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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输,4℃保存,保存期一年
- 保质期:
长期
- 英文名:
Trehalose Solution,PCR Grade
- 库存:
277
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
PCR级海藻糖溶液促销是高品质的核酸扩增(PCR)产品,由北京百奥莱博供应,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多PCR级海藻糖溶液等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。
名称:PCR级海藻糖溶液促销
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:BTN130506
英文名:Trehalose Solution,PCR Grade
规格:1.5mL
本产品为浓度为5M的海藻糖的水溶液,可以直接添加到PCR反应体系或逆转录反应中提高酶的热稳定性和活性。
产品特点:
1.在反应体系中加入海藻糖,可以增加热敏感的酶在高温下的稳定性和活性。
2. 海藻糖能增加鼠白血病病毒逆转录酶(Reverse Transcripatase)的热稳定和热激活特性,使其在60℃仍具有全部活性,足以在mRNA二级结构诱导终止反应之前合成全长的cDNA,反应效率大大提高。
3. 有助于提高干燥保存的酶的活性。
储存条件:低温运输,4℃保存,保存期一年
使用方法:按照1/3体积,将本产品加入到PCR体系中即可。
想要了解更多关于PCR级海藻糖溶液促销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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PCR级海藻糖溶液促销关键词:BTN130506,Trehalose Solution,PCR Grade,PCR级海藻糖溶液
·常态细胞转化液(免感受态细胞制备)
编号:BTN51101
英文名称:Tranzol
规格:20次
本品能使各种常态的E.coli细胞直接用于快速转化实验,使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备,保存和运输等繁琐的事情而操心,大大地缩短了基因克隆实验的时间,提高使用者的工作效率。
产品特点:
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。
2. 常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
3.适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli菌种包括K12 系的DH5a和Tg1,B 系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM,pET和Clion系列等。
4.转化效率适中,使用10ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在10E5 到10E6 CFU/ug质粒之间),使用3-5μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
5. 单管快速操作,整个操作可以在一个1.5mL塑料离心管中进行,最短可以在三十分钟内完成,不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
6. 稳定性好,本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
| 成分 | 规格 |
| 常态转化液 | 1ml |
| 阳性对照(pGEM3或pUC19)10μL,1ng/μL | 5T |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 标记无菌的1.5mL塑料离心管并加入1mL液体培养基(如SOC或LB),每次转化试验最好加上阳性对照(用提供的pGEM3或其他质粒)和阴性对照(不加DNA)各一个。
2. 如果使用E.coli菌落,则直接用接种环,无菌牙签或无菌吸头从培养皿上挑取1-5个菌落(直径在3-5 mm之间)到每个离心管中,用移液枪轻柔吹打散开。如果使用甘油菌种保存液,则直接取50-100μl菌种液到1mL培养液中。如果使用单个菌落培养得到的新鲜培养液,则取1mL培养了3-4小时的菌液直接从第4步开始。
3. 37℃保温1小时(如果保温时间延长到3-4小时,可以提高转化效率一倍,但过长则转化效率又开始降低)。
4.室温10000rpm离心1分钟后小心移弃上清(液体培养基),离心速度低于10000rpm则细菌沉淀易丢失。沉淀的细菌约芝麻或麦片大小为宜。细胞过多或过少都不好。
5. 短暂离心,用移液枪小心将残留的培养液(约50μl)吸出,否则残留培养基将会严重影响转化效率,故此步不能省略。
6. 加入50μl 冰浴的Clion转化液并小心将细胞吹打均匀。
7. 加DNA样品。在样品管中加入1-5μl连接反应液并轻柔吹打均匀;在阳性对照管中加入5 ng阳性质粒(没被酶切的载体,也可以使用常用的pGEM,pUC,pBR322等质粒);在阴性对照管中加入连接反应的阴性对照,如果没有则不加入任何溶液或加入1-5μl无菌水。
8. 将上述离心管置于-20℃直到液体凝固为止(一般需要20分钟到1小时),然后冰浴放置5-10分钟。
9.在每个离心管中加入1mL无抗菌素的SOC或LB培养液,混匀后置37℃水浴保温1小时以便让抗性基因表达,否则将没有转化子生长。
10. 将溶液充分吹打混匀后分别取30-200μl分别涂于含相关的抗菌素的培养盘上,剩余溶液最好留4℃待用。
11. 37℃ 16-24小时培养,阴性对照盘上不应有任何落菌,否则可以判断操作中有污染或培养基中抗菌素浓度不够。使用质粒转化的阳性对照100μl涂盘一般能有上千个菌落。连接样品转化所得菌落数将取决于连接反应效率等多种因素,100μl的涂盘一般有几十到几百个转化子。
