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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
一年
- 英文名:
DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
- 库存:
894
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)大量库存促销的品牌:百奥莱博,是优质的细胞凋亡与增殖产品,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)等细胞凋亡与增殖产品请联系我司咨询订购。
名称:细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)大量库存促销
产地:国产|进口
编号:YT121
英文名:DNA Ladder Extraction Kit with Spin Column
品牌:百奥莱博
本试剂盒是目前最先进的DNA Ladder抽提试剂盒之一。本试剂盒是针对细胞凋亡过程中产生的核小体间DNA链断裂而设计的。可以非常有效地抽提最小片段为180-200bp的DNA ladder,同时又可以抽提到最大50kb左右的基因组DNA。本试剂盒可以抽提50个样品。
DNA ladder也称DNA fragmentation,是细胞凋亡的一个重要指标。通常观察到DNA ladder,就可以判定细胞发生了凋亡。
样品首先被蛋白酶K消化,随后加入适合DNA结合到纯化柱上的缓冲液,然后加入到纯化柱内。通过高速离心,使DNA在穿过纯化柱的瞬间,结合到纯化柱上,随后通过两次洗涤去除各种杂质,最后通过洗脱液把DNA洗脱下来。整个过程无需酚*仿抽提,无需酒精沉淀,样品裂解后仅需约15分钟即可完成。
通过DNA纯化柱方式抽提DNA ladder比用传统的酚*仿抽提酒精沉淀方法更加便捷,小片段DNA不容易损失。试剂盒提供了RNase A,可以获得不含RNA的高纯度总DNA,排除了RNA对DNA ladder观察造成的干扰。
本试剂盒每次最多可以抽提20mg组织或200-350万个培养细胞。样品用量过多,反而会影响抽提效果。纯化柱对于DNA的最大容量约为30微克。通常每200万Hela细胞或500万淋巴细胞可以抽提得到15-25微克总DNA,每25mg肝、脑、肾组织可以抽提得到10-30微克总DNA,每25毫克心、肺组织可以抽提得到5-10微克总DNA,每10mg脾组织可以抽提得到5-30微克总DNA。样品的用量请勿超过纯化柱的容量,样品用量最好能保持在纯化柱容量的70%或以下。当然过少的样品也不利于检测到DNA ladder。
对于培养细胞的凋亡检测,通常6孔板一个孔的细胞就足够用于DNA ladder的抽提和检测。
试剂盒组份:
样品裂解液A——————10ml
样品裂解液B——————11ml
洗涤液I——————21ml(第一次使用前加入7ml无水乙醇)
洗涤液II——————16ml (第一次使用前加入24ml无水乙醇)
洗脱液——————22ml
蛋白酶K——————1.1ml
RNase A——————220μl
DNA纯化柱及废液收集管——————50套
注意事项:
1. 温度较低时样品裂解液A或样品裂解液B中可能会有沉淀产生,属正常现象。使用前必须检查一遍。如有沉淀,55℃水浴孵育使沉淀溶解,混匀后使用。
2. 第一次使用前洗涤液I需添加7ml无水乙醇,洗涤液II需添加24ml无水乙醇,混匀,并在瓶上做好标记。
3. 本试剂盒需使用55℃或70℃水浴,请提前作好准备。
4. 除特别说明外,每次Vortex应控制在5-10秒左右。
5. 本试剂盒所有操作均在室温进行,操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
6. 废液收集管在一次抽提中需多次使用,切勿中途丢弃。
储存条件:室温,有效期一年。( 蛋白酶K需-20℃保存)
关于细胞凋亡DNA Ladder提取试剂盒(柱式吸附)大量库存促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·细胞膜红色荧光探针(DiI)
编号:YT173
英文名称:DiIC18(3)
规格:10mg
本探针是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。DiI是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。其中,最大激发波长为549nm,最大发射波长为565nm。

分子式:C59H97ClN2O4
分子量:933.88
CAS:41085-99-8。
DiI可以溶解于无水乙醇、DMSO和DMF,溶解度约为1-2.5mg/ml。发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
DiI被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。DiI通常不会影响细胞的生存力。被DiI标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。DiI在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day。
DiI除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
