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低温运输
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长期
- 英文名:
Endonuclease VIII
- 库存:
243
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
核酸内切酶VIII销*(代"售")由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多核酸内切酶VIII等工具酶产品请联系我司咨询订购。
名称:核酸内切酶VIII销*(代"售")
编号:BTN130642
英文名:Endonuclease VIII
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:1000U
大肠杆菌核酸内切酶Ⅷ既有N -糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -糖基化酶活性可释放双链DNA上受损的嘧啶碱基,产生一个脱嘧啶(AP)位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的3´和5´端切割磷酸二酯键,产生5´磷酸和3´磷酸末端。能被核酸内切酶 Ⅷ 识别并切除的受损碱基包括:尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二*胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 Ⅷ与核酸内切酶 III的活性相似,但核酸内切酶 Ⅷ 具有β和δ裂解酶活性,而核酸内切酶 III 只有β裂解酶活性。
产品特点:
➤ 单细胞凝胶电泳(彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数,1:10⁴〜1:10⁵;
➤ 碱洗脱;
➤ 碱解旋。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
热失活:75℃ 10分钟。
活性定义:1单位指在 10μl缓冲液体系中,37℃条件下,1小时内能够切割1pmol含一个AP位点的34bp寡核苷酸双链所需要的酶量。
AP位点的创建方法如下:37℃条件下,用1单位尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)处理10pmol含单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链2分钟。
欲咨询购买核酸内切酶VIII销*(代"售"),请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
ARB12359 大鼠表皮生长因子(EGF)定量分析 Rat epidermal growth factor,egf ELISA KIT
HC0073 300ul吸头
BTN100835 胃蛋白酶抑制剂溶液 Pepstatin Solution
ARB12197 大鼠半胱*酸蛋白水解酶(cAspAse-12)Elisa方法检测 Rat caspase ELISA KIT
ARB12882 小鼠丙*(代"酮")酸激酶(PK)ELISA检测服务 Mouse pyruvate kinase,pk ELISA KIT
ARB12364 大鼠转化生长因子β(TGF-β)代做ELISA实验 Rat transforming growth factor-β,tgf-β ELISA KIT
ARB12581 大鼠凋亡诱导因子(AIF)免费代测 Rat apoptosis inducing factor,aif ELISA KIT
DN0201 小量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)
124-20-9 Spermidie 亚精胺
青霉素链霉素两性霉素B溶液 Zinc Glycinate
DL-异柠檬酸三*盐 Bromophenol blue 1637-73-6
BTN131190 分子生物学级糖原溶液 Glycogen Solution
DN4201 蛋白酶K
维生素K3 K-Lyte 58-27-5
核酸内切酶VIII销*(代"售")关键词:核酸内切酶VIII,Endonuclease VIII,BTN130642
BL1281 10×PBS,PH7.2-7.4,细胞培养级
ARB10628 人血清白蛋白(HSA)Elisa方法检测 Human sreum albumin,hsa ELISA KIT
L-高丝*酸 N-Acetyl-L-phenylalanine 672-15-1
柠檬酸* Itaconic acid 5785-44-4
NF-222 羊抗人AFP
N-羟基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亚胺 Citrinin 21715-90-2
阿拉西A Sunset Yellow FCF 9049-98-3
ARB12742 小鼠Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)含量检测 Mouse n-terminal procollagen Ⅲ proPeptide,pⅢnp ELISA KIT
3,3,5,5-四甲基联*(代"*")*(代"胺") High range protein MW marker 54827-17-7
乙酰辅酶A 2-Aminothiazol-4-acetic acid 102029-73-2
ARB13237 小鼠蛋白*(代"磷")酸酶(PP)Elisa方法检测 Mouse protein phosphatase,pp ELISA KIT
腺嘌呤 PAR 73-24-5
96949-21-2 中性树胶
ARB11909 人癌胚铁蛋白(CEF)elisa检测说明书 Human carcinoembryonic ferritin,cef ELISA KIT
E0606 脱纤维裂解驴血(无菌) 100ml/500ml
ARB13390 牛瘦素(LEP)含量分析
ARB12849 小鼠内源性糖皮质激素(GC)定量分析
F020104 兔抗酪蛋白抗体 Rabbit Anti-casein
PY02-079 明胶培养基基础 250克
T4 RNA连接酶 TTAC
117-39-5 槲皮素 Meletin或Sophretin
