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- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
2-8℃保存
- 保质期:
有效期3年
- 英文名:
DEPC
- 库存:
大量
- 供应商:
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- CAS号:
1609-47-8
- 规格:
25 ml(10602ES25)
产品描述:
DEPC是一种高效烷化剂,通过和RNase的活性基团组氨酸的咪唑环结合使蛋白质变性,从而抑制酶的活性。可以用作抗菌添加剂、组氨酸残基改性剂,以及用于亚胺转变为氨基甲酸酯的试剂。
在溶液中浓度约为 0.1% (v/v) 时可使 RNase 失活,从而防止RNA被降解。
产品特色:
| 英文名称(English Synonym) | DEPC, DEP, Pyrocarbonic Acid Diethylester, Diethyl Oxydiformate, dicarbonic acid diethylester | ||
| 中文名称(Chinese Synonym) | 焦炭酸二乙酯,氧二甲酸二乙酯,重碳酸二乙酯 | ||
| CAS号(CAS NO.) | 1609‑47‑8 | ||
| 分子式(Molecular Fomular) | C₆H₁₀O₅ | ||
| 分子量(Molecular Weight) | 162.1 g/mol | ||
| 密度(Density) | 1.12 g/mL | ||
| 结构式(Structure) | ![]() | ||
储存条件:
冰袋运输。2-8℃保存,有效期3年。
常见问题:
Q:如何从磁珠的外观区分磁珠是否正常?
A:正常磁珠静置时,微珠与buffer 分层,聚集在瓶身底部,使用前震荡混匀,微珠均匀分布在buffer 中。非正常磁珠由于 β-巯基乙醇、DTT、pH 差值大等因素,影响磁珠的均一性,使得磁珠粘稠,聚集成块或出现挂壁的现象。
Q:磁珠未开封的时候 4℃保存,开封后一直室温保存使用,是否会影响磁珠的回收性能?
A:室温放置对磁珠的回收性能会有一定影响,不建议室温放置太久,使用完后建议 4℃保存。PEG 分离效果易受pH、温度等影响。
Q:RNA 磁珠的用途?
A:12602:RNA 纯化磁珠;12603:真核生物完整 mRNA 抓取磁珠
Q:磁珠沉淀可能是什么原因?
A:1)样本:样本中含高糖或者高蛋白;样本buffer 和磁珠 buffer 冲突;
2)磁珠:磁珠 buffer 被污染
3)操作:干燥时间太长(一般不宜超过 5 min)
Q:磁珠可以重复使用吗?
A:产品不可以重复使用,乙醇洗脱步骤将影响磁珠表面活性基团性能。
Q:可以用DNA纯化磁珠代替RNA纯化磁珠吗?
A:不建议,DNA磁珠纯化RNA可能造成RNA降解。RNA磁珠中的体系更有利于维持RNA结构的稳定,防止其降解。
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文献和实验量成正比。 判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱 应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带,且28s rRNA的亮度应为18s rRNA的两倍。 三、材料、试剂及器具 1、 材料 总RNA提取 物。 2、 试剂 (1)0.1%DEPC水:200ml双蒸去离子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混匀,室温放置过夜,高压灭菌。 (2)10x电泳
实验基本原理RNA可以使用非变性或变性凝胶电泳进行检测。在非变性电泳中,可以分离混合物中不同分子量的RNA分子,凡是无法确定分子量。只有在变性情况下,RNA分子完全伸展,其泳动率才与分子量成正比。判断RNA提取物的完整性是进行电泳的主要目的之一。完整的未降解的RNA制品的电泳图谱应可清晰看到18s rRNA、28s rRNA、5s rRNA的三条带,且28s rRNA的亮度应为18s rRNA的两倍。实验试剂1、0.1%DEPC水:200ml双蒸去离子水加0.2mlDEPC焦炭酸、二乙酯混匀
等在高压下蒸汽灭菌15min(1.034 X 105 Pa) 2. 焦碳酸二乙酯(DEPC)抑制法:DEPC是RNA酶的强烈抑制剂,塑料或玻璃器皿在含0.1%的DEPC溶液中浸泡2h,然后以灭菌水淋洗数次,在100 ºC下干烤15min。 3. RNA酶抑制剂法:利用RNA酶蛋白质抑制剂与RNA酶紧密结合防止其发挥酶活作用;利用氧钒核糖核苷复合物与RNA酶结合;利用硅藻土吸附RNA酶。 一、细菌RNA的制备 1.菌体培养 同上
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10602-DEPC焦炭酸二乙酯 烷化剂 酶活抑制剂.pdf 附 (下载 0 次)
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