
    2.其含有的RNase抑制剂能抑制RNA样品中残留RNase的活性,保证电泳过程中RNA的完整性。
    3.所含甘油和染料(仅BTN3130A含EB染料),便于直接上样和UV观察RNA电泳条带,免去染色和脱色过程。
    4.本产品与DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2完全兼容。

    产品组成:
    成分 规格
    三合一RNA上样液 1.5ml
    说明书 1份

    本产品为红色液体,含红色的EB(*化乙锭),有致癌性,避免用手直接接触。
    另一红色电泳示踪剂的电泳速度相当于50nt的RNA。

    储存条件:常温运输,4℃(短期)或-20℃保存,有效期一年。

    使用方法:
    1. 按1:1-1:3的比例将RNA样品与RNA上样液混合(如5μL RNA+15μL RNA上样液)。
    2. 65-85℃水浴保温10分钟,。
    3. 冰浴5分钟后即可直接上样电泳。
     注:本产品含EB,所以琼脂糖凝胶中可以不必再加EB。本产品与甲醛琼脂糖变性凝胶或用DNA/RNA两用快速电泳液SuperBuffer-2配制的非变性琼脂糖变性凝胶兼容。
    4.电泳完毕后可直接将凝胶放在紫外灯下观察结果,RNA 条带成红色。

    疑难解答:
    Q:为何RNA样品在甲醛变性胶中的电泳效果比普通非变性胶差?
    A:这是因为在非变性胶中,即使内部有切口的RNA分子(实际已经是两条RNA分子)也会通过形成发夹结构而跟完整的分子等速电泳,而在变性胶中,完整RNA分子和内部有切口的RNA分子将以不同的速度泳动,所以变性胶看起来效果不好是反应了真实情况,非变性胶看起来好只是一种假象。要求严格的实验(如CDNA文库构建)最好还是使用甲醛变性胶判断RNA的质量好坏。


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