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2~8℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)
- 库存:
218
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)北京价格,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×)
产地:国产|进口
编号:WE0287
品牌:百奥莱博
本产品为配制SDS-PAGE分离胶缓冲液,可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶,方便、快捷。产品中已加入10%SDS,使用时不用另外加入。
操作步骤:
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度,最佳胶浓度请参考附表1。
I 灌制分离胶(各试剂使用量请参考附表2)
1、参照凝胶模具说明书,装配好凝胶模具。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
3、加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel,凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5 cm或距梳齿约0.5 cm即可), 然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1 cm的水层,使凝胶表面保持平整。
5、静置30-60分钟,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后,表面凝胶已聚合。
II 灌制浓缩胶(各试剂使用量请参考附表3)
1、去除覆盖在分离胶上的水层。
2、将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
3、加入10%过硫*(代"酸")铵和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
4、将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
5、将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
6、静置10~20分钟,等待浓缩胶聚合。
7、待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
8、进行常规电泳操作。
附表1. SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
| SDS-PAGE 分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50-150 kD |
| 8%胶 | 30-90 kD |
| 10%胶 | 20-80 kD |
| 12%胶 | 12-60 kD |
| 15%胶 | 10-40 kD |
附表2. 配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5ml | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10ml | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15ml | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20ml | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5ml | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10ml | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15ml | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20ml | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5ml | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5ml | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5ml | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10ml | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15ml | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20ml | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3. 配制5%SDS-PAGE浓缩胶
| 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
| 2ml | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4ml | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6ml | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8ml | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
储存条件:2~8℃
关键词:4×,SDS-PAGE分离胶缓冲液(4×),WE0287,SDS-PAGE Separating Gel Buffer(4×)
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| 编号 | 名称 |
| WE0340 | 抗VSV-G标签单克隆抗体 |
| WE0348 | 抗c-Myc标签多克隆抗体 |
| WE0173 | 植物基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0249 | TA快速连接试剂盒(pUC-T) |
| WE0326 | 细胞周期与凋亡检测试剂盒 |
| WE0209 | 磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒 |
| WE0305 | 丽春红染色试剂 |
| WE0346 | 抗GFP标签单克隆抗体 |
| WE0289 | SDS-PAGE上样缓冲液(非还原,5×) |
| WE0108 | 2×Pfu MasterMix(含染料) |
| WE0229 | 二代测序DNA快速建库试剂盒(Illumina平台) |
| WE0247 | TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体,连接酶) |
| WE0291 | 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺溶液(29:1) |
| WE0113 | BaHF高保真DNA聚合酶 |
| WE0399 | 游离DNA样本保存管(10ml,PET) |
| WE0391 | AP标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0171 | 固定组织基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0283 | Tris-甘*酸蛋白电泳液(pH8.3, 10×) |
| WE0233 | DNA文库定量试剂盒(Ion Torrent平台) |
| WE0371 | 生物素化驴抗人IgG(H+L) |
| WE0256 | 蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂混合物 |
| WE0203 | DNA/RNA提取试剂盒 |
| WE0217 | 无RNA酶水 |
| WE0400 | 口腔拭子DNA样本保存管 |
| WE0282 | 多彩预染蛋白Marker |
| WE0139 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料) |
| WE0381 | Cy3标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0112 | 2×BaldStar Taq MasterMix(含染料) |
| WE0393 | HRP标记山羊抗小鼠IgG(H+L) |
| WE0192 | 超纯RNA提取试剂盒 |
| WE0394 | HRP标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0172 | 新型固定组织基因组DNA提取试剂盒 |
| WE0241 | 二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12) |
| WE0266 | His标签蛋白纯化试剂盒(包涵体蛋白) |
| WE0353 | 抗β-Actin单克隆抗体(植物) |
| WE0105 | BAmp DNA Polymerase |
| WE0165 | 酵母质粒提取试剂盒 |
| WE0293 | SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
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