使用效果:
左图是用10 ngClionG载体转化10个E.coli Tg1菌落后得到的转化子。右图是用3μL连接液(ClionB载体+1 Kb DNA片段,10μL反应体系)转化10个E.coli DE3菌落后37℃过夜保温得到的转化子。涂盘量均为200μL。
PCR级海藻糖溶液促销关键词:BTN130506,Trehalose Solution,PCR Grade,PCR级海藻糖溶液
·柱式真菌RNA提取试剂盒
编号:BTN80804
英文名称:Fungal RNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是在本公司真菌RNA提取试剂盒(BTN60305)基础上改进的柱式产品,跟真菌RNA提取试剂盒相比,它具有下列特点:
1. 柱式操作,更加简单快捷,整个过程只需要约30分钟。
2. RNA 纯度高,OD260/280一般都在2.0左右,可直接用于RT-PCR、Norther杂交、microarray hybridization、cDNA 合成等。
3. RNA产量高,一般在 20-70μg/mL 酵母培养物(约2.0 ×107个细胞)。
4. 非酶细胞破裂法,适用于各种形态和各个种属的真菌及革兰氏阳性细菌,包括 Candida albican、Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pombe 、 Pichia pastoris 、Bacillus subtilis、Staphylococcusaureus等。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 20ml |
| 溶液B | 25ml |
| 溶液C | 75ml |
| 溶液D | 25ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 将50mg左右的干菌丝(或100mg左右的鲜菌丝、或适当数量的真菌菌落)转移到 1.5mL塑料离心管中。如果是液体真菌培养物,则直接将1-10mL液体真菌在 1.5mL塑料离心管中 12000~15000g离心 1分钟,并弃尽液体培养基(可以分多次离心)。
2. 加入0.4mL溶液A 并充分吹打混匀。如果 A溶液存放时产生沉淀,请置于65℃融化,用前充分摇晃均匀。
3. 加入0.4mL溶液B,剧烈振荡 30秒。
4. 65℃保温 5分钟。
5.室温 12000~15000g离心 3~5分钟,转移上清到一干净的1.5mL塑料离心管中。
6. 再加入0.1mL溶液B和0.1mL自备*仿,振荡混匀 30秒。
7.室温 12000~15000g离心 3~5分钟,转移上清到一自备的、干净的5mL塑料离心管中。
8. 加入相当于上清 3倍体积的溶液C(约1.2-1.5mL)和1倍体积的溶液D(约0.4-0.5mL),充分混匀。
9. 将混合液(约2.5mL)分 3-4次转 移 到离 心 吸 附 柱中 。 每次13000-15000g室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
10. 用 0.5mL 通用洗柱液到离心吸附柱中,室温离心半分钟,弃收集管中的穿透液。
11.一次洗涤一般足够去除杂质。但如果样品 OD260/280 比值不高,可以再用 0.5mL 通用洗柱液重复此步一次。
12.室温离心半分钟。此步十分重要,否则残留的洗柱液会影响 RNA的使用。
13. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL RNA 洗脱液。
14.室温离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
15. RNA 完整性的电泳检测:
如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414 ,2000)。 如 果是简 单 检 测 ,可以使 用 TAE或SuperBuffer-2 DNA/RNA 两用快速电泳液,但文献报道必须使用变性上样液(BioTechniques,9:558,1990)。普通 DNA上样液不含变性剂,也没经过去 RNase处理,所以最好不要使用。 尤其需要注意的是不要使用 TBE进行 RNA电泳,因为TBE 所含硼*(代"酸")是研究多糖的经典方法----硼*(代"酸")络合法中的关键成分,硼*(代"酸")通过与RNA 核糖中的羟基发生络合反应,形成 RNA分子内或RNA分子间的络合复 合物,使同样长度的RNA 具有不同的泳动速度,电泳条带弥散,同时有大的RNA 络合复合物迟留在加样孔中(一般会误以为是基因组 DNA污染)。RNA分子内或RNA分子间的络合物的形成的多少和比例又与硼*(代"酸")与RNA的数量比例有关,而 RNA样品中污染的其他多糖也会参与此反 应,使硼*(代"酸")对 RNA电泳的影响更复杂,所以TBE 对 RNA电泳的影响 没有规律性和重复性。有的样品可以使用有的又不行,最好是避免使用。
16. RNA产量产率测定:
将5-10μL RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/细菌用量)。注意不要将RNA 稀释在 DEPC 水中检测 OD260和OD280,否则光吸收比在 TE中测得的低 10%-15%。
17. RNA 纯度测定:
无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),OD260/OD230一般在2.0-2.3 之间,如果低于或高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质或多糖的污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。蛋白质污染可以通过酚/*仿抽提一次然后酒精沉淀去除,DNA和多糖污染可以分别用我公司的DNA Scavenger和PS Scavenger 去除。测 OD时 RNA 不能过度稀释使 OD 读数低于仪器的有效范围。
疑难解答:
Q:为何从酵母中提取的总 RNA 有 3 条小带?
