人类cDNA 分子生物学试剂

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括人类cDNA 分子生物学试剂在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：人类cDNA 分子生物学试剂
编号：WE0227
英文名：Human Placenta cDNA
产地：国产|进口
规格：100μl(20次反应)
  本产品是以人胎盘组织RNA为模板，Oligo(dT)以及Random为引物, 用百奥莱博的高灵敏度的逆转录酶反转录得到的PCR即用型cDNA，可用于PCR实验的阳性对照。纯度：OD260/280≈1.8

使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：

 

试剂	50μl体系	终浓度
10×Taq PCR Buffer with Mg2+	5μl	1×
dNTP Mix，2.5 mM each	4μl	200μM each
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Human Placenta cDNA	5μl
Taq DNA Polymerase，2.5 U/μl	0.5μl
RNase-Free Water	补水至50μl

注意：
1)引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)*离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×PCR Buffer中已经含有15 mM*离子，可根据丌同的引物对和模板来调节*离子浓度，由此优化反应体系。

2、将混合好的液体进行PCR反应。
3、结果检测：反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液后进行琼脂糖凝胶电泳检测。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

我公司的人类cDNA 分子生物学试剂，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：
BL0875 羊抗BSA免疫血清
ARB11264 人骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)血清中含量检测 Human bone morphogenetic protein receptor 1a,bmpr-1a ELISA KIT
硫*(代"酸")鱼精蛋白 HATU 53597-25-4
ARB11375 人前列腺特异性抗原(PSA)定量分析 Human prostate specific antigen,psa ELISA KIT
ARB12691 大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)含量分析 Rat coagulation factor ⅩⅢ,fⅩⅢ ELISA KIT
ARB12936 小鼠过敏毒素/补体片断4A(C4A)elisa检测 Mouse complement fragment 4a,c4a ELISA KIT
BTN60905 MMLV逆转录酶 MMLV Reverse Transcriptase
PY02-368  RVS肉汤  250克  
CYB167070 兔抗HRP
ARB10676 人血管紧张素Ⅶ(ANGⅦ)Elisa方法检测 
ARB11817 人膀胱肿瘤抗原(BTA)酶标法分析 Human bladder tumor antigen,bta ELISA KIT
荧光桃红B Casein 18472-87-2
BL1244 10×MOPS 缓冲液
PY08-040  胆盐乳糖培养基 10ml  10支/盒，用于药品大肠菌群、大肠杆菌和绿脓杆菌等的测定
ARB10571 人百日咳IgG(PT-IgG)酶联免疫定量检测 
ARB11669 人维生素D2(VD2)elisa检测说明书 Human vitamin d2,vd2 ELISA KIT
BL1418 "Western blotting(人IgG)
ARB11902 人磷酸烯醇式丙*(代"酮")酸羧激酶(PCK)酶联免疫定量检测 Human phosphoenolpyruvate carboxykinase,pck ELISA KIT
维拉帕米盐*(代"酸")盐 Boc-D-glutamine 152-11-4
雄酮 HA 53-41-8
D-天冬*酸 Carbonate Buffer solution 1783-96-6
人类cDNA 分子生物学试剂关键词：WE0227,人类cDNA,Human Placenta cDNA


·动物组织/细胞RNA提取试剂盒(含DNase I)
编号：WE0198
英文名称：RNAtiqu Tissue&Cell RNA Extraction Kit(DNase I)
规格：50次
  本试剂盒将高效的异硫*酸胍裂解技术与硅基质膜纯化技术相结合，可从动物细胞及组织中高效提取总RNA。起始样本一般最多30 mg组织或1x107细胞。本试剂盒还可回收未完全纯化的RNA、体外转录和酶促反应后得到的RNA。用本试剂盒可提取纯化分子量大于200碱基的高品质RNA，几乎无DNA残留。如果要进行对微量DNA非常敏感的RNA实验，残留的DNA可利用无RNase的DNase在柱上进行消化去除。提取的RNA可用于RT-PCR、 Nothern Blot、Dot Blot等下游实验。

试剂盒组成：

组份	50次
DNase I	1000 U
10×Reaction Buffer	1000μl
Buffer RL	35ml
Buffer RW1	30ml
Buffer RW2(浓缩液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free离心管(1.5ml)	50个