用于细胞膜荧光标记时,DiI的常用浓度为1-25μM,最常用的浓度为5-10μM。DiI可以直接染色活的细胞或组织,染色时间通常为5-20分钟。对于固定的细胞或组织,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚甲醛进行固定,使用其它不适当的固定液会导致荧光背景较高。
注意事项:荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
储存条件:4℃避光,有效期一年。
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·DNA交联剂/细胞凋亡诱导剂(Cisplatin)(顺铂)
编号:YT322
英文名称:cisplatinum;CPDC
规格:50mg
本品是一种DNA交联剂和细胞凋亡诱导剂,常用作抗肿瘤药物。Cisplatin为重金属铂的络合物,作用类似烷化剂,主要作用靶点为DNA,可以促进DNA链内及链间交联(主要为链内交联),导致DNA损伤,并激活DNA修复途径,当DNA不能被修复时就导致了细胞凋亡。Cisplatin属周期非特异性抗肿瘤药物。
CAS:15663-27-1
分子式:Pt(NH3)2Cl2
分子量:300.05
纯度:>99%
注意事项:配制成的母液需-20℃避光保存,母液保存时间不宜超过2周。
储存条件:-20℃。
·头孢菌素C脱乙酰酶
编号:YT578
英文名称:Cephalosporin-C Deacetylase (Crude Enzyme)
规格:100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的头孢菌素C脱乙酰酶,并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液,用于催化头孢菌素3位脱乙酰水解反应。
CAS:52227-71-1
外观:半透明黄色溶液
酶促反应:cephalosporin C + H2O = deacetylcephalosporin C + acetate
储存条件:-20℃,有效期1个月。
注意事项:
1. 由于本产品需新鲜制备,在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活,所以收到酶液后请根据需要进行分装,并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长,酶活力会有一定程度的下降,收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生,融化后混匀即可,不影响正常使用。
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·Cyclin D1抗体
编号:YT666
英文名称:anti-Cyclin D1 antibody
规格:>20次
本抗体是用重组的人Cyclin D1的一段多肽(151-170位*基酸)作为抗原制备而成的抗Cyclin D1小鼠单克隆抗体,本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Cyclin D1抗体特异识别总Cyclin D1(total Cyclin D1),并能检测细胞内源性的Cyclin D1,未发现和cyclin D2或cyclin D3.有交叉反应。
Cyclin是调节细胞周期活动的重要蛋白,在细胞增殖和肿瘤发生中具有重要作用。目前已经发现cyclin包括cyclin A-L、O、
T、Y共15类,29种。通常cyclin都可以和Cdk相结合,但也有未发现其结合的Cdk的cyclin F。不同的cyclin在不同的时相通过相应的Cdk调控细胞周期。Cyclin和CDK(Cyclin-dependent kinase)和一起调控细胞周期中一些关键蛋白的磷酸化,从而调控细胞周期进程。CDK的激酶活性受其T-loop的磷酸化、cyclin、以及Cip/Kip或INK等CDK抑制蛋白的调控。无活性的CDK4/cyclin D和p27/Cip1形成的四聚复合物在有丝分裂信号的刺激下,会导致p27的释放和降解。处于活化状态的CDK4/cyclin D可以磷酸化Rb蛋白(retinoblastoma protein),导致转录因子E2F的释放,并激活G1/S期基因的表达。CKD6也可以和cyclin D形成复合物,可以磷酸化Rb蛋白(retinoblastoma protein),促进G1/S期转换的发生。当与CDK抑制剂INK4结合后,CDK6/cyclin D复合物失活。CDK抑制剂P21 Waf1/Cip1会增强CDK6与cyclin D的相互作用。Cyclin D包括D1、D2和D3,均可以和CDK4和CDK6形成复合物,调控G1/S期的转换。生长因子移除时,cyclin D会通过磷酸化依赖的降解途径被下调。Cyclin D1被认为是一种原癌基因,在人类多种肿瘤组织中高表达或有突变。
组份:
Cyclin D1抗体————100μl
Western一抗稀释液————20ml
免疫原种属:人
免疫原:重组的人Cyclin D1的一段多肽(151-170位*基酸)
克隆性:单克隆抗体
宿主:小鼠
用途:WB,IP,IF
交叉反应性:人,小鼠,大鼠
同种型:IgG2a
Cyclin D1分子量:~36kD
推荐稀释比例:WB(1:200),IP(1:10-20),IF(1:50-100)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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