柱式酵母质粒DNA提取试剂盒北京价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式酵母质粒DNA提取试剂盒北京价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式酵母质粒DNA提取试剂盒北京价格
产地：国产|进口
规格：50次
品牌：百奥莱博
本试剂盒是专门用于提取酵母质粒DNA的产品(不适用于酵母dsRNA质粒)。本产品根据酵母细胞壁十分坚硬的特点，在细菌质粒碱裂解法的基础上，增加了高效裂解酵母细胞壁的预处理步骤，可在1小时左右得到可以用于PCR或转化酵母质粒DNA。

试剂盒特点：
1.快速，整个过程只需要一个小时左右，可同时处理多个样品。
2. 得到的酵母质粒DNA 纯度高，可直接用于转化和PCR等实验。
3.可以从平板上的菌斑或液体培养的酵母中抽提质粒DNA。
4. 安全，不需使用玻璃珠、酚、*仿等试剂。
5. 每5-10mL 酵母培养液一般可以提取到1μg左右的高拷贝酵母质粒DNA。
6. 即开即用，经济实惠，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

 

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	13ml
溶液C	13ml
溶液D	18ml
破壁酶	50mg
RNase A溶液10mg/mL)	0.15ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(RNase A溶液4℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将5-10mL 酵母过夜液体培养物分多次转移到1.5mL塑料离心管中。每转移一次后，需要12000～15000×g室温离心1分钟，然后吸弃液体培养基。注意：不要使用培养时间超过16小时的酵母液体培养物，否则质粒DNA产量偏低；也不要使用超过10mL的酵母液体培养物，否则破壁不充分，降低质粒DNA产量。
2. 加入1mL自备的无菌水，充分震荡混匀，12000～15000×g室温离心1分钟，吸弃上清。
3. 加入600μl溶液A，充分震荡细胞沉淀重悬，95℃保温10分钟。
4. 12000～15000×g室温离心1分钟，弃上清液。
5. 加入250μl含破壁酶的溶液B(配制方法是将本试剂盒提供的50mg 粉末状的破壁酶和0.15mL RNase A溶液全部加入到装有13mL溶液B的塑料瓶中，轻柔摇晃混匀后使用。未用完的部分需要分装成小份然后放-20℃保存，否则破壁酶很容易失去活性)，吹打混匀。
6. 37℃保温30分钟，延长保温时间到60分钟有利于细胞壁的裂解。注意：放置较长时间后，溶液B中的裂壁酶会逐渐失活，额外再加入一些裂壁酶(如蜗牛酶、Lyticase、Zymolyase、Lywallzyme等，总浓度为1mg/mL)可以极大提高产量。
7. 将离心管放冰浴冷却后，加入250μl溶液C，轻轻颠倒混匀直至裂解液变得澄清，然后室温放置5-10分钟。注意：不要剧烈震荡，否则基因组DNA 将断裂并污染质粒DNA。
8. 加入350μl溶液D，轻轻颠倒混匀几次，管内将出现白色沉淀物，然后冰浴放置10-30分钟(如果质粒较长，最好放置30分钟)。
9. 12000～15000×g室温离心6-10分钟，将上清液转移到离心吸附柱中。
 注意：不要将漂浮在液面的沉淀物(如果有的话)转移到离心吸附柱中。上清液可以分多次转移。
10.室温下放置至少2分钟以让质粒DNA 充分结合到离心吸附柱上。
11.12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
12. 将500μl 通用洗柱液加入离心吸附柱中，12000～15000×g室温离心1分钟，弃穿透液。
13. 重复上步操作一次。
14.12000～15000×g室温离心1分钟去除离心吸附柱中残留液体。不要此步省略，否则残留洗液将影响后续的电泳、PCR和转化实验。
15. 将离心吸附柱套在一干净的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μl DNA 洗脱液2.0(加入的量取决于预期的DNA浓度)至离心吸附柱的膜的中央。
16.室温下放置至少2分钟。
17.12000～15000×g室温离心1分钟以洗脱DNA。
18. 如有必要，可以再加入适量DNA 洗脱液2.0洗出残留的DNA。第二次洗脱得到的DNA的产量约为第一次的30-50%。不要将已经洗脱的、含DNA的溶液再加上去。

关于柱式酵母质粒DNA提取试剂盒北京价格的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·Bradford法蛋白定量试剂盒
编号：BTN80814
英文名称：Bradford Protein Assay Kit
规格：100mL
Bradford法测定蛋白质浓度是最为常用的蛋白检测方法之一，在酸性条件下，考马斯亮蓝染料能与蛋白质结合形成复合物，其最大吸光值也由465nm转移到595nm，通过颜色的强弱测定蛋白质浓度的高低。本产品是基于Bradford法蛋白检测原理开发的产品。

