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-20℃
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长期
- 英文名:
Rb-luc Reporter gene plasmid
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581
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)哪里买
产地:国产|进口
编号:YT454
规格:1μg
Rb报告基因质粒是用于检测Rb(retinoblastoma protein)转录抑制活性水平的报告基因质粒。Rb质粒是以pGL6-TA质粒为模板,在其多克隆位点插入了多个Rb结合位点,可以高灵敏度地检测Rb的转录抑制活性水平。Rb可以和E2F等转录因子结合,抑制这些转录因子的激活,抑制细胞周期的进展。Rb同时也可以作为一个抑制性转录因子直接结合到其响应的顺式作用元件,抑制该基因的转录。
pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
Rb质粒的主要信息如下:
| Base pairs | 5677 |
| Rb response element | 32-91 |
| Minimal TA promoter (pTA) | 114-136 |
| luc2 reporter gene | 178-1830 |
| SV40 late poly(A) signal | 1865-2086 |
| SV40 early enhancer/promoter | 2134-2552 |
| Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region | 2577-3371 |
| Synthetic poly(A) signal | 3396-3444 |
| Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region | 3511-3530 |
| ColE1-derived plasmid replication origin | 3768 |
| Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region | 4559-5419 |
| Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site | 5524-5677 |
| Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region | 5626-5645 |
Rb质粒的图谱如下:
使用说明:
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
2. Rb质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT273)。
储存条件:-20℃。
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·总SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
编号:YT309
英文名称:Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8
规格:100次
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
试剂盒组分:
SOD检测缓冲液——————70ml
WST-8——————————800μl
酶溶液——————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化*(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到100%等,从而使检测的灵敏度和精确度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。
基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,最大抑制百分率可以接近100%,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化*的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化*,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化*酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化*的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化*时,对于检测结果仍无显著影响。
注意事项:
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
储存条件:-20℃,有效期6个月。
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文献和实验conjugation)和Ori区(origin of replication)T-DNA 上共有三套基因和左右两个边界,LB和RB是长为25bp的末端反复重复顺序,在切除及整合过程具有重要意义。 tms由两个成:tms1(iaaM)和tms2(iaaH) tmr由一个成iptz: tmt由若干基因构成,合成稀有氨基酸衍生物,称为opines。它有三个成员: octopine=精氨酸与丙酮酸的缩合物 Napaline=精氨酸与-酮戊二酸的缩合物 Agropine=谷氨酸与二环糖的缩合物 据此可将Ti质粒
我就没有继续做相应抑癌基因的意义啦??2.要检测抑癌基因对这个通路的影响,是不是应该构建该抑癌基因的表达载体后和TOPflash质粒及PRL-TK共同转染于一个细胞中,观察比较与空载体及TOPflash,PRL-TK共转染细胞的相对荧光值?? 3.表达载体转染细胞后,是否还应该western检测c-myc等表达情况比较好?? 4.检测这个双报告基因表达,需用的仪器是叫超灵敏管式发光仪吗?北京都有那些实验室有啊?有商业化做双报告基因表达检测的吗 圈子圈套
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