保存条件：DNase I及10×Reaction Buffer -20℃保存，其它组分室温(15～30℃)。

自备试剂：β-巯基乙醇、无水乙醇(新开封或提取RNA专用)。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、预防RNase污染，应注意以下几方面：
1)使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2)配制溶液应使用无RNase的水。
3)操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融，否则影响RNA提取的量和质量。
3、Buffer RL在使用前请加入β-巯基乙醇，1ml Buffer RL加10μl β-巯基乙醇。加入β-巯基乙醇的Buffer RL室温可保存1个月。
4、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer RW2中加入无水乙醇。
5、Buffer RL如果产生沉淀，可于56℃加热使其溶解后室温放置。
6、所有离心步骤均在室温下进行，且所有操作步骤动作要迅速。

操作步骤：
1、样品处理
① 组织：将组织在液氮中磨碎。每20-30 mg组织加600μl Buffer RL(使用前检查是否加入β-巯基乙醇)，组织样本少于20 mg加350μl Buffer RL。样品体积不超过Buffer RL体积的十分之一。
② 单层培养细胞：将细胞在培养瓶中直接裂解或处理成细胞悬液，离心得到细胞沉淀，弃上清，每6-10cm2培养面积加入600μl Buffer RL，小于6cm2加入350μl Buffer RL，反复吹打几次，使其充分裂解。
③ 细胞悬液：12000rpm(～～13400×g)离心1分钟弃上清，得到细胞沉淀。每5×106-1×107细胞加入600μl Buffer RL，少于5×106细胞加入350μl Buffer RL，反复吹打几次，使其充分裂解。
注意：
① 尽量除尽细胞培养基，细胞培养基可能抑制细胞的裂解影响RNA产量。
② 尽量使细胞充分悬浮并充分裂解，否则影响RNA产量。
2、样品充分裂解后，室温放置5分钟，使蛋白核酸复合物完全分离。
3、12000rpm离心2-5min，取上清进行以下操作。
4、向步骤3中得到的溶液中加入1倍体积(600μl 或350μl)的70%乙醇(无RNase水配制)，混匀。
注意：加入乙醇后可能会产生沉淀，不会影响后续实验。
5、将上步所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能将全部溶液加入吸附柱中，请分两次转入，12000rpm离心1分钟，弃废液。将吸附柱放回收集管中。
注意：吸附柱的最大载量为100μg，不要超载，否则会影响RNA的产量和纯度。
6、向吸附柱中加入350μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、配制DNase I 混合液：取52μl RNase-Free Water，向其中加入8μl 10×Reaction Buffer和20μl DNase I(1 U/μl)，混匀， 配制成终体积为80μl的反应液。
8、向吸附柱中直接加入80μl DNase I 混合液，20-30℃孵育15分钟。
9、向吸附柱中加入200μl Buffer RW1，12000rpm离心1分钟，弃废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱放回收集管中。
11、重复步骤10。
12、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干吸附柱中的无水乙醇。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
13、将吸附柱转入新的离心管中，向吸附膜中间位置加入30-50μl RNase-Free Water，室温放置1分钟，12000rpm离心1分钟，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。
注意：
① RNase-Free Wate体积不应小于30μl，体积过小影响回收率。
② 如果要提高RNA的产量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重复步骤13。
③ 如果要提高RNA浓度，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，重复步骤13。

储存条件：室温(15～30℃)。


人类cDNA 分子生物学试剂关键词：WE0227,人类cDNA,Human Placenta cDNA

BL1144 吖啶橙(AO)-EB双染色试剂盒
ARB13343 牛α-乳清蛋白(α-lActAlbumIn)ELISA代测服务 
97-67-6 L-Malic acid L-苹果酸
BL1173 土壤基因组DNA提取试剂盒
BTN100603 银染清除剂 Silver Stain Erasol
BTN100601 细胞核微量制备试剂盒 Nuclei Miniprep Kit
ET101 Taq DNA Polymerase
CBZ-D-天冬*酸 Poly I 78663-07-7
SJ0158 CMP 5"-单磷酸胞苷
BTN131056 TCEP溶液 TCEP Solution
ARB11228 人细胞周期素D2(CyclIn-D2)elisa检测操作说明书 Human cyclin-d2 ELISA KIT
对乙酰胺基*磺酰* Acetamide 121-60-8
PY01-187  鸡肉浸粉  250克|1公斤  
ARB10880 人抗高尔基体抗体(AGAA)Elisa分析 Human anti-golgi appaRatus antibody,agaa ELISA KIT
RN3601 "Allprep 组织/细胞RNA/DNA/Protein分提试剂盒
DP118 无内毒素质粒小提中量试剂盒
HC0150  芬兰枪头

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