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- LMAI Bio
- 上海
- LM130642-1000
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Endonuclease VIII
- 库存：
大量
- 供应商：
联迈生物
- 规格：
1000U
核酸内切酶 VIII产品及特点：
大肠杆菌核酸内切酶 Ⅷ 既有 N -糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -糖基化酶活性可释放双链 DNA 上受损的嘧啶碱基，产生一个脱嘧啶 (AP) 位点。AP-裂解酶活性则分别在 AP 位点的 3 和 5 端切割磷酸二酯键，产生 5 磷酸和 3 磷酸末端。能被核酸内切酶 Ⅷ 识别并切除的受损碱基包括：尿素、5,6-二羟基胸腺嘧啶、胸腺嘧啶乙二醇、5-羟基-5-甲内酰脲、尿嘧啶乙二醇、6-羟基-5,6-二氢胸腺嘧啶和甲基羟丙二酰脲 。尽管核酸内切酶 Ⅷ 与核酸内切酶 III 的活性相似，但核酸内切酶 Ⅷ 具有 β 和 δ 裂解酶活性，而核酸内切酶 III 只有 β 裂解酶活性。其反应示意图如下：
具体有下列特点：
1. 单细胞凝胶电泳（彗星试验），彗星试验的推荐稀释倍数，1∶104～1∶105
2. 碱洗脱
3. 碱解旋
核酸内切酶 VIII反应条件
1X Endonuclease VIII 反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl，75 mM NaCl，1 mMEDTA（pH 8.0 @25℃）]，37℃ 温育。
单位定义
1 单位指在 10 μl 缓冲液体系中，37℃ 条件下，1 小时内能够切割 1 pmol 含一个 AP 位点*的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。 AP 位点的创建方法如下：37℃条件下，用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶 (UDG)处理 10 pmol 含单一尿嘧啶碱基的34 bp 寡核苷酸双链 2 分钟。
Buffer 成分
10 mM Tris-HCl，250 mM NaCl，0.1 mM EDTA，50% Glycerol，pH 8.0@ 25℃
热失活
75℃ 10分钟。
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文献和实验在核酸水解酶中，为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶，与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看，可分为 DNaseⅠ、 DNaseⅡ等仅分解 DNA的酶；脾脏 RNase、 RNaseT1 等仅分解 RNA的酶。如链孢霉（ Neurospora）的核酸酶就是既分解 DNA又分解 RNA的酶。一般来说，大都不具碱基特异性，但也有诸如脾脏 RNase、 RNaseT1 等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。
Alphabetic List of Commercial Isoschizomers and Corresponding Fermentas Restriction Endonucleases Information on commercially available restriction endonucleases is from: Roberts, R.J. and Macelis, D., Nucleic Acids Res
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