核酸内切酶VIII销*(代"售")关键词:核酸内切酶VIII,Endonuclease VIII,BTN130642
·非冻型血液RNA保存液
编号:BTN111202
英文名称:RNAhold Blood RNA non-freezing preservation solution
规格:100mL
由于血液富含RNase,因此血液RNA非常容易降解,是临床分子生物学研究中的一个棘手的问题。为解决此问题,本公司在非冻型组织RNA保存液的基础上,开发了本产品。
产品特点:
1. 能快速渗透到新鲜血液细胞内,抑制RNA分子的降解。保存的血液RNA常温可放置3天,4℃可放置5天,-20℃可放置3个月。
2. 操作简单,直接将本产品和新鲜血液细胞沉淀按比例混合即可。
3.适用于人新鲜血和哺乳动物新鲜血液,不适用于陈旧血液和冻凝血液,也不适用于禽类血液和其他动物血液。
4. 重复性好,效果跟进口同类产品相当。
5. 保存的样品可直接用本公司血液RNA提取试剂盒提取RNA。
储存条件:室温运输及保存,有效期两年。
使用方法:
注意:RNase污染无处不在,最好用本公司的高效无毒固相RNase清除剂处理RNA工作区域,千万不要使用烷基化试剂DEPC(相当于芥子*(代"气"))。
一:以白细胞为材料的保存方法(此法效果好于全血保存法)
1.室温1500-2000 g离心新鲜抗凝血液10-15分钟,最上层为血浆,最下层为红细胞,中间层为膜状的、含白细胞的Buffy Coat(含白细胞多的血液此层可能很厚)。
2. 吸出血浆后,小心将中间的白细胞层吸出(允许污染部分红细胞)到新的离心管中,加入5-10倍体积的本产品,混匀后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜,然后再离心去除保存液,最后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃,冰晶会刺破白细胞,释放出其中的RNA,在后续实验去掉上清时会丢失)。
二:以EDTA抗凝全血为材料的保存方法
3. 将血液取到EDTA抗凝管中后,迅速将0.5mL血液与1.5mL本产品混合,充分颠倒混匀,然后放常温(不超过30℃)保存不超过3天或者放-20℃保存3月(放-20℃前需要现在4℃放置过夜,然后再离心去除保存液,最后再把细胞沉淀放到-20℃。如果直接放入-20℃,冰晶会刺破白细胞,释放出其中的RNA,在后续实验去掉上清时会丢失)。
三:血液RNA的提取(本产品不含RNA提取试剂。此处以本公司的跟Trizol相当的动物RNA提取试剂盒操作步骤为参考。用户也可以使用其他RNA纯化试剂)
4. 提取RNA时,如果保存的白细胞在-20℃,则需要先室温化冻,如果保存在常温或4℃,则直接使用。
5. 取1.8mL混合液到新的2mL离心管中,5000g室温离心1分钟。
6.小心吸弃上清液(本产品),细胞将形成沉淀(如果样品时全血,沉淀中将含有大量血液蛋白)。注意:上清一般会很浑浊,一定要尽可能弃尽。有时沉淀上面有白色晶体出现,属于正常现象。
7.在细胞沉淀中加入动物RNA提取试剂盒 1mL溶液A,剧烈震荡30秒(不能感觉到震荡即可,一定要看见管底液体旋转起来,否则只是液体表面的震动,下同)。震荡后颠倒几次看溶液是否均匀,如果有颗粒状物体说明还需要震荡裂解。
8.室温放置5分钟以使细胞充分裂解。
9. 将0.2mL自备的*仿加入到离心管中,剧烈震荡30秒。
10. 12000~15000g4℃离心3分钟。一般上清为无色的水相(含RNA,约0.5-0.9mL);中间层为白色,含有DNA、蛋白质和其他细胞破碎物,不要触及;下层为有机相,一般呈深红色。注意:有时水相比重大于有机相,出现反相现象,此时应该取下面的水相。
11.小心将水相转移到另一自备的1.5mL塑料离心管中。如果水相超过0.75mL,则需要分成2管,否则在下步没法加入等体积的异丙醇。
12. 加入等体积的异丙醇到水相中,充分颠倒混匀。
13. 12000~15000g4℃离心10分钟沉淀RNA。
14. 吸弃上清。注意:如果离心后出现两个相,则需要吸弃上面的一相,然后在下相(含RNA)中加入一倍体积的超纯水和一倍体积的异丙醇,混匀后12000~15000g4℃离心10分钟沉淀RNA,吸弃上清。
15. 将75% RNase-free乙醇加入到RNA沉淀中,震荡几秒后12000~15000g4℃离心1分钟。
16. 弃上清
17. 12000~15000g4℃离心半分钟,用移液枪去除残留的液体。
18. 将20-50μL DEPC处理的水加入到沉淀中并吹打溶解,立即用于下述完整性、产率和纯度的检测,也可直接用于后续RT-PCR等试验或存放于-80℃待用。
四: RNA的检测(列出步骤仅供参考,本产品不提供相关产品)
19. RNA完整性的电泳检测:强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳,因为非变性胶中单链RNA分子会自生折叠成各种形状,尤其不能使用DNA上样液,因为没有经过去RNase处理。
20. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA用TE缓冲液(pH8.2)稀释10倍后检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出RNA的产量(浓度X体积)和产率(RNA产量/组织用量)。人血RNA产率一般为2-5μg/mL。
21. RNA纯度测定:无污染的总RNA的OD260/OD280一般在2.0左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响RT-PCR等反应。
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文献和实验在核酸水解酶中,为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶,与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为 DNaseⅠ、 DNaseⅡ等仅分解 DNA的酶;脾脏 RNase、 RNaseT1 等仅分解 RNA的酶。如链孢霉( Neurospora)的核酸酶就是既分解 DNA又分解 RNA的酶。一般来说,大都不具碱基特异性,但也有诸如脾脏 RNase、 RNaseT1 等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。
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