A:它们分别是70bp左右的tRNA,120bp左右的5S RNA,160bp左右的5.8 S RNA。
Q:上样孔里的红色荧光物一定是污染的基因组 DNA吗?
A:不是。用 TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳 RNA时容易产生此现象,百奥莱博初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA 通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用 TBE作电泳液的话)形成的复合物加 RNase处理后,这些红色荧光物一般会消失。为避免此现象,建议最好使用甲醛变性胶电泳。如果需要使用非变性胶,也必须在上样前使 RNA变性。使用百奥莱博优化的上样/变性/染色三用溶液 RNAload可以使 RNA在非变性胶上电泳时也有较好分辨率。使用非变性胶时,可以使用 TAE或超快电泳液 SuperBuffer-2,最好不要使用 TBE缓冲液,因为TBE中的硼*(代"酸")能与RNA的多羟基形成复合物,RNA 很难形成锐利的条带。
Q:如何确认和去处除污染的基因组 DNA?
A:如果怀疑有 DNA污染,可以用 RNase处理 RNA样品,然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失,则表示是基因组 DNA污染。进一步确认可以使用 PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA 去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase,由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染,所以必须严格按照厂家提供的使用手册进行操作。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购PCR级海藻糖溶液促销。
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文献和实验由二分子的单糖通过糖苷键形成,在一种单糖的还原基团和另一种糖的醇羟基相结合的情况下,显示出与单糖的共同化学性质,诸如还原于Fehling溶液、变旋光化、脎形成等(如麦芽糖、乳糖),通过还原基结合的单糖则无这种性质(如蔗糖、海藻糖)。天然存在的游离态和具有机能的糖类以哺乳类的乳糖、细菌和昆虫血液等的海藻糖、植物的蔗糖为代表。这些是作为各种生物体的能量来源,或者作为生物体组成的物质原料,承担着所必需的糖类的贮藏或运输的重要作用。一方面分别可由各种特异的转葡萄糖苷酶的作用以对应的糖核苷所合成
离心吸附后再洗涤。注意的是紫外照射时间不要太长,因为紫外线对DNA (特别是对于较大的片段)有影响。还有就是溶胶要彻底,用枪头把胶块弄碎一点有助于50度下快速溶解。溶解完全后溶液的颜色指示溶液的pH值,如果变色需要调pH值以防止实验失败。需要用ddH2O或者TE洗脱的,注意pH在7.0―8.5之间的回收率最高。回收率和片断大小、多少有关,较大的片断(7kb以上)回收率会有所降低,洗脱液预热到50度再加入纯化柱膜中央,有助于提高产率。 除了比较适合个人使用的传统离心式,Qiagen还提供抽滤式的胶
合适的支持剂,可以制备出稳定性好、包裹率高的脂质体前体。结论:对脂质体前体的进一步研究有一定的意义。 近年来,脂质体做为药物载体已被广泛研究,一部分工作已达到了临床应用阶段[1]。脂质体能够适用临床,必须达到如下要求:具有较高的包裹率;完全除去所含有机溶剂;能够经受灭菌;制备方法适合工业生产。目前,脂质体的制备方法主要有醚注入法、逆向蒸发法、薄膜法等[2],研究者们对这些方法都进行了各方面的研究,但是脂质体在溶液状态下仍存在着一些问题,脂质体分散系的不稳定性:如药物的渗漏、粒子的聚集
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