Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)

特别提示：包括Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒)
英文名称：Rb-luc Reporter gene plasmid
产品货号：YT454
产品规格：1μg

Rb报告基因质粒是用于检测Rb(retinoblastoma protein)转录抑制活性水平的报告基因质粒。Rb质粒是以pGL6-TA质粒为模板，在其多克隆位点插入了多个Rb结合位点，可以高灵敏度地检测Rb的转录抑制活性水平。Rb可以和E2F等转录因子结合，抑制这些转录因子的激活，抑制细胞周期的进展。Rb同时也可以作为一个抑制性转录因子直接结合到其响应的顺式作用元件，抑制该基因的转录。

pGL6-TA质粒是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进，一方面对于luciferase的编码进行了改进，确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达，同时对整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理，在保持原有功能不变的情况下，使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。

Rb质粒的主要信息如下：
 

Base pairs	5677
Rb response element	32-91
Minimal TA promoter (pTA)	114-136
luc2 reporter gene	178-1830
SV40 late poly(A) signal	1865-2086
SV40 early enhancer/promoter	2134-2552
Synthetic neomycin phosphotransferase(Neor) coding region	2577-3371
Synthetic poly(A) signal	3396-3444
Reporter Vector primer 4 (RVprimer4) binding region	3511-3530
ColE1-derived plasmid replication origin	3768
Synthetic Beta-lactamase (Ampr) coding region	4559-5419
Synthetic poly(A) signal/transcriptional pause site	5524-5677
Reporter Vector primer 3 (RVprimer3) binding region	5626-5645

Rb质粒的图谱如下：



使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. Rb质粒可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(YT271)或双萤光素酶报告基因检测试剂盒（YT273）。

储存条件：-20℃。

除了Rb荧光素酶报告基因质粒(Rb抑癌基因质粒),，我公司还供应以下相关产品：



名称：即用型蓝白T载体C型(T7-T3，无MCS)
货号：BTN120513
规格：20次
本产品是用Xcm I酶切线性化的DNA片段，其两个末端的5′都有一个突出的T，可以用于快速克隆具有加尾活性的耐热酶(如Taq DNA聚合酶)扩增得到的PCR片段。

产品特点：
1. 由于是通过酶切制备，所以载体两端的带T率为100%，远高于用Taq DNA聚合酶和TdT末端转移酶在平末端载体加尾得到的T载体。
2. 克隆的阳性率一般在90%以上，缩短了筛选过程。
3. 无Nde I和Nco I等多克隆位点，便于重组基因的克隆
4. 来源于pBlueSoript Ⅱsk(+)，故克隆位点两侧分别有T7和T3 RNA聚合酶启动子，便于用克隆的PCR片段制备RNA探针。
5.可以使用pUC/M13 Forward和Reverse测序引物测定插入片段的序列。
6. T克隆位点位于β-半乳糖苷酶的α肽编码区内，可以进行蓝白斑筛选。
7.含有丝状噬菌体f1复制起始子，可以制备单链DNA。

产品组成：

组分	规格
即用型蓝白T载体C型(10ng/μL)	60μl
阳性对照(35ng/μl)	30μl

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期两年。

质粒图谱


名称：IPTG溶液
货号：BTN80909
规格：1.5mL
本产品为浓度为200mg/mL的无色液体。IPTG是β-半乳糖苷酶的活性诱导物质。基于这个特性，当pUC系列的载体DNA(或其他带有lacZ基因载体DNA)以lacZ缺失细胞为宿主进行转化时，或用M13噬菌体的载体DNA进行转染时，如果在平板培养基中加入X-Gal和IPTG，由于β-半乳糖苷酶的α-互补性，可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。

储存条件：低温运输、-20℃保存、有效期一年。

名称：感受态细胞快速制备试剂盒
货号：YT022
规格：200次
本试剂盒是一种用于大肠杆菌感受态细菌快速制备的试剂盒。一步法感受态细菌制备试剂盒是在经典的TSS法的基础上进行适当改良而成，既继承了TSS法的快速和简便，又在此基础上提高了感受态细菌的转化效率和易操作性。使用本试剂盒可以使感受态效率达到106以上。不仅可以转化质粒，而且可以转化普通的连接产物。另外，对细菌的培养条件要求比较宽松，培养的细菌只要处于对数期内就可以使用本试剂盒制备感受态细菌。

使用本试剂盒操作非常简单，细菌培养好后仅需十几分钟就可以完成感受态细菌的制备。本试剂盒适用于绝大部分常见的大肠杆菌，包括DH5α、JM109、TG1、HB101和XL-1等。对于一些用于蛋白表达或病毒质粒构建的特殊大肠杆菌也适用，制备出来的感受态菌转化质粒肯定没有问题，但如果转化连接产物有时效果不如DH5α等其它常见的细菌。本试剂盒提供了DH5α甘油菌作为菌种，可以用于制备感受态细菌。本试剂盒可以分多次使用，共可以制备足够进行200-400次转化的感受态细菌。

注意事项：
1. 需自行配制LB液体培养基和LB平板以用于细菌的培养和感受态效率的检测。
2. 尽管经过我们的测试凡是处于对数期内的细菌都可以用于感受态细菌的制备，但如果细菌生长的OD600的值达到0.3-0.5左右时，制备出来的感受态效果最佳。
3. 在制备感受态细菌的过程中均使用不含抗生素的LB。在使用感受态菌的过程中热休克后的37℃培养时也必须使用无抗生素的LB，即便转入的质粒是有抗性的。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：Easy Cloning T载体(pEC-T)
货号：JN0103
规格：20次
  本品是一种PCR产物高效TA克隆的专用T载体。 它由pBluescript II KS载体改造而成：保留了pBluescript II KS载 体全部的酶切位点；PCR产物插入位点处于多克隆酶切位点的中间，其两侧都有众多的酶切位点可供选择。由于本载体以pBluescript II KS 载体为基础构建而成，所以它具有同pBluescript II KS载体相同的功能：PCR产物插入后可以利用a-互补性进行蓝白斑筛选，挑选阳性克隆。可以用M13通用引物和T7，T3启动子引物对PCR产物进行测序。含有T7及T3 RNA聚合酶的启动子，可以对插入片段进行体外转录。

产品组成：

组份	规格
pEC-T vector（25 ng/μl）	100μl
T4 DNA Ligase	30ul
2×Quick Ligation Buffer	500ul
10×Ligation Buffer	500ul
Control Insert（50 ng/μl）	10ul
附赠
2×Taq MasterMix (快速上样型)	1ml×2
2×Fast Taq MasterMix (快速上样型)	1ml
DNA Ladder 2000 Plus	100ul

产品特点：
1、15分钟快速连接：
· 随酶提供独特配方的2×快速及10×普通T4 DNA Ligation Buffer。
· 使用2×快速Buffer在室温(25℃)下，仅需15分钟即可完成连接反应。
2、自带超快PCR鉴定2×Fast Taq MasterMix及DNA Marker：
2×Fast Taq MasterMix (Quick Load型)已含有PCR反应所需的快速型PCR聚合 酶、dNTP混合物、MgCl2、上样染料以及反应缓冲液预先，使用时只需再加入 模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应。其扩增速度为普通Taq酶的数 倍，因此可大幅度缩短PCR鉴定过程所需要的时间， 试剂盒自带预混1×Loading Buffer的DNA Ladder 2000 Plus，能满足绝大部分PCR产物电泳的需要。




质量控制：
· Control Insert克隆后的白色菌落中，有90%以上 含有Insert DNA片段。
· Control Insert经克隆后，经测序确认“T”突出的存在。