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- 2025年06月28日
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3年
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pAX01
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100
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上海柯雷生物
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20ul
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柯雷生物拥有数万种质粒，菌种，基因，细胞株，试剂盒等科研资源，还提供基因合成，质粒改造，载体构建和蛋白表达等精品实验服务
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文献和实验Marburg遗传背景清楚，是研究枯草芽孢杆菌的标准菌株；AS1作为胞内表达的备用菌株，常用于表达外源蛋白。而胞外蛋白酶缺陷菌株WB800N能有效解决由于枯草芽孢杆菌丰富的蛋白酶导致的蛋白表达产物降解问题。 2 给力的表达载体 大部分的枯草芽孢杆菌不含内源性质粒，并且一般不能识别大肠杆菌中的启动子。最初的枯草芽孢杆菌载体源于金黄色葡萄球菌，其结构不稳定并易丢失。现在普遍使用的质粒载体是由枯草芽孢杆菌隐性质粒与大肠杆菌质粒构成的穿梭载体，可在大肠杆菌中完成基因片段的连接克隆
)，进而造成基因的移码突变而达到基因敲除的目的。此外，还可以通过同源重组等方式达到对基因精确编辑的目的。事实上，在此之前已经发展了多种基因编辑工具，如：ZFN，TALEN 等，但实际应用不方便或成本过高。CRISPR/Cas9 系统则相对较为简单，廉价，高效，而且可以多处打靶。此外，在内切酶活性失活的 Cas9 蛋白后加入 KRAB/VP64 等 effector 形成融合蛋白，可对下游基因进行调控。怎么用？如果是对于细胞的编辑可通过导入编码 guide RNA 和 Cas 9 的质粒；若是做动物
等）。上述方法中，实验室最常用的方法当属是脂质体转染（质粒转染）。 质粒转染操作简单，分为瞬时转染和稳定转染。针对不同属性细胞系，选择转让方式时要做足功课，千万不要图方便，否则转染效率简直崩溃。影响转染效率的因素有很多，比如准备不充分、转染条件不佳；再比如细胞株本身的特性和活性、细胞污染，转染的DNA/RNA的质量，转染方法，转染试剂的选择等，小编总结了这11个注意事项，一起来学习吧！ 01血清条件下的细胞转染 转染可以使用血清，前提是DNA-阳离子脂质体复合物形成时不含血清，否则会降低转染
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