- ¥6900
- 泽叶生物
- 中国/美国
- ZY130826-5
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
cDNA Library Construction Kit
- 库存：
60
- 供应商：
泽叶生物
- 规格：
5次
利用真核生物的各种组织或细胞中的Poly(A)+ RNA合成cDNA，然后进行基因 克隆，这在分子生物学实验中被广泛应用。这一技术的使用，使基因的结构解析 及目的蛋白的表达等变得更为方便。一般合成cDNA以及构建cDNA Library的方 法为： ① 合成与目的Poly(A)+ RNA相互补的双链cDNA；② 将双链cDNA与细菌 或病毒来源的载体进行重组； ③ 将重组体导入细菌或真核细胞内进行扩增， 构建 cDNA Library。构建成的cDNA Library可以用于cDNA的解析，或者进一步进行 体外转录或体外翻译等。本试剂盒是以动植物由来的Poly(A)+ RNA为模板合成双链 cDNA后，将双链cDNA与Plasmid Vector进行重组，构建质粒cDNA Library的试 剂盒。试剂盒中使用的载体pAP3neo含有SV40启动子，可以在哺乳动物细胞内进 行表达 具有下列特点：
1. 操作简便：使用Ready-to-Use型试剂。
2. 高灵敏度：能够高灵敏度地检出凋亡细胞的片断化DNA。
3. 高特异性：抑制完整的染色体DNA的混入，选择性地提取断片化DNA。
4. 快速操作：整体操作约需2.5小时。
5. 定 量 性： 与荧光色素组合可以对片断化DNA进行定量。
6. 安 全 性： 不使用苯酚氯等。
cDNA文库构建试剂盒使用及效果
详细使用步骤请参见使用手册。
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文献和实验RNA 构建cDNA文库要求的RNA量比做RACE和Northern blot的要多，在材料允许的情况下一般的试剂盒均推荐采用纯化总mRNA后进行反转录，这比直接采用总RNA进行反转录而构建的cDNA文库好，虽然后者也并不是不能做。老版本CLONTECH的SMART 4的中级柱子要求纯化后的总mRNA量最好在0.05-0.5微克左右，这就要求起始总RNA量较多。虽然有的试剂盒声称少至几十个纳克的总RNA也可以构建cDNA文库，但这是针对材料极为稀缺者而言，但起始RNA太少还是会或多或少影响文库构建
2特别适合研究一个基因在不同表达系统中的表达,对于后续的工作有利。 缺点: 1无论是Gateway还是Topo，封闭的系统仅适用于Invitrogen提供的表达载体，使得适用成本高。而且在启动子和目的基因间必需插入一段特定的噬菌体重组酶识别序列，对表达的影响不好估计。 2所得的并非都是全长cDNA 有不对之处忘大家指正 Clontech的: 采用的是SMART与Infusion技术：合成引物时两端对应
by annealing the mRNA to oligo-dT loaded magnetic beads which will greatly facilitate the subsequent recovery of the cDNA products. In either case the next step is a reverse transcriptase treatment which gives rise to a socalled DNA/RNA hybrid. 5. Oligo dG
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