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pENTR223-IWS1(LT732735.1)
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上海柯雷生物
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20ul
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文献和实验. 可以分开管扩增(内参基因和目的基因单独扩增,用SYBR One只能如此.) 用探针可以在同管, 但是会麻烦(条件难摸). 5. 目的基因和内参基因转入细菌质粒里,然后抽提,以这个为模板梯度稀释做标准曲线,看二者斜率是否一致,然后判断扩增效率是否一致,这种方法有依据. 有Paper这样做, 还有的用PCR产物为模板梯度稀释做标准曲线. 个人认为用质粒为模板梯度稀释做标准曲线比较方便. 质粒稳定, 易得,浓度高, 纯度高. 做标准曲线一般10X或5X稀释最少4-5个梯度才能做标准曲线, cDNA很难
研究项目——“人类重大疾病的蛋白质组学研究”，也是首次由我国领导的重大国际合作计划“人类肝脏蛋白质组研究计划”的执行主席。(y) 现为蛋白质组学权威杂志Proteomics 编委。 课件题目：人胎肝蛋白质组及其与转录组的比较 课件简介：主要介绍他们肝脏蛋白质组的一些相关工作，分为如下6个方面： 1、基因表达谱 利用大规模cDNA测序，完成了15,000多个表达序列标签（EST）的测定。完成了胎肝基因表达谱的构建， 其中含1660个已知基因，5千余个代表新基因的 ESTs。 2、蛋白质表达
片段2 [60fmol (~10ng)]C和F载体1 （60fmol）和外源插入片段3 （60fmol）D线状载体（5’-磷酸化）（60fmol）G环状载体[60fmol (~10ng)]1 载体DNA 已进行去磷酸化2 外源目的DNA 可以连接接头。3 连接反应中，质粒载体和插入的DNA 片段摩尔比一般为1：1。DNA 的总浓度应约为10ng/μl。（1）A、B和C管中加入：10×连接缓冲液 1.0μlT4噬菌体连接酶 0.5 Weiss单位5 mmol/L ATP
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