产品特点：
1．快速，10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。
2．稳定，加样混匀后2分钟既可测定，1小时内吸光度变化不超过10%。
3．线性范围在 50～1000μg/mL。
4．最小测量体积为1-20μL，最低测量蛋白量为0.5μg。
5．即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
6．有常规和微量两种检测模式。
7．不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
8．但受略高浓度的表面活性剂影响，各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	100ml
BSA标准(2mg/mL)	1ml
滤纸	20张
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，BSA 标准-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一、常规检测流程：
此方法在蛋白浓度30-1000μg/mL范围内呈现R2 = 0.996的直线线性回归，可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1．制备 1×工作液。溶液A与无菌水按1：4 比例充分混合即为1×工作液(例：4mL溶液A+ 16mL 无菌水 = 20mL 1×工作液)。
2．滤纸过滤。过滤后的工作液室温条件下可稳定使用1-2 星期。
3．检测：蛋白样品与1×工作液按1：50 比例混合(例：100μl蛋白样品 + 5mL 1×工作液，适用于3mL的比色杯；40μl蛋白样品 + 2mL 1×工作液，适用于1mL的比色杯；20μl蛋白样品 + 1mL 1×工作液，适用于平底透明96孔板)。
4．加样后，充分混匀。
5．室温放置5分钟。
6．检测吸光度。波长设定 = 595nm。
注意事项：
1．不同型号、规格的滤纸，具有不同的孔径，导致可通过的分子各不相同。请使用本公司指定提供的滤纸，否则会导致不同的测定结果。
2．检测样品之前，应首先制备蛋白标准曲线。一般可使用BSA。
a)常规检测：建议使用下述浓度的BSA。
 0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量检测：建议使用下述浓度的BSA。
 0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3．检测细胞提取物或纯化蛋白样品，应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。
4．用 96孔板测定时，应确保没有气泡，否则会绝对增加吸光度的读数。
5．此检测试剂不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响。若SDS高于0.1%，TritonX-100高于0.1%，Tween20，60，80高于0.06%，可取少量样品加水稀释到适当浓度，再行测定。

二、微量检测流程：
此方法在蛋白浓度1～20μg/mL范围内呈现R2=0.992的直线线性回归，可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1．蛋白样品与溶液A按4:1比例混合，例：

蛋白样品	溶液A	适用性
400μL	100μL	平底透明96孔板
2mL	0.5mL	1mL的比色杯
4mL	1mL	3mL的比色杯

2．加样后，充分混匀。
3．室温放置5分钟。
4．检测吸光度。波长设定= 595nm。
注意事项：
1．Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS，Triton X-100，Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品，可用1MNaOH 溶解和稀释。
2．Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精*酸残基的数目，因此不同蛋白间测定的差异可能较大。
3．标准品曲线配制时，如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小，可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制，或者使用精确度高的加样枪。
4．由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候，颜色反应并不成比例增加，因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线，每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。
5．不像其它一些蛋白浓度测定方法(包括Lowry法)，Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%，Triton X-100低于0.125%，Tween 20低于0.06%，可以考虑用超纯水稀释，透析/除盐，ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。


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·Dicer(RNase III)
编号：BTN130676
规格：200U
Dicer(RNase III)能在含有锰离子的反应缓冲液中，将较长双链RNA切割成一组由18-25bp组成的小片段干扰RNA(siRNA)，更适合用于哺乳动物细胞的RNA干扰实验。用1.5个单位(1μl)的Dicer(RNase III)能够将1μg的dsRNA完全切割成siRNA，其反应图如下：


产品特点：
1．为RNA干扰研究提供siRNA；
2．基因沉默；
3．靶标确认；
4．去除dsRNA；
5．无核酸内切酶和外切酶污染。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期两年。

活性定义：1单位指50μl的反应体系中，37℃条件下，20分钟将1μg dsRNA切割成siRNA所需要的酶量。


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·DNA促旋酶
编号：BTN130651
英文名称：DNA Gyrase(E.coli)
规格：100U
DNA促旋酶(E.coli)是一种II型拓扑异构酶，在ATP存在下向DNA中引入负超螺旋。促旋酶全酶是由两个gyrA亚基(97 kDa)和两个gyrB(90kDa)亚基组成的异源四聚体。本产品主要用于向DNA引入负超螺旋。其反应原理图如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位是指在30μl反应体系中，37℃条件下，30分钟内催化超过95%的0.5μg底物转变为超螺旋质粒所需的酶量。DNA超螺旋化通过不含*化乙啶的琼脂糖凝胶电泳来检测。

热灭火：65℃加热20分钟。

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