柱式DNA清除剂哪里卖

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")柱式DNA清除剂哪里卖，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：柱式DNA清除剂哪里卖
品牌：百奥莱博
英文名：Column DNA Scavenger
产地：国产|进口
编号：BTN90318
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染，这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。

本产品是非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品，可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷，同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。

产品特点：
1. 操作更加简单快速，全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达80%以上。
3.高效，能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平，而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定，本产品为非酶产品，可以常温运输和4℃长期保存；而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高，单位成本远低于RNase-free DNase。

产品组成：

 

成分	规格
溶液A	2.5ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
RNA洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存。

使用方法：

1. 将50μl总RNA溶液与溶液A按1：1的比例混合，充分震荡半分钟。注意：RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M，如果RNA溶液的量不足50μl，最好加无RNase水补足到50μl以便后续操作。
2. 加入相当于RNA溶液和溶液A混合液总体积9倍体积的溶液B，颠倒数次充分混匀。注意：溶解溶液B沉淀。溶液B在4℃放置后可能会产生沉淀，使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中，室温12000rpm离心半分钟，弃穿透液。
4. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透液。
5.一次洗涤一般足够去除杂质。如果有必要，可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟并弃穿透液。一般情况，此步可以省略。
6. 加0.7mL溶液C到离心吸附柱中，12000rpm室温离心半分钟，弃穿透。
7.室温12000rpm离心半分钟。此步十分重要，否则会影响RNA的使用。
8. 将离心吸附柱转移到一个新的1.5mL离心管中，加入30-50μl RNA洗脱液，室温放置1-2分钟。室温12000rpm离心半分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

疑难解答：
Q：能否用本产品对同一样品进行反复处理？
A：可以。
Q：本产品跟DNA Scavenger-2(BTN70801)有何区别？
A：本产品为柱式升级产品，比DNA Scavenger-2更快速清除RNA样品中的DNA污染。

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·细胞核微量制备试剂盒
编号：BTN100601
英文名称：Nuclei Miniprep Kit
规格：50次
用高密度介质来分离动物软体组织(如肝脏、脾脏等)细胞核是目前主流的方法，它是由Chauveau于1956年发明，其原理是细胞核的密度较大，在高速离心条件下(40000g 1小时)可在高密度介质(2.2mol/l 蔗糖溶液)中沉降下来，从而达到与细胞质其它成分分开的目的。该方法能通过一步离心得到较高纯度的细胞核，得到广泛应用。本产品就是在Chauveau方法的基础上优化改进而来。

产品特点：
1．基于密度梯度分离，可有效去除细胞质及其他细胞器，得到的细胞核纯净。
2．加进*化*、*化*、*化*(代"*")等改变分离介质渗透压的物质，减少了细胞核的脆性，增加了细胞核的完整性。
3．精心调节了介质的pH，防止细胞核在分离过程中的聚集，还能保持细胞核的精细结构。
4．快速，整个操作过程仅需1小时即可完成(对一个样品而言)。
5．提供染色试剂，可以在普通光学显微镜下检测纯化的细胞核的纯度。
6．处理温和，得到的细胞核中的大部分蛋白质都具有活性，可以用于胶迟阻实验、酶活性分析细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究；也可用于超大片段DNA的纯化。
7．不但适用于动物和植物培养细胞，还能用于实体组织(能用Dounce或Potter 匀浆器匀浆的组织均可)。
8．一次微量提取足够处理0.1 克组织或10E7个培养细胞，本产品足够50次微量提取。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A成分一	100ml
溶液A成分二(干粉)	约20g
溶液B成分一	50ml
溶液B成分二(干粉)	约100g
细胞核染色液	1套
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、准备工作：先将溶液A的成分二(干粉)全部加入到溶液A成分一(溶液)中，摇晃溶解后得到100mL溶液A。将溶液B的成分二(干粉)全部加入到溶液B成分一(溶液)中，摇晃溶解后得到50mL溶液B。4℃放置不能超过2 天，长期放置需要放-20℃。

