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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 库存:
604
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml/500ml
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销售,产品线涵盖北京4×SDS-PAGE分离胶缓冲液价格厂家在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京4×SDS-PAGE分离胶缓冲液价格厂家
产地:国产|进口
编号:XH081
品牌:百奥莱博
4×SDS-PAGE分离胶缓冲液(PH=8.8)
含 1.5MTRIS-HCl PH8.8 0.4% SDS
如配制10ml分离胶,可加入此试剂2.5ml,不必再加5MTRIS-HCl 和SDS。
北京4×SDS-PAGE分离胶缓冲液价格厂家正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(干粉)
编号:XH059
规格:10L
所用试剂:Tris碱,甘氨酸和 SDS
含量配方: 30.3 Tris碱
188g 甘氨酸
10g SDS
此产品为干粉混合物。用时可以用双蒸水溶解成1L,配成10倍浓缩液,用时再稀释10倍。
配好的电泳液用于SDS-PAGE蛋白电泳。可反复使用三到五次,如果发现有明显沉淀或者漂浮时,请丢弃换新的。
·通用RT-PCR试剂盒(两步法M-MLV)
编号:XH050
规格:50T/100T
5×M-MLV Buffer、10×PCR Buffer、MgCl2(25mM)、RNase-free ddH2O在2-8℃保存一个月对实验无影响,Oligo(dT)16(10uM)、Random(N)6(10uM)、dNTPs(10mM)在2-8℃保存一周对实验无影响,为了你的实验方便和试剂的稳定性,请自行决定试剂存放温度。试剂解冻后请混匀离心后再使用。微量试剂打盖前请离心。
产品简介:
本试剂盒适用于各种 RNA制品的反转录反应以及随后的PCR扩增。它采用M-MLV进行反转录反应,能够获得较长的反转录产物。同时,在20ul反转录体系和50ul PCR反应体系中,还可以一次性得到足够量的PCR产物用于后续的克隆实验。本试剂盒使用方便、快捷,可广泛用于cDNA克隆及目的基因检测等分子生物学实验。
本产品配有两种引物,一种为Oligo(dT),另一种为随机引物(Random),如果用Oligo(dT)无法得到想要的结果,可以用随机引物(Random)试一下。
操作步骤:
一、反转录反应
1、在冰浴的无RNase的离心管(或者PCR管)中加入如下反应成分:
1-5ug总RNA或50-500ng mRNA
2ul Oligo(dT)16或2ul Random(N)6或者2 pmole基因特异性引物
补RNase-free ddH2O至13.5ul
2、70℃保温5min后迅速在冰上冷却2min,简短离心收集反应液后加入以下各组分:
4ul 5×M-MLV Buffer
1ul dNTPs
0.5ul Rnasin
1ul M-MLV
3、42℃温浴60min,如果是用随机引物,请先将离心管置25℃温浴10min,再42℃温浴60min。
4、95℃加热5min终止反应,置冰上进行后续实验或-20℃保存。
5、用RNase-free ddH2O将反应体系稀释到50ul,取2-5ul进行PCR反应。
二、PCR反应
1、按以下各组分配制50ul PCR反应体系:
10×PCR Buffer 5ul
MgCl2 4ul
dNTPs 1ul
上游引物(用户自备)
下游引物(用户自备)
RT反应产物 2ul
Taq Polymerase 0.5ul
ddH2O x ul
Total Volume 50ul
2、简短离心,上PCR仪扩增,琼脂糖观察结果。
注意事项:
1、用于cDNA合成反应的相关试剂和耗材尽可能用DEPC进行处理,并在高压灭菌后使用。有些试剂不能高压灭菌时,首先用经过灭菌的器具、水等配制溶液后,再将溶液进行过滤除菌处理。
2、试剂盒的各组分应避免反复冻融,有效期12个月。
3、RNA样品要避免反复多次冻融,应使RNA在冰浴中处于融化状态。
北京4×SDS-PAGE分离胶缓冲液价格厂家关键词:4×SDS-PAGE分离胶缓冲液,百奥莱博,XH081
·羊抗猪IgG(纯化抗体)
编号:XH092
规格:1mg/10mg
先以A蛋白纯化免疫球蛋白猪IgG,用此猪IgG免疫山羊,经过多次免疫后,测得山羊血清的效价达到要求后,动脉一次取血,静置得到血清,血清采用DEAE离子交换吸掉杂蛋白,再用硫酸铵沉淀,透析,定量等进一步处理得到纯化羊抗猪IgG抗体,此纯化抗体可以用于标记,免疫沉淀,ELISA等常规免疫学实验。
如果客户对抗体纯度要求更高,本公司可以定做免疫亲和纯化的抗体,以猪IgG结合在树脂上,吸附全部有活性的抗体,这样得到的抗体纯度更高,当然,成本也更高。
·辣根过氧化物酶(HRP)标记套装
编号:XH087
规格:一套
