北京人甲基化/非甲基化DNA标准品多少钱

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京人甲基化/非甲基化DNA标准品多少钱，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京人甲基化/非甲基化DNA标准品多少钱
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
英文名：Human Methylated/Non-methylated DNA Standard
编号：BTN100936
规格：100次
甲基化专一PCR必须要使用甲基化的DNA做修饰和PCR的阳性对照，用非甲基化的DNA做修饰和PCR的阴性对照，否则无法判断样品是否甲基化。本产品通过nested WGA方法用人血液DNA 制备而得，主要用于检测和优化设计的甲基化引物。产品即开即用，非常方便。

产品组成：

 

成分	规格
人甲基化DNA(10ng/μL)	100μl
人非甲基化DNA(10ng/μL)	100μl
说明书	1份

储存条件：常温运输、-20℃保存、有效期一年。

自备试剂：超纯水、甲基化PCR引物。

使用方法：
取10-100ng 本产品作为甲基化PCR的模板。PCR 参数由客户根据引物，PCR区域长度等因素决定。
甲基化专一性PCR 条件(仅供参考)

成分	体积
PCR MagicMix 2.0	15μl
模板DNA(10ng/uL)(甲基化或非甲基化DNA)	1-10μl
自备甲基化PCR引物一	0.2-0.5μM(需优化)
自备甲基化PCR引物二	0.2-0.5μM(需优化)
超纯水	补水到30μL

PCR 参数需要用户自己根据引物和PCR产物的长度决定。

北京人甲基化/非甲基化DNA标准品多少钱正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·ABTS溶液(7mM)
编号：BTN131114
英文名称：ABTS Solution
规格：100mL
ABTS是一种水溶性HRP底物，在过氧化物酶的作用下产生绿色终产物。该绿色产物在410nm 及650nm具有两个主要吸收峰。在ELISA应用中，ABTS的灵敏度比OPD和TMB稍差。它会被缓慢氧化并显色(大约20分钟)。相对于OPD或TMB底物高灵敏度造成的不可接受的高背景，该性质可能是ABTS底物的优势。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期一年。

·大肠杆菌JM109感受态细胞
编号：BTN90207
英文名称：E.coli JM109 Chemical Competent Cell
规格：0.1mL*10
 本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

产品特点：
1. 使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. recA1和endA1突变阻止对克隆DNA的修饰或对宿主菌染色DNA的重组，提高纯化质粒的产量和质量。
3. JM109菌株基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB)[F’traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：无菌超纯水，SOB和SOC液体培养基，相关抗菌素。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。



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·溶菌酶溶液(10mg/mL)
编号：BTN100815
英文名称：Lysozyme Solution
规格：1.5mL
本产品是浓度分别为10mg/mL的蛋清型溶菌酶溶液，可以用于下列分子生物学实验。
➤ 核酸纯化；
➤ 包涵体蛋白纯化；
➤质粒DNA纯化；
➤ 几丁质的水解；
➤细胞壁的水解。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


·终点显色法内毒素定量试剂盒
编号：BTN120415
英文名称：Chromogenic End-point TAL Kit
规格：32次
鲎试剂为鲎科动物东方鲎(TAL)的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品，鲎试剂中含有Ｃ因子等跟凝血有关成分，当细菌内毒素激活C因子时会，起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的显色基质，使其分解为多肽和黄色的对硝基*(代"*")胺(pNA，λmax=405nm)。在一定时间内，pNA的生成量与细菌内毒素浓度成正相关，据此，可以通过测定样品405nm的光吸收来用外标准法定量样品的内毒素浓度。其原理图如下(TAL和图中LAL相同)：

本试剂盒就是基于上述原理开发而成，并进行了重大改进，增加了偶氮化试剂染色硝基*(代"*")胺(pNA)的步骤，此步使得反应的最终颜色变成玫瑰红色(λmax = 545nm)，避免了深颜色样品本身的颜色对405nm处吸收峰的干扰，结果更加准确可靠。