二、微量细胞核分离(放量提取各试剂的用量可以按比例放大)：
1．对组织细胞：称取100～200mg 新鲜组织(如动物肝脏、脑、心肌和植物叶片等)，用自备的PBS或生理盐水洗净血水，滤纸吸干，用剪刀或刀片将其剪为碎块(最好大小为1cm3，过小反而不利于匀浆)放入小容量Dounce或Potter 玻璃匀浆器内。
2．对培养细胞：用自备胰酶按标准方法消化培养细胞，PBS 洗涤，800×g 5～10分钟离心收集细胞，计数。每次微量提取需要5×10E7个细胞，加入1.0mL预冷的溶液A重悬细胞，然后转移到小容量Dounce或Potter 玻璃匀浆器内
3．用Dounce或Potter 组织匀浆器在冰上破碎组织或细胞。如果用手动匀浆器，一般需要20～30次。如果用电动匀浆器，一般需要处理3-5次，每次5～10秒钟(转速为500r/min)。
4．将匀浆液转移到离心管中。如果匀浆液有可见的结缔组织和未破碎的组织块，可以用三层自备的纱布放在1.5mL离心管管口，将匀浆液过滤进入离心管。可取少量滤液涂在载玻片上制得涂片A，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
5．4℃，700-800×g 水平离心5-10分钟。细胞核沉淀在收集管底部，弃上清。可取少量上清液涂在载玻片上制得涂片B，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
6．加入0.5mL预冷溶液A重悬沉淀。用预冷的匀浆器(用前需要将表面的组织洗去)重悬沉淀。可取少量上清液涂在载玻片上制得涂片C，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
7．在水平型离心管中加入0.5mL预冷的溶液B，然后靠管壁慢慢加入上步得到的重悬液。
8．在4℃ 23000g离心30分钟，管底的沉淀即为细胞核。
9．小心吸弃上清液。注意：上清一般比较粘稠，最好倒立一段时间。
10．用0.5mL溶液A重悬沉淀。
11．在4℃ 1500g离心5分钟，吸弃上清，沉淀即为纯净的细胞核。可以直接使用，也可以加等体积的自备甘油，混匀后放液氮或-70℃保存。可取少量上悬浮液涂在载玻片上制得涂片D，自然干燥涂片以便染色做显微镜观察。
12．用本方法一般可以从0.1g 肝脏组织中纯化到1-2×107个细胞核。如果后续试验是Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解细胞核后上样。

三、显微镜检测涂片，计算效率
1．将干燥后的A-D 四张涂片加入固定液固定15分钟，晾干。
2．Giemsa 染液染10分钟。
3．自备蒸馏水漂洗数秒，用滤纸吸干水。
4．用显微镜(40×)检查涂片，细胞核将呈紫红色，混杂的细胞质为浅蓝色碎片。根据每步细胞核的数量可以粗略估计回收效率。

疑难解答：
本说明书强烈建议用离心力g 而不是转速计算所需的离心速度，因为不同的离心机转子直径不同，即使是同一转速，其离心力也不同。如果只知道转速，可用下式计算离心力。
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以g(重力加速度)的倍数来表示；[rpm]２即转速的平方；
R为离心机转子的半径(单位为厘米)。


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BL1285 20×PBS, PH7.2-7.4,工作浓度0.01M
ARB11791 人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)酶联免疫定量检测 Human basic fibroblast growth factor,bfgf ELISA KIT
BTN3670 动物DNAOUT Animal DNAOUT
ARB10018 人28S抗核糖体抗体(28S rRNP)ELISA检测服务 Human 28s ribosome rnp antibody,28s rrnp ELISA KIT
BTN100103 裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 S.pombe Chemical Competent Cell Preparation Kit
ARB13280 小鼠颗粒酶B(Gzms-B)Elisa分析 Mouse granzymes b,gzms-b ELISA KIT
ARB13107 小鼠骨保护素(OPG)ELISA检测服务 Mouse osteoprotegerin,opg ELISA KIT
ARB12859 小鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)检测服务 Mouse secreted phospholipase a2,spla2 ELISA KIT
ARB12766 小鼠NA-K-ATP酶免费代测 Mouse na-k-atp ELISA KIT
BOC-N-β-Trityl-L-天门冬酰胺 Aminomethyl resin 132388-68-2
ARB14095 大鼠硫代巴比*(代"妥")酸反应物(TBARS)酶免分析 
PY02-231  嗜盐菌选择性琼脂  250克  
ARB11736 人登革热抗体(DF-Ab)ELISA检测服务 Human dengue fever antibody,df ELISA KIT
ARB13626 兔子神经特异性烯醇化酶(NSE)Elisa方法检测 Rabbit neuron-specific enolase,nse ELISA KIT
D-组*酸 D-Phenylalanine 351-50-8
ARB10677 人血管紧张素转化酶(ACE)ELISA代测服务 Human angiotensin converting enzyme,ace ELISA KIT
J0316                  山羊抗小鼠IgG(H+L)抗血清                       
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·大肠杆菌XL10-Gold化学感受态细胞
编号：BTN140431
英文名称：E.coli XL10-Gold Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌XL10菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本产品适用于高效的DNA克隆和质粒扩增，能保证高拷贝质粒的稳定复制，还适合非甲基化DNA的转化。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达108。本感受态细胞具有四环素和*霉素抗性。

菌株基因型：Tetr D(mcrA)183 D(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F- proAB lacIqZDM15 Tn10(Tetr)Amy Camr]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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