保存条件:HRP(辣根过氧化物酶)-20度保存,透析袋2-8度处理。其他常温保存。
产品说明:本套装是将HRP标记的常用试剂集合为一体而成。本操作流程为经碘的高碘酸氧化法。适合于蛋白等含有氨基物质的标记。特别是抗体的标记。
如果待标记物分子量太小(如小于15KD),可能会穿过透析袋而造成样品损失。
标记原理:在低PH下使RP经NaIO4氧化后形成的醛基可蛋白等分子的氨基相连,形成斯夫氏硷,后者可进一步用NaBH4还原生成稳定的酶标记物。
操作方法:
一, 标记量的计算:HRP(辣根过氧化物酶)分子量为40KD左右。一般为HRP:待标记物=2:1到4:1之间。比如抗体IgG分子量一般为150-160KD。则10mg HRP可标记抗体在10mg-20mg之间。
二, 计算好各步反应时间。作好开始标记的准备工作,最好是从下午开始。将HRP(辣根过氧化物酶)一共10mg加入1ml双蒸水溶解。溶解后可放-20度存放一个月。如果想作两次标记,可适当称量5mg。但并不推荐称量更小的质量。以免产生更大误差。而且透析袋一般也只够两次用量。
三, 剪切合适长度透析袋,用双蒸水清洗三次备用。透析袋分宽窄两种,适合于不同量样品的透析,请自己安排。称取21.3mg NaIO4,加入0.5ml双蒸水溶解(现配现用,浓度为0.2M),将100mM乙酸钠(PH4.4)用双蒸水稀释100倍成1mM乙酸钠(PH4.4)。准备待标记物,如果待标记物本身盐含量很低并且缓冲力差,如生理盐水,可等二天再准备。如果不确定,将0.2M PH9.5 CB稀释20倍(请不要一次稀释完,留1-2ml左右备用),作为透析液,将待标记物装入透析袋中4℃透析过夜,透析袋适当留长约2ml体积的量以备第二天加入酶(透析袋使用请见附录)。
四, 以一次标记完为例,如果标记量小,可按比例减小试剂的用量。取0.2ml现配的NaIO4溶液加入HRP溶液中,混匀,避光常温反应两小时。装入透析袋中,在稀释过的乙酸钠(PH4.4)溶液中4℃透析过夜(透析袋使用请见附录)。
五, 第二天早上,如果样品为固体,可用水溶解,加入1/20体积的0.2M PH9.5 CB,混匀。取出活化好的HRP装入一适合离心管中,加入50ul 0.2M PH9.5 CB,混匀,立刻加入待标记物中,混匀。避光常温反应两小时。
六, 加0.1ml新配的10mg/ml NaBH4液,混匀,常温半小时。
七, 配制合适的透析液,如生理盐水或者PBS等。透析酶标记物。
八, 如果有条件进一步纯化,可透析半天后去进一步纯化,如果不纯化,请在4℃透析至少24小时。勤换液。
附透析袋使用方法:
本透析袋已预处理过,用双蒸水清洗后将水用适当吸一下。就可直接使用。透析袋上下都可以用铁夹,但如果铁夹不够用,下部可用细线或者其他的透析袋夹。
将透析袋轻轻的折上两到三折。用线或者透析袋夹封住,上面支开,加入待透析物,留一定量的空气在顶上,并小心的折一折,用铁夹夹住,轻轻的挤压,如没发现有液体流出,可放入透析液中。一般透析可用纯净水瓶去顶使用。用一次性筷子或者其他合适物穿过铁夹,将透析袋吊在透析液中,补充透析液,使透析液盖过透析袋中的液面而不要淹过铁夹下面。
北京4×SDS-PAGE分离胶缓冲液价格厂家关键词:4×SDS-PAGE分离胶缓冲液,百奥莱博,XH081
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文献和实验根据显色底物显色深浅判断靶基因蛋白的表达量。其检测过程(步骤)如下:显然,免疫印迹杂交试验步骤多,包含多个影响实验结果因素,如 SDS-PAGE 胶浓度、合适甲醇配比转膜缓冲液、一抗来源及其特异性等,而对结果影响较为显著的步骤是蛋白样品的提取与处理,SDS-PAGE 浓度对蛋白分离效果,转膜条件和一抗抗体选取和孵育条件等。本文主要通过比较实验,探讨后三个步骤对结果的影响。(一)SDS-PAGE对蛋白分离同 PCR 实验中琼脂糖浓度对不同长度 DNA 区分度不同,SDS-PAGE 胶中分离胶浓度合理选取
实验材料 •BSA(1 mg/ml),0.05 g的BSA(Sigma-Aldrich Ltd.)溶于50ml ddH2O中,每Eppendorf管约加入1ml溶液,并在-20℃下冷冻。 •预染色marker (Bio-Rad) •ProMarker(Wealtec) •两套玻璃板与校正卡,厚玻璃板与U形玻璃板,0.75 mm厚胶条和一个0.75 mm 10齿梳(Wealtec) •浓度为12%的SDS-PAGE分离胶(0.75 mm);2.31 ml ddH
L 缓冲液I 溶解包涵体;室温放置lh ;加9×缓冲液Ⅱ,室温放置30 min ,用KOH 调pH 到10.7 ;用HCI 调至pH 8 .0 ,在室温放置至少30 min ; 1000g 离心,15 min ,室温;吸出上清液并保留,用100 μL 2×凝胶电泳加样缓冲液溶解沉淀;取10 μL 上清,加10 μL 2× 凝胶电泳加样缓冲液,与20 μL 重新溶解的沉淀进行SDS-PAGE 。四、注意事项(1)不同的大肠杆菌表达载体带有不同的启动子和诱导成分。实验者必须根据特定系统和用途决定
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