肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(E

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博致力于最快速、最有效的检测产品，包括肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)现货在内的细菌PCR检测试剂盒产品是我公司倾力打造的优势产品，欢迎选购。

名称：肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)现货
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：48次/盒
编号：SYA089

除肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)现货外，我公司正在打折促销以下产品：

·大豆特异性基因Lectin单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA274
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
本试剂盒适用于检测植物中特异性基因Lectin，用于筛查待检测植物中是否含有Lectin基因片段DNA成分。其检测结果仅供参考。

本试剂盒用一对大豆特异性基因Lectin特异性引物，结合一条特异性荧光探针，用荧光PCR技术进行大豆特异性基因Lectin的检测。

试剂盒组成：

 

组份	数量	规格
Lectin反应液(Lectin-qPCR MIX)	1管	672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX)	1管	48μL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
Lectin阳性对照(Lectin-PTC)	1管	50μL/管

储存条件：-20℃，应避免反复冻融，有效期12个月。

使用方法：

一、样品采集及处理：
➤适用标本类型：植物组织及其加工制品。
➤样本采集：称取200g样品。

二、DNA提取：
样品需用粉碎机或冷冻研磨仪研磨至细粉末状。
用户可采用SN/T2584-2010中推荐的方法提取DNA，也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的植物基因组DNA提取试剂盒(过柱法)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

三、检测步骤：
1．PCR扩增
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(Lectin-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
荧光PCR反应液	14µL	N×14µL
酶混合物	1 µL	N×1µL
总量	15µL	N×15µL

计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(Lectin -PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
2．qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

	1循环	50℃ for 2 min
预变性	1循环	95℃ for 10 min
PCR扩增	40循环	95℃ for 15 sec 60℃ for 60 sec

在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

四、结果分析：
1．结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
2．试验成立判定
➤阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
➤阳性对照(Lectin -PTC)：均产生扩增曲线。
➤以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
3．结果判定
➤在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明Lectin核酸阳性。
➤Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明Lectin核酸阴性。
➤如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
➤对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行Lectin qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明Lectin核酸阳性；否则判为样本阴性。

五、注意事项：
➤初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
➤所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。
➤PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
➤样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
➤试剂盒里所有物品应视为污染物对待，按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)现货关键词：LT,百奥莱博,SYA089,ETEC,肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)

BL0886 兔抗马IgG免疫血清 0.5ml
ARB11285 人*卫蛋白(cAlproteIn)elisa检测 
*化钕 2,4,6-Trimethyl benzoyldiphenyl phosphine oxide 10024-93-8
50-76-*(代"0") 放线菌*(代"素")D Actinomycin D
SJ0567 Sulfo-NHS N-羟基硫代琥珀酰亚胺
ARB14131 人磷酸化磷酸肌醇3激酶(P-PI3K)酶免分析 
ARB12408 大鼠组织蛋白去乙酰化酶(HD)酶标法分析 Rat Histone deacetylase,hd ELISA KIT
ARB13414 鸡8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)Elisa分析 Chicken  8-hydroxy-desoxyguanosine,8-ohdg ELISA KIT
BTN130587 小鼠抗E2标签单抗 Anti E2-Tag Mouse Mab
ARB10743 人纤溶酶原(Plg)ELISA检测服务 Human plasminogen,plg ELISA KIT
3-*丙胺*化* Fmoc-Gly-OH 5003-71-4
ARB14161 植物细胞分裂素(CYT)酶免分析 
N-苄基甘*酸乙酯 Monensin sodiu*(代"m") 6436-90-4
ARB12760 小鼠FMS样酪*酸激酶3(Flt3)elisa检测操作说明书 Mouse fms-like tyrosine kinase 3,flt3 ELISA KIT
离子交换剂Ⅴ Zearalanone
BTN80403 RNase-free水 RNase-free Water
HC0163 双面离心管架
BL1319 4×dNTPs(100mM)
PY02-004  虎红琼脂  250克  
SJ0197 DEAE Sepharose CL-6B
BTN120674 酪蛋白 Casein
肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)现货关键词：LT,百奥莱博,SYA089,ETEC,肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)


·新疆出血热病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA243
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·乙型流感病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA163
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·登革热病毒通用单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA224
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·玉米转基因MON810单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA281
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·EB病毒单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA144
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·鸡肠炎沙门氏菌(SPP.E)单重凝胶PCR检测试剂盒
编号：SYA544
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·口蹄疫A型(FMDV-A)单重荧光PCR检测试剂盒
编号：SYA477
等级：科研实验专用
规格：48次/盒

·金黄色葡萄球菌肠毒素B单重荧光PCR检测试剂盒（定性/定量）
编号：SYA041
等级：科研实验专用
规格：48次/盒
一、简介：
本试剂盒用一对金黄色葡萄球菌肠毒素B特异性引物，对金黄色葡萄球菌肠毒素B DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于检测水样粪便、疑似污染物的水、食物等样本中的金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)，用于金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
金黄色葡萄球菌PCR反应液(SEB-PCR MIX) 1管 672μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
阴性对照(NTC) 1管 50μL/管
肠毒素B阳性对照(SEB-PTC 107copies/μL) 1管 50μL/管
肠毒素B阳性对照(SEB-PTC 106copies/μL) 1管 50μL/管
肠毒素B阳性对照(SEB-PTC 105copies/μL) 1管 50μL/管
肠毒素B阳性对照(SEB-PTC 104copies/μL) 1管 50μL/管
肠毒素B阳性对照(SEB-PTC 103copies/μL) 1管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、PCR仪器适用范围
ABI系列，Roche系列等PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 食品样品：样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》(GB 4789.10-2010)要求进行。
6.1.2 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.3 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。
6.2.1液体培养物：取液体培养物100μL加到1.5mL无菌离心管中，8000rpm离心3min，尽量吸弃上清，加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.2固体培养物：挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.4 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
 注：建议采用相关标准方法进行前增菌，并按照6.2.1方法进行提取。阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qPCR反应液(SEB-qPCR MIX)、酶混合液(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合液 1µL N×1µL
总量 15µL N×15µL
向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(SEB-PTC103、104、105、106、107copies/μL)5μL(建议由低浓度向高浓度顺序加入反应液，避免高浓度阳性对照品污染反应液)，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM，淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(SEB-PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明SEB核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明SEB核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行SEB qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明SEB核酸阳性；否则判为样本阴性。
（5） 标准曲线相关系数数值介于0.97~1之间。(相关系数数值等同于r2值)，根据斜率及Y轴截距列出计算公式，并通过标准曲线计算样品RNA含量拷贝数。
例如：Y轴截距=41.5 斜率=-3.83
公式为：Y=-3.83(logX)+41.5

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管最好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

我公司正在火爆促销细菌PCR检测试剂盒系列产品，欢迎您的垂询选购肠产毒性大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)荧光PCR检测试剂盒(ETEC)现货。