产品特点：
1.一站式，提供所需的试剂、内毒素对照和无热源的耗材，为用户省去繁琐的准备工作。
2. 灵敏度高，可以对浓度在0.1EU/mL-1EU/mL和在0.01EU/mL -0.1EU/mL两个浓度范围的内毒素样品进行定量。
3. 比经典的pNA法多一步偶氮化染色的步骤，处理样品的范围更广，结果更加稳定可靠。
4.样品中如含有β－葡聚糖，则需选用特异性显色基质鲎试剂盒，因为β－葡聚糖会产生G因子旁路反应，干扰内毒素检测。
5. 若样品含头孢类抗菌素或磺胺制剂，则需要选用不含偶氮化试剂的鲎试剂盒，因为上述成分也能跟本试剂盒中的偶氮染色剂发生偶联反应而干扰偶氮化显色。

试剂盒组成：

成分	规格
细菌内毒素标准品 15EU	2支
鲎试剂	2支×1.7mL
显色基质	2支×1.7mL
偶氮化试剂1	2支×10mL
偶氮化试剂2	2支×10mL
偶氮化试剂3	2支×10mL
HCl(反应终止剂)	50ml
细菌内毒素检查用水	50ml×2瓶
除热原试管，10×75mm	10×5支
除热原吸头，1ml	10×4支
除热原吸头，0.2ml	10×5支
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃避光保存，有效期两年。

使用方法：

一、样品的预处理
1.若样品的本底在545nm的吸光度值大于0.5，必须对样品进行稀释后再检测。
2.若样品颜色较深(例如溶血)，或在酸性条件下颜色加深(例如一些组织培养介质),必须设置样品空白管以扣除样品自身的颜色本底。样品空白管不加入鲎试剂，以等体积的细菌内毒素检查用水代替。其余操作同样品管。
3.本检测方法高度灵敏，故接触试剂及样品的所有器皿必须是除热原的。除热原指内毒素浓度小于0.005 EU/ml。玻璃器皿可经250℃干烤至少60分钟去除热原。实验过程应防止细菌的污染(内毒素即细菌的LPS)。
4.待测样品的pH值应在6.0–8.0之间，若超出此范围，需用自备的除热原的缓冲液、0.1M*氧化*或0.1M盐*(代"酸")调节。

二、试剂准备
5.细菌内毒素标准溶液配制(制备标准曲线用)：取细菌内毒素标准品1支，按细菌内毒素标准品使用说明(见附2)稀释为10EU/mL的内毒素溶液，再稀释为1.0EU/mL的内毒素溶液，最后按下表以1.0EU/mL的内毒素溶液为母液，在A-D四个离心管中稀释成0.1、0.25、0.5、1.0 EU/mL的浓度梯度。配制好的内毒素标准溶液应在4小时内用完。注意：也可以选择0.01、0.025、0.05、0.1EU/mL的浓度梯度。注意：标准品浓度范围不同，后续显色实验的保温时间也不同。

成份	A管	B管	C管	D管
细菌内毒素检查用水(mL)	0	0.5	0.75	0.9
1EU/ml内毒素溶液(mL)	1	0.5	0.25	0.1
内毒素浓度(EU/mL)	1	0.5	0.25	0.1

6.阴性对照用细菌内毒素检查用水。
7.配制鲎试剂、显色基质、偶氮化试剂等试剂的工作液。
(1)鲎试剂：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中，轻轻振摇使鲎试剂完全溶解，得鲎试剂工作液。注意不要用旋涡混匀剧烈振摇。鲎试剂工作液应在10分钟内用完。
(2)显色基质：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于显色基质中，轻轻振摇使显色基质完全溶解，得显色基质工作液。显色基质工作液可在无污染的条件下于4℃贮存8小时以内。
(3)偶氮化试剂1：按标签标示量加反应终止剂(注意：不是细菌内毒素检查用水)于偶氮化试剂1瓶中，得偶氮化试剂1工作液。
(4)偶氮化试剂2：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂2瓶中，得偶氮化试剂2工作液。
(5)偶氮化试剂3：按标签标示量加细菌内毒素检查用水于偶氮化试剂3瓶中，得偶氮化试剂3工作液。偶氮化试剂工作液可于4℃贮存1周。

