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- 百奥莱博
- 北京
- WE0183-ZUD
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温(15～30℃)
- 保质期：
长期
- 英文名：
CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit
- 库存：
290
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括游离DNA提取试剂盒现货促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。
名称：游离DNA提取试剂盒现货促销
品牌：百奥莱博
编号：WE0183
产地：国产|进口
英文名：CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，样品裂解后，游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本品可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，游离DNA得率与样品的类型，储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer CL | 45ml |
| Buffer CB(浓缩液) | 60ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer EBL | 10ml |
| 蛋白酶K | 100mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml |
| 吸附柱DF及收集管 | 50套 |
| 离心管(L-1.5ml) | 50个 |
保存条件：吸附柱DF置于2～8℃保存1年，其他组分室温(15～30℃)。
自备试剂：无水乙醇、异丙醇。
产品特点：
1、适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。
2、可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。
3、纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取量下降。
3、本试剂盒可以提取0.1-1ml液体样品。
4、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解。
5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
6、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
7、实验开始前请将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用。
操作步骤：
1、向离心管(自备)中加入20μl 蛋白酶K 。
2、加入200μl血清/血浆样本。
注意：当样品量超过200μl时，请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量，具体试剂加入量可参考附表。
3、加入160μl Buffer CL，颠倒混匀，剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：200μl 血清/血浆样本60℃孵育10-15分钟即可。
5、加入360μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇)，震荡至彻底混匀。
6、冰浴5分钟，短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
7、将步骤6所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入750μl 无水乙醇，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
12、将吸附柱置于新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl Buffer EBL或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用,且离心之前室温孵育5分钟，可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度，可以将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer EBL洗脱并于-20℃保存。
附表：不同样本量推荐试剂加入量：
| 加入物 | 加入量(μl) | ||||
| 样本 | 200 | 300 | 600 | 800 | 1000 |
| Buffer CL | 160 | 240 | 480 | 640 | 800 |
| Buffer CB | 360 | 540 | 1080 | 1440 | 1800 |
| 蛋白酶K | 20 | 30 | 60 | 80 | 10 |
储存条件：室温(15～30℃)。
欲了解更多游离DNA提取试剂盒现货促销的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
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游离DNA提取试剂盒现货促销关键词：CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit,游离DNA提取试剂盒,WE0183
·一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(荧光探针)
编号：WE0147
英文名称：Super TaqMan OneStep RT-qPCR Kit
规格：100次
本试剂盒是采用探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)进行一步法Real-Time RT-qPCR的专用试剂盒。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应时，逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。本产品的检测灵敏度高，荧光信号强，信噪比高，非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。其所包含的特殊缓冲系统能使逆转录酶与DNA聚合酶同时发挥最大功效，提高反应效率。使用本产品可以得到更宽广的线性范围，对目的基因定量更准确，重复性好，可信度高。
试剂盒组成：
| 组份 | 100次 |
| 2×Super TaqMan OneStep Buffer | 1.4ml |
| Super OneStep Enzyme | 100μl |
| RNase-Free Wat er | 1ml |
注意事项：
1、本试剂盒中试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验，在操作过程中应避免RNase污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、本试剂盒中的各试剂应尽量避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。
4、本试剂盒必须使用特异性引物，引物的选择可根据具体实验来选择，引物设计的好坏直接影响到RT-qPCR反应的结果，设计引物时需考虑GC含量，引物长度，引物位置，PCR产物的二级结构等因素，建议采用专业的引物设计软件进行设计。
5、本试剂盒推荐使用特异性探针，建议采用专业的设计软件进行设计。
使用方法：
以下举例为常规的反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小的不同进行相应的改进和优化。(反应液的配置请在冰上进行)
1、将RNA模板、引物、2×Super TaqMan OneStep Buffer、Super OneStep Enzyme和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系：
| 试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Super TaqMan OneStep Buffer | 12.5μl | 1× |
| Forward Primer，10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Reverse Primer，10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Probe，10μM | 0.5μl | 0.2μM |
| Super OneStep Enzyme | 1.0μl | |
| RNA Template | Xμl | 10 pg～100ng |
| RNase-Free Water | up to 25μl |