三、实验操作
8.取本试剂盒提供的无热原试管6管，按下表操作(每加一个试剂均需要充分混匀，或用移液器轻柔吹打混匀):NC为阴性对照，PC为阳性对照。

成份	NC 1管	PC 4管	样品 1管
细菌内毒素检查用水(μL)	100	-	-
内毒素标准溶液(μL)(4种)	-	每种分别100	-
待测样品(μL)	-	-	100
鲎试剂工作液(μL)	100	100	100
混匀，37ºC温育T1分钟
显色基质溶液(μL)	100	100	100
混匀，37ºC温育T2分钟
偶氮化试剂1工作液(μL)	500	500	500
偶氮化试剂2工作液(μL)	500	500	500
偶氮化试剂3工作液(μL)	500	500	500
混匀,静置5分钟，于λ545nm测OD值

特别注意：每个批次的T1和T2不同。对本批次。

四、数据处理
9.建标准曲线：Y=bX + a，其中Y为545nm处吸光值，X为内毒素浓度，b为直线斜率，a为Y轴截距。
10.当实验数据同时满足如下三个条件时实验才有效：
(1)标准曲线的相关系数r≥0.980，
(2)标准曲线最低点的Y值大于阴性对照的Y值，
(3)待测样品平行管的平均值在标准曲线的区间内。

附1：待测样品的干扰实验
当样品中可能存在鲎实验的干扰物质时，须进行干扰实验。待测样品的干扰实验详见《中华人民共和国药典》2010细菌内毒素检查法》的“光度测定法干扰实验”。当鲎试剂、待测样品的来源、配方、生产工艺改变或实验环境中发生了任何有可能影响实验结果的变化时，须进行干扰实验，步骤如下:
1.选择标准曲线中点或一个靠近中点的内毒素浓度(设为λm)，作为待测样品干扰实验中添加的内毒素浓度，配制含λm内毒素的待测样品阳性对照，测量出该溶液的内毒素浓度,称为Cs；
2.测量出未添加外源内毒素的待测样品溶液内毒素浓度,称为Ct；
3.计算该实验条件下的回收率R＝(Cs–Ct)/λm×100%
4.当R在50%～200%之间，则认为在此实验条件下待测样品溶液不存在干扰作用。
5.当R在50%～200%之外，需对待测样品进行系列稀释(稀释倍数不得超过最大有效 稀释倍数MVD)或进行其它处理消除干扰,每一稀释溶液都重复步骤1-3,直到内毒素的回收率R在50%～200%之间。选择回收率R最接近100%的稀释倍数进行内毒素检测。

附2：细菌内毒素标准品使用说明
本品为白色疏松海绵状固体，系参照中国药品生物制品检定所的细菌内毒素工作标准品标定的大肠杆菌内毒素冻干品，供鲎实验中的鲎试剂灵敏度复核、干扰实验和各种阳性对照。其用法如下：
6.溶解：加入适量的细菌内毒素检查用水(BET水，最大加入量不得超过1mL),复溶后置涡旋混匀器上混匀15 min。
7.稀释：将上述内毒素溶液进一步用细菌内毒素检查用水稀释成各个不同浓度。每次稀释后必须在涡旋混匀器上混匀至少一分钟。每一步的稀释倍数均不得超过10倍。
8.本品为一次性使用。仅供体外鲎实验检测，禁止用于注射、口服等。
9.实验所用的器皿需经过处理，以除去可能存在的外源性内毒素，可以经250℃干烤至少60分钟处理，也可以采用其他确保不干扰细菌内毒素检测的适宜方法处理。实验操作过程中应该防止微生物的污染。
10.稀释的内毒素溶液静置时间超过10分钟，用前需要在涡旋混匀器上剧烈混匀1分钟，放置4小时以上的内毒素溶液应丢弃。


北京人甲基化/非甲基化DNA标准品多少钱关键词：BTN100936,Human Methylated/Non-methylated DNA Standard,人甲基化/非甲基化DNA标准品

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