注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常RNA模板的量以10 pg-100ng为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
3、混匀，短暂离心，将溶液收集到管底。
4、RT-PCR反应条件：
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 逆转录 | 45℃ | 20 min | |
| PCR预变性 | 95℃ | 2-5 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 30-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30-45 s |
注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、2-5 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件：-20℃，避免反复冻融
游离DNA提取试剂盒现货促销关键词：CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit,游离DNA提取试剂盒,WE0183
·Cy3标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：WE0383
英文名称：Goat Anti-Mouse IgG, Cy3 Conjugated
规格：100μl
本产品为Cy3标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体，特异识别小鼠IgG重链和轻链，可以与TRITC使用相同的滤光片。使用本产品检测灵敏度高，本底低。
免疫原：小鼠IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：Cy3 bis-NHS ester，Amax=550; Emax=570
应用范围：对于大多数实验(1：50-400)
·高效无内毒素质粒大量提取试剂盒
编号：WE0167
英文名称：NoEndo Plasmid Maxi Kit
规格：2次|10次
本试剂盒提供一种简单快捷高效提取无内毒素质粒的新方法，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术，高效专一结合质粒DNA；同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤器，有效去除内毒素、基因组DNA、RNA、蛋白等杂质。本试剂盒所得质粒纯度高、提取量大，特别适用于细胞转染，同时也可用于DNA测序，PCR，体外转录，内切酶消化等实验。
为什么使用本试剂盒？：内毒素是质粒提取中常见的污染物，由于真核细胞对内毒素非常敏感，因此，如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。
试剂盒组成：
| 组份 | 2次 | 10次 |
| Buffer P1 | 30ml | 125ml |
| Buffer P2 | 30ml | 125ml |
| Buffer E3 | 30ml | 125ml |
| Buffer PS | 15ml | 30ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml | 50ml |
| Endo-Free Buffer EB | 10ml | 30ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 600μl | 2ml |
| 推柄 | 2个 | 10个 |
| 内毒素过滤器FQ | 2个 | 10个 |
| 吸附柱DQ及收集管 | 2套 | 10套 |
| 离心管(50ml) | 2个 | 10个 |
自备试剂：无水乙醇、异丙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，将吸附柱置于2～8℃可保存更长时间，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、Buffer P1 在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A 全部加入)，混匀，置于2–8℃保存。使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、注意Buffer P2和Buffer E3含有刺激性物质，请戴手套操作，使用后应立即盖紧盖子。
6、使用Buffer PS处理过的吸附柱最好立即使用，避免放置时间过长影响使用效果。
7、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
操作步骤：
1、取150ml过夜培养的菌液，加入离心管(自备)中，12000×g离心2-3分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入12ml Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入12ml Buffer P2，温和地上下颠倒混匀8-10次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮，提示可能菌量过大，裂解不彻底，应减少菌体量。
4、向离心管中加入12ml Buffer E3，立即上下颠倒混匀8-10次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。12000×g离心10分钟，将上清全部倒入除内毒素过滤器中，慢慢推动推柄(Plungers)过滤，滤液收集在干净的50ml离心管(自备)中。
注意：Buffer E3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
5、向滤液中加入0.3倍滤液体积的异丙醇，上下颠倒混匀。
注意：加入异丙醇过多容易导致RNA污染。
6、柱平衡：向已装入收集管中的吸附柱中加入2ml Buffer PS，12000×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、6000-12000×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的最大容积为15ml，所以第7步中所得溶液分多次过柱。如果离心机转子倾角较大时，建议加入吸附柱的溶液体积不超过10ml，以防发生漏液现象。
9、向吸附柱中加入10ml Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，6000-12000×g离心2分钟，倒掉收集管中的废液。
10、重复步骤9。
11、将吸附柱重新放回收集管中，12000×g离心5分钟，倒掉废液，将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中，向吸附膜的中间部位加入1-3ml Endo-Free BufferEB，室温放置2-5分钟，12000×g离心5分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12000×g离心5分钟，将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Endo-Free Buffer EB在65－70℃水浴预热，可以增加提取效率。
储存条件：室温(15～30℃)
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购游离DNA提取试剂盒现货促销。
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文献和实验相关实验
游离DNA可电泳观察，虽然我们做到了，这也是锦上添花的事，因为现有的检测方法完全可以实现更微量核酸的检测工作。血清/血浆游离DNA提取试剂盒 Cat#DK606游离DNA(或称循环DNA，以下简称cfDNA)是一种无细胞状态的、片段化的胞外DNA，存在于血液、滑膜液和脑脊液等体液中。cfDNA在正常人的血液中含量甚微，平均值为13 ng/ml[1]，而当机体在一些特殊状态时(如患有肿瘤、自身免疫性疾病、感染性疾病、中风、心肌梗死及妊娠等)，其含量明显上升，比如恶性肿瘤患者平均值达到180ng/ml
-21-50793722-606 慢病毒现货产品促销：http://tong.dxy.cn/upload/2010/sbo/index2.html Email：sunbio@sbo-bio.com.cn
作为其中国区总代理，为回馈广大新老客户的支持与厚爱，我公司特对德国BISCHOFF液相色谱柱进行全面促销，凡在活动期间购买BISCHOFF色谱柱的顾客即可获赠原装瑞士军刀一把。 活动期限：2010.5.5-2010.7.30 BISCHOFF液相色谱柱采用超纯球形多孔硅胶作为基质，以高效的键合与封端技术研制而成。产品规格非常齐全，种类丰富，既能满足您常规分析的要求，也能满足水系流动相、耐酸耐碱等特殊需求。针对复杂组分的分离，BISCHOFF还推出
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